Linea cellulare MG-63: una guida dettagliata alle cellule MG-63 nella ricerca sull’osteosarcoma

Le cellule MG-63 sono cellule di osteosarcoma umano di tipo fibroblastico che offrono un'ampia gamma di applicazioni di ricerca in campo biomedico. Tra queste figurano lo studio dei processi legati alle ossa, quali lo sviluppo osseo, la differenziazione, ecc. Inoltre, la linea cellulare MG-63 funge da modello in vitro adatto allo studio della vitalità, della proliferazione e dell’adesione delle cellule ossee.

Caratteristiche generali e origine della linea cellulare MG-63

Questa sezione dell’articolo tratterà l’origine e le caratteristiche generali della linea cellulare MG-63. Imparerete: Che cos’è la linea cellulare MG-63? Qual è l’origine della linea cellulare MG-63? Qual è la morfologia delle cellule MG-63? Qual è la dimensione delle cellule MG-63?

• La MG-63 è una linea cellulare di osteoblasti derivata dall’osso di un paziente maschio di 14 anni affetto da osteosarcoma (di razza caucasica). A. Billiau e colleghi hanno depositato questa linea cellulare nel 1977.
• La linea cellulare MG-63 presenta una morfologia simile a quella dei fibroblasti.
• Le cellule di osteosarcoma umano (MG-63) presentano ipotriploidia. Il numero cromosomico modale per queste cellule è 66, che si riscontra in circa il 44% della popolazione cellulare. Sono state segnalate anche ploidi più elevate in quasi il 2% della popolazione cellulare. Inoltre, in tutte le cellule sono presenti in abbondanza 18-19 cromosomi marcatori.

Immagine al microscopio a scansione elettronica (SEM) di una coltura cellulare di sarcoma.

Informazioni sulla coltura della linea cellulare MG-63

Informazioni importanti sui requisiti di coltura della linea cellulare possono semplificare il vostro lavoro. Questa sezione dell’articolo elenca tutti i punti chiave fondamentali per la coltura e il mantenimento delle cellule MG-63. Qui imparerete: qual è il tempo di raddoppio delle cellule MG-63? Quale terreno di coltura viene utilizzato per le cellule MG-63? Qual è la densità di semina delle cellule MG-63?

Punti chiave per la coltura delle cellule MG-63

Tempo di raddoppio

Il tempo di raddoppio della popolazione delle cellule MG-63 varia tra le 28 e le 38 ore, a seconda delle condizioni di coltura.

Proprietà di crescita

MG-63 è una linea cellulare aderente.

Densità di semina

Per le cellule MG-63 si raccomanda una densità cellulare di 1 x 10^⁴ cellule/cm². Le cellule aderenti vengono lavate con soluzione salina tamponata con fosfato (PBS) 1x priva di magnesio e calcio. Successivamente, queste cellule vengono incubate con una soluzione di dissociazione (Accutase), a cui viene aggiunto terreno fresco, e infine centrifugate. Il pellet cellulare raccolto viene risospeso in terreno fresco e trasferito in una nuova fiasca per la crescita.

Terreno di coltura

Per la coltura delle cellule MG-63 si utilizzano i terreni di coltura DMEM o Ham's F12. Questi terreni possono essere integrati con siero fetale bovino (FBS) al 5%, 3,0 g/L di glucosio, 2,5 mM di L-glutammina e 1,2 g/L di NaHCO₃ per garantire una crescita cellulare ottimale. I terreni di coltura devono essere sostituiti 2-3 volte alla settimana.

Condizioni di coltura

Per la coltura delle cellule MG-63 sono necessari un incubatore umidificato a 37 °C e un'alimentazione di CO₂ al 5%.

Conservazione

Queste cellule di tipo osteoblastico possono essere conservate nella fase vapore dell’azoto liquido o a temperature inferiori a -150 °C per mantenere la vitalità cellulare.

Processo di congelamento e terreno di coltura

Per il congelamento delle cellule MG-63 si utilizzano i terreni di coltura CM-1 o CM-ACF. In genere si raccomanda un processo di congelamento lento per evitare lo shock termico alle cellule e preservarne la vitalità.

Processo di scongelamento

Le cellule congelate vengono incubate per 40-60 secondi in un bagno d’acqua preriscaldato (37 gradi Celsius). Le cellule vengono risospese in terreni di coltura freschi e trasferite in un nuovo pallone. Dopo 24 ore di incubazione, il terreno di coltura viene sostituito per rimuovere i componenti del terreno utilizzato per il congelamento.  

Livello di biosicurezza

Per la manipolazione e la manutenzione delle colture di MG-63 sono necessari laboratori con livello di biosicurezza 1.

Cellule MG-63 prima e dopo aver raggiunto la confluenza.

Linea cellulare MG-63: vantaggi e svantaggi

La MG-63 è una linea cellulare osteoblastica ampiamente utilizzata. Presenta diversi vantaggi e svantaggi. Di seguito elencheremo alcuni dei principali pro e contro della linea cellulare MG-63.

Vantaggi

I vantaggi delle cellule MG-63 sono:

• Caratteristiche simili a quelle degli osteoblasti

  La linea cellulare MG-63 presenta caratteristiche simili a quelle degli osteoblasti, il che la rende adatta allo studio dei processi e delle patologie legate alle ossa. Può inoltre essere utilizzata per studiare l’adesione, la proliferazione e la vitalità cellulare sulle superfici in titanio [1].

• Idoneità alla trasfezione

  Le cellule MG-63 sono ampiamente utilizzate negli studi di trasfezione, consentendo la ricerca sull’espressione genica, la funzione e i processi cellulari.

• Elevata produzione di interferone

  Le cellule MG-63 sono in grado di produrre livelli elevati di interferone. Se indotte con cicloesimide, acido poliinosinico-policitidilico e actinomicina, possono produrre una quantità di interferone per cm² 3,7 volte superiore rispetto ai fibroblasti diploidi [2].

Svantaggi

Gli svantaggi associati alle cellule B MG-63 sono:

• Eterogeneità

  Le cellule MG-63 presentano eterogeneità all’interno della popolazione cellulare, il che può influire sulla riproducibilità.

• Linea cellulare tumorale

  MG-63 è una linea cellulare tumorale e potrebbe non rappresentare appieno il comportamento e la fisiologia delle cellule normali, limitandone l’applicazione in determinati esperimenti di laboratorio.

Ordina oggi stesso le tue cellule MG-63

Applicazioni delle cellule MG-63

Le cellule MG-63 rappresentano un eccellente strumento di ricerca. Offrono numerose applicazioni promettenti nel campo della ricerca. Di seguito sono elencate alcune delle principali applicazioni di ricerca delle cellule MG-63.

• Studio dei processi e delle patologie ossee: le cellule MG-63 sono cellule simili agli osteoblasti (formatrici di osso). Pertanto, queste cellule sono ampiamente utilizzate per studiare le patologie ossee e i processi cellulari, tra cui lo sviluppo, la differenziazione e la mineralizzazione. Inoltre, le cellule sono ampiamente impiegate per lo screening di farmaci terapeutici volti a favorire la guarigione ossea. Una ricerca ha utilizzato le cellule MG-63 per studiare il potenziale terapeutico delle nanoparticelle di ossido di zinco sintetizzate con metodo «verde» a partire dalla Scutellaria baicalensis sulla proliferazione, la mineralizzazione e la differenziazione delle cellule ossee [3].
• Ricerca sul cancro: le cellule MG-63 sono ampiamente utilizzate nella ricerca sul cancro. Diversi studi hanno impiegato queste cellule di osteosarcoma per comprendere le vie di segnalazione del cancro e valutare il potenziale citotossico e terapeutico dei farmaci. Uno studio condotto nel 2019 ha esplorato le proprietà antitumorali di un composto naturale, la tomentosina, utilizzando le cellule MG-63. I risultati hanno dimostrato che la tomentosina esercita effetti antitumorali innescando la produzione intracellulare di specie reattive dell’ossigeno (ROS) [4].

Pubblicazioni di ricerca che trattano delle cellule MG-63

Di seguito sono riportate alcune pubblicazioni di ricerca che trattano della linea cellulare MG-63, simile agli osteoblasti.

miR-192 aumenta la sensibilità delle cellule tumorali di osteosarcoma MG-63 al metotrexato

Questo articolo è stato pubblicato sulla rivista *Pathology - Research and Practice* nel 2020. Questa ricerca ha utilizzato le cellule MG-63 per studiare i meccanismi molecolari coinvolti nella resistenza ai farmaci nelle cellule tumorali dell’osteosarcoma (MG-63). I risultati hanno rivelato che il miRNA-192 potrebbe rappresentare un bersaglio utile per superare la resistenza al metotrexato nell’osteosarcoma.

Le nanoparticelle di ossido di zinco sintetizzate con metodo ecologico regolano l’espressione dell’apoptosi nelle cellule tumorali ossee MG-63

Questa ricerca è stata pubblicata sulla rivista *Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology* (2020). Lo studio ha riportato il potenziale antitumorale delle nanoparticelle di ossido di zinco (ZnONPs) sintetizzate con metodo «verde» a partire dalla *Rehmanniae Radix* contro le cellule tumorali ossee (MG-63).

Differenziazione osteogenica e potenziale di mineralizzazione delle nanoparticelle di ossido di zinco derivate dalla Scutellaria baicalensis su cellule MG-63 simili agli osteoblasti umani

Questo articolo di ricerca è stato pubblicato nel 2021 sulla rivista *Materials Science and Engineering*. Lo studio ha evidenziato le proprietà di guarigione ossea delle nanoparticelle di ossido di zinco biosintetizzate dalla pianta *Scutellaria baicalensis*, utilizzando la linea cellulare MG-63.

La curcumina inibisce la proliferazione e l’invasione delle cellule MG-63 attraverso l’inattivazione della via p-JAK2/p-STAT3

Questo studio è stato pubblicato nel 2021 sulla rivista *Onco Targets and Therapy*. La ricerca ha evidenziato le proprietà antitumorali della curcumina contro le cellule di osteosarcoma. Il composto ha esercitato questi effetti terapeutici inattivando la via di segnalazione tumorale p-JAK2/p-STAT3.

Influenza della vitamina D3 trattata con biofield sulla proliferazione, la differenziazione e la maturazione dei parametri ossei nella linea cellulare MG-63

Questa ricerca è stata pubblicata nel 2018 sull’International Journal of Biomedical Engineering and Clinical Science. Lo studio ha rilevato che la vitamina D3 trattata con energia del biocampo influenza positivamente la proliferazione, la maturazione e la differenziazione delle cellule ossee e migliora i parametri relativi alla salute delle ossa.

Risorse per la linea cellulare MG-63: protocolli, video e altro

Sono disponibili diverse risorse sulla linea cellulare MG-63 che illustrano i protocolli di coltura cellulare e trasfezione.

• Trasfezione delle cellule MG-63: questo video illustra in modo esaustivo il protocollo di trasfezione per le cellule MG-63.
• Passaggio delle cellule aderenti: questo video illustra come effettuare la subcoltura o il passaggio delle linee cellulari aderenti. Vi aiuterà ad apprendere i protocolli di base per la coltura cellulare.

Il seguente link vi fornirà il protocollo di coltura per le cellule MG-63.

• Coltura delle cellule MG-63: questo sito web fornisce un protocollo semplice e dettagliato per la subcoltura o la divisione della linea cellulare MG-63.

Domande frequenti sulle cellule MG-63

Riferimenti

1. Wandiyanto, J.V., et al., Il destino delle cellule MG-63 simili agli osteoblasti su superfici in titanio nanostrutturate battericide pre-infettate. Materials (Basel), 2019. 12(10).
2. Billiau, A., et al., Interferone umano: produzione di massa in una linea cellulare di recente creazione, MG-63. Antimicrob Agents Chemother, 1977. 12(1): pagg. 11-5.
3. Tang, Y., et al., Differenziazione osteogenica e potenziale di mineralizzazione delle nanoparticelle di ossido di zinco derivate dalla Scutellaria baicalensis sulle cellule MG-63 simili agli osteoblasti umani. Materials Science and Engineering: C, 2021. 119: p. 111656.
4. Lee, C.M., et al., La tomentosina mostra un effetto antitumorale nelle cellule MG-63 di osteosarcoma umano attraverso l’induzione di specie reattive dell’ossigeno intracellulari. International journal of molecular sciences, 2019. 20(6): p. 1508.