Клетъчна линия MG-63: Подробно ръководство за клетките MG-63 в изследванията върху остеосаркома

Клетките MG-63 са фибробластоподобни човешки остеосаркомни клетки, които предлагат широк спектър от приложения в биомедицинските изследвания. Това може да включва изучаване на процеси, свързани с костите, като например костно развитие, диференциация и др. Освен това клетъчната линия MG-63 служи като подходящ in vitro модел за изучаване на жизнеспособността, пролиферацията и адхезията на костните клетки.

Общи характеристики и произход на клетъчната линия MG-63

В тази част от статията ще бъдат разгледани произходът и общите характеристики на клетъчната линия MG-63. Ще научите: Какво представлява клетъчната линия MG-63? Какъв е произходът на клетъчната линия MG-63? Каква е морфологията на клетките MG-63? Какъв е размерът на клетките MG-63?

• MG-63 е тип остеобластна клетъчна линия, произхождаща от костта на 14-годишен мъж (кавказки произход), страдащ от остеосаркома. А. Билио и колегите му депозираха тази клетъчна линия през 1977 г.
• Клетъчната линия MG-63 притежава морфология, подобна на тази на фибробластите.
• Човешките остеосаркомни клетки (MG-63) проявяват хипотриплоидия. Модалният брой хромозоми за тези клетки е 66, което се среща при приблизително 44% от клетъчната популация. По-високи плоидии също са отчетени при почти 2% от клетъчната популация. Освен това, 18–19 маркерни хромозоми са изобилни във всички клетки.

SEM изображение на култура от саркомни клетки.

Информация за култивирането на клетъчната линия MG-63

Важната информация относно изискванията за култивиране на клетъчната линия може да улесни работата ви. В тази част на статията са изброени всички ключови моменти, които са от решаващо значение за култивирането и поддържането на клетките MG-63. Тук ще научите: Какво е времето за удвояване на клетките MG-63? Какви среди за растеж се използват за клетките MG-63? Каква е плътността на засяване на клетките MG-63?

Ключови моменти при култивирането на клетки MG-63

Време за удвояване

Времето за удвояване на популацията на клетките MG-63 варира между 28 и 38 часа, в зависимост от условията на култивиране.

Свойства на растежа

MG-63 е адхезивна клетъчна линия.

Плътност на засяване

За клетките MG-63 се препоръчва плътност на засяване от 1 x 10⁴ клетки/cm². Адхезивните клетки се промиват с 1 x фосфатен буферен разтвор (PBS) без магнезий и калций. След това тези клетки се инкубират с разтварящ разтвор (Accutase), добавя се свежа среда и се центрофугират. Събраният клетъчен пелетен остатък се ресуспендира в свежа среда и се прехвърля в нова колба за отглеждане.

Среда за отглеждане

За култивиране на MG-63 клетки се използват среди DMEM или Ham's F12. Тези среди могат да бъдат обогатени с 5% фетално телешко серум (FBS), 3,0 g/L глюкоза, 2,5 mM L-глутамин и 1,2 g/L NaHCO₃ за оптимален клетъчен растеж. Средата трябва да се сменя 2–3 пъти седмично.

Условия за отглеждане

За култивирането на клетки MG-63 е необходим овлажнен инкубатор при температура 37 °C и подаване на 5% CO2.

Съхранение

Тези остеобластоподобни клетки могат да се съхраняват във фазата на пари на течен азот или при температура под -150 °C, за да се поддържа жизнеспособността на клетките.

Процес на замразяване и среда

За замразяването на клетките MG-63 се използват среди CM-1 или CM-ACF. Обикновено се препоръчва бавен процес на замразяване, за да се предотврати шокът на клетките и да се защити тяхната жизнеспособност.

Процес на размразяване

Замразените клетки се инкубират в продължение на 40 до 60 секунди в предварително затоплена водна баня (37 градуса Целзий). Клетките се ресуспендират в свежа среда за растеж и се прехвърлят в нова колба. След 24 часа инкубация средата се подменя, за да се отстранят компонентите на средата за замразяване.  

Ниво на биологична безопасност

За работа с и поддържане на култури от MG-63 са необходими лабораторни условия, отговарящи на ниво 1 на биологична безопасност.

Клетки MG-63 преди и след достигане на конфлуентност.

Клетъчна линия MG-63: предимства и недостатъци

MG-63 е широко използвана клетъчна линия от остеобласти. Тя има няколко предимства и недостатъци. Тук ще споменем няколко основни плюса и минуса на клетъчната линия MG-63.

Предимства

Предимствата на клетките MG-63 са:

• Характеристики, подобни на тези на остеобластите

  Клетъчната линия MG-63 проявява характеристики, подобни на тези на остеобластите, което я прави подходяща за изучаване на процеси и заболявания, свързани с костите. Тя може да се използва и за изследване на клетъчната адхезия, пролиферация и жизнеспособност върху титанови повърхности [1].

• Подходяща за трансфекция

  Клетките MG-63 се използват широко в изследвания на трансфекцията, което позволява проучване на генната експресия, функциите и клетъчните процеси.

• Високо ниво на продукция на интерферон

  Клетките MG-63 са способни на високо ниво на продукция на интерферон. Те могат да дадат 3,7 пъти по-високи добиви на интерферон на cm² в сравнение с диплоидните фибробласти, когато се индуцират с циклохексимид, полиинозинова киселина-полицитидилова киселина и актиномицин [2].

Недостатъци

Недостатъците, свързани с B-клетките MG-63, са:

• Хетерогенност

  Клетките MG-63 проявяват хетерогенност в рамките на клетъчната популация, което може да повлияе на възпроизводимостта.

• Туморна клетъчна линия

  MG-63 е ракова клетъчна линия и може да не отразява напълно нормалното поведение и физиология на клетките, което ограничава приложението ѝ в определени лабораторни експерименти.

Поръчайте си клетки MG-63 още днес

Приложения на клетките MG-63

Клетките MG-63 са отличен инструмент за научни изследвания. Те предлагат многообещаващи приложения в областта на научните изследвания. Тук са изброени няколко основни приложения на клетките MG-63 в научните изследвания.

• Изследване на процеси/заболявания, свързани с костите: Клетките MG-63 са подобни на остеобласти (костообразуващи клетки). Поради това тези клетки се използват широко за изучаване на костни заболявания и клетъчни процеси, включително развитие, диференциация и минерализация. Освен това клетките се използват широко за скрининг на терапевтични лекарства, които стимулират заздравяването на костите. В едно проучване са използвани клетки MG-63 за изследване на терапевтичния потенциал на наночастици от цинков оксид, синтезирани по екологичен начин от Scutellaria baicalensis, върху пролиферацията, минерализацията и диференциацията на костните клетки [3].
• Изследвания в областта на рака: Клетките MG-63 се използват широко в изследванията на рака. В редица проучвания тези остеосаркомни клетки са използвани за разкриване на сигналните пътища при рака и за оценка на цитотоксичния и терапевтичния потенциал на лекарствените средства. Проучване, проведено през 2019 г., изследва противотуморните свойства на естественото съединение томентозин, като използва клетки MG-63. Резултатите показаха, че томентозин проявява противоракови ефекти чрез задействане на производството на вътреклетъчни реактивни кислородни видове (ROS) [4].

Научни публикации, посветени на клетките MG-63

По-долу са представени някои научни публикации, посветени на MG-63 – клетъчната линия, наподобяваща остеобласти.

miR-192 повишава чувствителността на лекарството метотрексат към раковите клетки от остеосаркома MG-63

Тази статия беше публикувана в списанието „Pathology – Research and Practice“ през 2020 г. В това изследване бяха използвани клетки MG-63 за проучване на молекулярните механизми, свързани с лекарствената резистентност при раковите клетки на остеосаркома (MG-63). Резултатите показаха, че miRNA-192 може да бъде полезна мишена за преодоляване на лекарствената резистентност към метотрексат при остеосаркома.

Наночастиците от цинков оксид, синтезирани по зелен метод, регулират апоптотичната експресия в раковите клетки на костния рак MG-63

Това изследване е публикувано в списанието „Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology“ (2020 г.). Проучването докладва за противораковия потенциал на зелено синтезирани наночастици от цинков оксид (ZnONPs) от Rehmanniae Radix срещу раковите клетки на костния рак (MG-63).

Потенциал за остеогенна диференциация и минерализация на наночастиците от цинков оксид, получени от Scutellaria baicalensis, върху човешки остеобластоподобни клетки MG-63

Тази научна статия е публикувана през 2021 г. в списанието „Materials Science and Engineering“. В това проучване се предлагат свойствата за заздравяване на костите на биосинтезирани наночастици от цинков оксид от растението Scutellaria baicalensis, като се използва клетъчната линия MG-63.

Куркуминът инхибира пролиферацията и инвазията на клетките MG-63 чрез инактивиране на p-JAK2/p-STAT3 пътя

Това проучване беше публикувано в списанието „Onco Targets and Therapy“ през 2021 г. Изследването разкрива противотуморните свойства на съединението куркумин срещу клетки на остеосаркома. Съединението проявява тези терапевтични ефекти чрез инактивиране на раковия сигнализиращ път p-JAK2/p-STAT3.

Влияние на витамин D3, обработен с биополе, върху пролиферацията, диференциацията и съзряването на костните параметри в клетъчната линия MG-63

Това изследване беше публикувано през 2018 г. в списанието „International Journal of Biomedical Engineering and Clinical Science“. Проучването установи, че витамин D3, обработен с биополева енергия, оказва положително влияние върху пролиферацията, съзряването и диференциацията на костните клетки и подобрява показателите за здравето на костите.

Ресурси за клетъчната линия MG-63: протоколи, видеоклипове и др.

Налице са няколко ресурса за клетъчната линия MG-63, които разясняват протоколите за култивиране и трансфекция на клетките.

• Трансфекция на клетки MG-63: Това видео изчерпателно обяснява протокола за трансфекция на клетки MG-63.
• Прехвърляне на адхезивни клетки: Това видео предоставя указания за субкултивиране или прехвърляне на адхезивни клетъчни линии. То ще ви помогне да усвоите основните протоколи за клетъчна култура.

Следният линк ще ви предостави протокола за култивиране на клетки MG-63.

• Култивиране на клетки MG-63: Този уебсайт предоставя лесен и подробен протокол за субкултивиране или разделяне на клетъчната линия MG-63.

Често задавани въпроси относно клетките MG-63

Източници

1. Wandiyanto, J.V. и др., „Съдбата на остеобластоподобните клетки MG-63 върху предварително инфектирани бактерицидни наноструктурирани титанови повърхности“. Materials (Basel), 2019. 12(10).
2. Billiau, A., и др., Човешки интерферон: масово производство в новосъздадена клетъчна линия MG-63. Antimicrob Agents Chemother, 1977. 12(1): стр. 11-5.
3. Тан, Й., и др., Потенциал за остеогенна диференциация и минерализация на наночастици от цинков оксид, извлечени от Scutellaria baicalensis, върху човешки остеобластоподобни клетки MG-63. Materials Science and Engineering: C, 2021. 119: стр. 111656.
4. Ли, С.М. и др., Томентозин проявява антиканцерогенен ефект върху човешките остеосаркомни клетки MG-63 чрез индуциране на вътреклетъчни реактивни кислородни видове. International journal of molecular sciences, 2019. 20(6): стр. 1508.