Gå til innholdet
CX-1-celler
Vev
Colon
Sykdom
Adenokarsinom
Synonymer
HT-29/Cx-1, Cx1

Dokumenter

CX-1-celler

Cell line · Produktnummer 300159

CX-1-cellelinjen stammer fra et adenokarsinom i tykktarmen hos mennesker og kjennetegnes ved sin evne til å danne metastaser, særlig i leveren når den inokuleres i...

€430.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

CX-1-cellelinjen er avledet fra et humant tykktarmsadenokarsinom, som kjennetegnes av sitt metastatiske potensial, særlig til leveren når det inokuleres i egnede dyremodeller, som f.eks. athymiske nakenmus. CX-1-celler ble generert ved å introdusere HT-29-celler i athymiske mus. Disse cellene fungerer som et pålitelig modellsystem for å studere adenokarsinom i tykktarmen.

CX-1-cellelinjen uttrykker forhøyede nivåer av karbohydratantigenene sialosyl Lewis a (sialosyl Le^a) og karsinoembryonalt antigen (CEA), som er assosiert med tumorprogresjon, metastase og adhesjon til vaskulært endotel i ulike kreftformer, inkludert kolorektalt karsinom.

Den humane tykktarmskreftcellelinjen CX-1 er en viktig ressurs for å forstå de molekylære mekanismene bak metastasering av tykktarmskreft.

Vev
Colon
Sykdom
Adenokarsinom
Synonymer
  • HT-29/Cx-1
  • Cx1

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorinduserende
Ja, i nakne mus
Fordoblingstid
24 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
CX-1 (Cytion-katalognummer 300159)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2011

05Uttrykk og mottakelighet

Proteinekspresjon
P53-positiv, CEA-positiv
Revers transkriptase
Negativ
Produkter
Cytokeratin 8, 18, 19

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
1 x 104 celler/cm2 vil gi et sammenvokst lag i løpet av omtrent 4 til 6 dager.
Væskefornyelse
1 til 2 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 24 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
44 år
Etnisitet
Kaukasisk