ETK-1

ETK-1 er en human cellelinje fra intrahepatisk kolangiokarsinom (IHCCA), opprinnelig etablert fra ascitesvæske fra en voksen pasient med sarkomatoid kolangiokarsinom. Svulsten som ETK-1 stammer fra, viste både tubulært adenokarsinom og sarkomatoide komponenter, og cellelinjen gjenspeiler den sarkomatoide fenotypen. ETK-1-celler vokser ved vedheft som et ensartet epitelmonolag med et brosteinslignende utseende, hovedsakelig sammensatt av små polygonale celler med runde til ovale kjerner og fremtredende nukleoler. Celler i tidlige passasjer viste en populasjonsdoblingstid på omtrent 70 timer og en hyperdiploid karyotype med et modalt kromosomtall på midten av 70-tallet, noe som stemmer overens med kromosomisk ustabilitet som er typisk for aggressive ondartede svulster i galleveiene.

Immunofenotypisk uttrykker ETK-1-celler markører for galleveiepitel, inkludert γ-glutamyltranspeptidase (GGT), cytokeratin 18 (CK18) og cytokeratin 19 (CK19), noe som bekrefter deres kolangiokyttiske opprinnelse. De er negative for hepatocyttassosierte markører som alfa-fetoprotein (AFP) og albumin under basale forhold. ETK-1-celler uttrykker vimentin, noe som gjenspeiler deres sarkomatoide egenskaper og delvis mesenkymale fenotype, mens de mangler uttrykk for karcinoembryonalt antigen (CEA) og karbohydratantigen 19-9 (CA19-9). Denne markørprofilen samsvarer med den sarkomatoide komponenten som er observert i primærtumoren og fremhever trekk som er forenlige med egenskaper som ligner epitel-mesenkym-overgang.

ETK-1 har også blitt brukt som modell for å studere cellulær plastisitet og stamlinjedifferensiering ved kolangiokarsinom. Behandling med DNA-metyltransferasehemmeren 5-azacytidin induserte morfologiske og fenotypiske endringer, noe som resulterte i en avledet cellelinje med hepatocyttlignende trekk, inkludert uttrykk for AFP, albumin, integrin α1 og trombopoietin, sammen med tap av visse gallemarkører. I xenotransplantasjonsmodeller danner ubehandlede ETK-1-celler svulster som samsvarer med tubulært adenokarsinom med en duktal fenotype. Disse funnene viser at ETK-1 beholder differensieringsplastisitet og fungerer som et verdifullt in vitro-system for å undersøke transdifferensiering fra galdeepitel til hepatocytter, epigenetisk regulering og tumorheterogenitet ved intrahepatisk kolangiokarsinom.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring