MM.1S

A linhagem celular MM.1S faz parte da série MM.1, que foi desenvolvida a partir de um único paciente com mieloma múltiplo (MM) para estudar os diversos estágios da progressão da doença e a resposta à terapia com glicocorticoides (GC). A MM.1S é especificamente sensível a glicocorticoides, como a dexametasona, e serve como modelo para investigar os mecanismos da apoptose induzida por GC em células de mieloma múltiplo. Essa sensibilidade torna a MM.1S uma ferramenta crucial para o estudo das fases iniciais do tratamento do MM e das vias celulares que levam à resposta aos GC.

As células MM.1S, assim como outras linhagens MM.1, apresentam morfologia típica do mieloma, incluindo células redondas com núcleos localizados excentricamente, muitas das quais são binucleadas ou multinucleadas. Essas células expressam marcadores característicos das células plasmáticas, como CD38 e PCA-1, ao mesmo tempo em que não apresentam marcadores típicos das células B, como CD19 e CD20, refletindo seu estado de diferenciação terminal como células plasmáticas. Elas também apresentam altos níveis de expressão da cadeia leve da imunoglobulina lambda (λ), o que é consistente com sua origem. Essa linhagem celular tem sido fundamental para a exploração das vias de ação dos medicamentos, da resistência e da apoptose no MM, especialmente no contexto do tratamento com GC.

Uma das principais características da MM.1S é sua dependência de receptores de glicocorticoides (GR) funcionais para a resposta aos medicamentos. Na MM.1S, altos níveis de GR do tipo selvagem permitem que a dexametasona induza a apoptose de forma eficaz, proporcionando um sistema valioso para o estudo dos eventos moleculares subjacentes a esse processo. Essa linhagem é frequentemente comparada à sua contraparte resistente, a MM.1R, para investigar os mecanismos de resistência aos GC, uma questão crítica no tratamento do MM. Em conjunto, a linhagem celular MM.1S oferece insights sobre a sensibilidade aos medicamentos, a progressão da doença e possíveis estratégias terapêuticas para o mieloma múltiplo.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.