Celična linija MG-63: Podroben vodnik po celicah MG-63 v raziskavah osteosarkoma

Celice MG-63 so fibroblastom podobne človeške osteosarkomske celice, ki ponujajo široko paleto raziskovalnih možnosti na biomedicinskem področju. To lahko vključuje preučevanje procesov, povezanih s kostmi, kot so razvoj kosti, diferenciacija itd. Poleg tega celična linija MG-63 služi kot primeren in vitro model za preučevanje vitalnosti, proliferacije in adhezije kostnih celic.

Splošne značilnosti in izvor celične linije MG-63

V tem delu članka bomo obravnavali izvor in splošne značilnosti celične linije MG-63. Izvedeli boste: Kaj je celična linija MG-63? Kakšen je izvor celične linije MG-63? Kakšna je morfologija celic MG-63? Kakšna je velikost celic MG-63?

• MG-63 je vrsta celične linije osteoblastov, ki izvira iz kosti 14-letnega moškega bolnika z osteosarkomom (kavkazske rase). A. Billiau in sodelavci so to celično linijo deponirali leta 1977.
• Celična linija MG-63 ima morfologijo, podobno fibroblastom.
• Človeške osteosarkomske celice (MG-63) kažejo hipotriploidijo. Modalno število kromosomov za te celice je 66, kar se pojavi pri približno 44 % celične populacije. Višje ploidije so zabeležene tudi pri skoraj 2 % celične populacije. Poleg tega je v vseh celicah veliko 18–19 markernih kromosomov.

SEM-posnetek kulture sarkomskih celic.

Informacije o gojenju celične linije MG-63

Pomembne informacije o zahtevah za gojenje celične linije vam lahko olajšajo delo. V tem delu članka so navedene vse ključne točke, ki so bistvene za gojenje in vzdrževanje celic MG-63. Tukaj boste izvedeli: Kakšen je čas podvojitve celic MG-63? Katera gojišča se uporabljajo za celice MG-63? Kakšna je gostota posejanja celic MG-63?

Ključne točke za gojenje celic MG-63

Čas podvojitve

Čas podvojitve populacije celic MG-63 znaša med 28 in 38 urami, odvisno od pogojev gojenja.

Lastnosti rasti

MG-63 je adhezivna celična linija.

Gostota posevka

Za celice MG-63 se priporoča gostota nasaditve 1 x 10^⁴ celic/cm². Adhezivne celice se speremo s 1× fosfatnim pufrom (PBS) brez magnezija in kalcija. Nato se celice inkubirajo z raztopino za disociacijo (Accutase), dodamo svež gojišče in centrifugiramo. Zbrani celični pelet se ponovno suspendira v svežem gojišču in prenese v novo kolbo za rast.

Gojilno gojišče

Za gojenje celic MG-63 se uporabljata gojišča DMEM ali Ham's F12. Ta gojišča se lahko za optimalno rast celic dopolnijo s 5 % fetalnim govejim serumom (FBS), 3,0 g/l glukoze, 2,5 mM L-glutamina in 1,2 g/l NaHCO₃. Gojišča je treba zamenjati 2–3-krat na teden.

Pogoji za rast

Za gojenje celic MG-63 je potreben vlažen inkubator pri temperaturi 37 °C in dovod 5 % CO₂.

Shranjevanje

Te osteoblastom podobne celice se lahko shranjujejo v plinski fazi tekočega dušika ali pri temperaturi pod -150 °C, da se ohrani njihova vitalnost.

Postopek zamrzovanja in gojišče

Za zamrzovanje celic MG-63 se uporabljata gojišča CM-1 ali CM-ACF. Na splošno se priporoča postopek počasnega zamrzovanja, da se prepreči šok celic in ohrani njihova vitalnost.

Postopek odmrzovanja

Zamrznjene celice se inkubirajo 40 do 60 sekund v predhodno ogreti vodni kopeli (37 stopinj Celzija). Celice se ponovno suspendirajo v svežem gojišču in prelijejo v novo kolbo. Po 24 urah inkubacije se gojišče zamenja, da se odstranijo sestavine zamrzovalnega gojišča.  

Raven biološke varnosti

Za ravnanje s kulturami MG-63 in njihovo vzdrževanje so potrebne laboratorijske razmere na stopnji biološke varnosti 1.

Celice MG-63 pred in po doseganju konfluence.

Celična linija MG-63: prednosti in slabosti

MG-63 je široko uporabljena linija osteoblastnih celic. Ima več prednosti in slabosti. V nadaljevanju bomo navedli nekaj glavnih prednosti in slabosti celične linije MG-63.

Prednosti

Prednosti celic MG-63 so:

• Lastnosti, podobne osteoblastom

  Celična linija MG-63 kaže lastnosti, podobne osteoblastom, zaradi česar je primerna za preučevanje procesov in bolezni, povezanih s kostmi. Uporablja se lahko tudi za preučevanje adhezije, proliferacije in vitalnosti celic na titanovih površinah [1].

• Primernost za transfekcijo

  Celice MG-63 se pogosto uporabljajo v študijah transfekcije, kar omogoča raziskovanje genske ekspresije, funkcije in celičnih procesov.

• Visoka raven proizvodnje interferona

  Celice MG-63 so sposobne visoke ravni proizvodnje interferona. Pri indukciji s cikloheksimidom, poliinozinsko-policitidilno kislino in aktinomicinom lahko prinesejo 3,7-krat višji donos interferona na cm² kot diploidni fibroblasti [2].

Pomanjkljivosti

Pomanjkljivosti, povezane z B-celicami MG-63, so:

• Heterogenost

  Celice MG-63 kažejo heterogenost znotraj celične populacije, kar lahko vpliva na ponovljivost.

• Linija tumorskih celic

  MG-63 je rakava celična linija in morda ne odraža v celoti normalnega vedenja in fiziologije celic, kar omejuje njeno uporabo v nekaterih laboratorijskih poskusih.

Naročite celice MG-63 še danes

Uporaba celic MG-63

Celice MG-63 so odlično raziskovalno orodje. Ponujajo številne obetavne možnosti uporabe na raziskovalnem področju. Tukaj je navedenih nekaj glavnih raziskovalnih uporab celic MG-63.

• Proučevanje procesov/bolezni, povezanih s kostmi: Celice MG-63 so celice, podobne osteoblastom (celice, ki tvorijo kosti). Zato se te celice obsežno uporabljajo za proučevanje kostnih bolezni in celičnih procesov, vključno z razvojem, diferenciacijo in mineralizacijo. Poleg tega se celice obsežno uporabljajo za presejanje terapevtskih zdravil za pospeševanje celjenja kosti. V raziskavi so celice MG-63 uporabili za preučevanje terapevtskega potenciala z zelenim postopkom sintetiziranih nanodelcev cinkovega oksida iz rastline Scutellaria baicalensis na proliferacijo, mineralizacijo in diferenciacijo kostnih celic [3].
• Raziskave raka: Celice MG-63 se pogosto uporabljajo v raziskavah raka. V več študijah so te celice osteosarkoma uporabili za razumevanje signalnih poti raka ter za oceno citotoksičnega in terapevtskega potenciala zdravil. V študiji, izvedeni leta 2019, so z uporabo celic MG-63 raziskovali protitumorske lastnosti naravne spojine tomentosina. Rezultati so pokazali, da tomentosin kaže protirakove učinke s sprožitvijo nastajanja reaktivnih kisikovih spojin (ROS) znotraj celic [4].

Raziskovalne publikacije, ki obravnavajo celice MG-63

V nadaljevanju so navedene nekatere raziskovalne publikacije, v katerih je predstavljena MG-63, celična linija, podobna osteoblastom.

miR-192 poveča občutljivost rakavih celic osteosarkoma MG-63 na zdravilo metotreksat

Ta članek je bil objavljen v reviji Pathology – Research and Practice leta 2020. V tej raziskavi so z uporabo celic MG-63 preučevali molekularne mehanizme, vključene v odpornost proti zdravilu v rakavih celicah osteosarkoma (MG-63). Rezultati so pokazali, da bi miRNA-192 lahko bil koristen cilj pri premagovanju odpornosti na metotreksat pri osteosarkomu.

Zeleno sintetizirani nanodelci cinkovega oksida uravnavajo izražanje apoptoze v rakavih celicah kosti MG-63

Ta raziskava je objavljena v reviji »Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology« (2020). Študija je poročala o protirakavem potencialu zeleno sintetiziranih nanodelcev cinkovega oksida (ZnONPs) iz korenine Rehmanniae Radix proti celicam kostnega raka (MG-63).

Osteogenični diferenciacijski in mineralizacijski potencial nanodelcev cinkovega oksida iz rastline Scutellaria baicalensis na človeških celicah MG-63, podobnih osteoblastom

Ta raziskovalni članek je bil objavljen leta 2021 v reviji »Materials Science and Engineering«. Ta študija je na podlagi celične linije MG-63 predlagala lastnosti za celjenje kosti biosintetiziranih nanodelcev cinkovega oksida iz rastline Scutellaria baicalensis.

Kurkumin zavira proliferacijo in invazijo celic MG-63 z inaktivacijo poti p-JAK2/p-STAT3

Ta študija je bila objavljena v reviji »Onco Targets and Therapy« leta 2021. Raziskava je predlagala protitumorske lastnosti kurkumina proti celicam osteosarkoma. Snov je te terapevtske učinke dosegla z inaktivacijo rakave signalne poti p-JAK2/p-STAT3.

Vpliv vitamina D3, obdelanega z bioenergetskim poljem, na proliferacijo, diferenciacijo in zorenje parametrov, povezanih s kostmi, v celični liniji MG-63

Ta raziskava je bila objavljena leta 2018 v reviji »International Journal of Biomedical Engineering and Clinical Science«. Študija je ugotovila, da vitamin D3, obdelan z bioenergetskim poljem, pozitivno vpliva na proliferacijo, zorenje in diferenciacijo kostnih celic ter izboljša parametre zdravja kosti.

Viri za celično linijo MG-63: protokoli, videoposnetki in več

Na voljo je več virov o celični liniji MG-63, ki pojasnjujejo protokole za gojenje celic in transfekcijo.

• Transfekcija celic MG-63: Ta videoposnetek izčrpno pojasnjuje protokol transfekcije za celice MG-63.
• Prenos adhezivnih celic: Ta videoposnetek ponuja navodila za subkultiviranje ali prenos adhezivnih celičnih linij. Pomagal vam bo pri učenju osnovnih protokolov za gojenje celic.

Na naslednji povezavi boste našli protokol za gojenje celic MG-63.

• Gojenje celic MG-63: Ta spletna stran ponuja preprost in podrobni protokol za subkultiviranje ali delitev celične linije MG-63.

Pogosta vprašanja o celicah MG-63

Viri

1. Wandiyanto, J.V., et al., Usoda osteoblastom podobnih celic MG-63 na predhodno okuženih baktericidnih nanostrukturiranih titanovih površinah. Materials (Basel), 2019. 12(10).
2. Billiau, A., et al., Človeški interferon: masovna proizvodnja v novo vzpostavljeni celični liniji MG-63. Antimicrob Agents Chemother, 1977. 12(1): str. 11–5.
3. Tang, Y., et al., Osteogenična diferenciacija in potencial mineralizacije nanodelcev cinkovega oksida iz Scutellaria baicalensis na človeških celicah MG-63, podobnih osteoblastom. Materials Science and Engineering: C, 2021. 119: str. 111656.
4. Lee, C.M., et al., Tomentosin kaže antikarcinogeni učinek na človeške osteosarkomske celice MG-63 prek indukcije intracelularnih reaktivnih kisikovih spojin. International journal of molecular sciences, 2019. 20(6): str. 1508.