Przejdź do treści
MM.1S
Chusteczka
Krew obwodowa
Choroba
Szpiczak mnogi
Synonimy
MM1.S, MM1-S, MM-1S, MM1S

Dokumenty

MM.1S

Cell line · Numer produktu 305304

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
Wykonane na zamówienie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa MM.1S jest częścią serii MM.1, która została opracowana od jednego pacjenta ze szpiczakiem mnogim (MM) w celu zbadania różnych etapów progresji choroby i odpowiedzi na terapię glukokortykoidami (GC). MM.1S jest szczególnie wrażliwy na glukokortykoidy, takie jak deksametazon, i służy jako model do badania mechanizmów apoptozy indukowanej GC w komórkach szpiczaka mnogiego. Ta wrażliwość sprawia, że MM.1S jest kluczowym narzędziem do badania wczesnych faz leczenia MM i szlaków komórkowych prowadzących do odpowiedzi na GC.

Komórki MM.1S, podobnie jak inne linie MM.1, wykazują typową morfologię szpiczaka, w tym okrągłe komórki z ekscentrycznie rozmieszczonymi jądrami, z których wiele jest dwujądrowych lub wielojądrowych. Komórki te wykazują ekspresję charakterystycznych markerów komórek plazmatycznych, takich jak CD38 i PCA-1, przy jednoczesnym braku typowych markerów komórek B, takich jak CD19 i CD20, co odzwierciedla ich ostatecznie zróżnicowany status jako komórek plazmatycznych. Wykazują również wysoki poziom ekspresji łańcucha lekkiego immunoglobuliny lambda (λ), co jest zgodne z ich pochodzeniem. Ta linia komórkowa ma kluczowe znaczenie dla badania szlaków działania leków, oporności i apoptozy w MM, szczególnie w kontekście leczenia GC.

Jedną z kluczowych cech MM.1S jest zależność od funkcjonalnych receptorów glukokortykoidowych (GR) w celu uzyskania odpowiedzi na leki. W MM.1S wysoki poziom GR typu dzikiego umożliwia deksametazonowi skuteczne indukowanie apoptozy, zapewniając cenny system do badania zdarzeń molekularnych leżących u podstaw tego procesu. Linia ta jest często porównywana z jej opornym odpowiednikiem, MM.1R, w celu zbadania mechanizmów oporności na GC, co jest kluczową kwestią w leczeniu MM. Łącznie, linia komórkowa MM.1S oferuje wgląd w wrażliwość na leki, postęp choroby i potencjalne strategie terapeutyczne dla szpiczaka mnogiego.

Chusteczka
Krew obwodowa
Choroba
Szpiczak mnogi
Synonimy
  • MM1.S
  • MM1-S
  • MM-1S
  • MM1S

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Adhezja i zawiesina
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Limfoblast
Typ komórki
Komórka B

04Identyfikatory

Źródło
MM.1S (numer katalogowy Cytion 305304)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_8792

05Ekspresja i podatność

Profil mutacji
Mutacja: KRAS, p.Gly12Ala (c.35G>C), heterozygotyczny; Mutacja: TRAF3, p.Val536_Asn545delValPheValAlaGlnThrValLeuGluAsninsAsp (c.1604-1630delTCTTTGTGCCCAAACTGTTCTAGAAA), homozygotyczna
Produkty
IgA lambda

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS inaktywowanym termicznie
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Zebrać komórki zawiesiny do probówki o pojemności 15 ml i delikatnie przemyć przylegające komórki PBS pozbawionym wapnia i magnezu (użyć 3-5 ml dla kolb T25 i 5-10 ml dla kolb T75). Nałożyć Accutase (1-2 ml na kolby T25, 2,5 ml na kolby T75), zapewniając pełne pokrycie warstwy komórek. Pozostawić komórki do inkubacji w temperaturze pokojowej przez 10 minut. Po inkubacji połączyć i odwirować zarówno zawiesinę, jak i przylegające komórki. Po odwirowaniu ostrożnie zawiesić osad komórek i przenieść zawiesinę komórek do nowych kolb zawierających świeżą pożywkę.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
45 lat
Pochodzenie etniczne
Afroamerykanin

10Szczegóły produktu

Tabela składu