Pāriet uz saturu
MM.1S
Audums
Perifērās asinis
Slimība
Multiplā mieloma
Sinonīmi
MM1.S, MM1-S, MM-1S, MM1S

Dokumenti

MM.1S

Cell line · Preces numurs 305304

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Pēc pasūtījuma
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

MM.1S šūnu līnija ir daļa no MM.1 sērijas, kas tika izveidota no viena pacienta ar multiplo mielomu (MM), lai pētītu dažādus slimības progresēšanas posmus un atbildes reakciju uz glikokortikoīdu (GC) terapiju. MM.1S ir īpaši jutīga pret glikokortikoīdiem, piemēram, deksametazonu, un kalpo kā modelis, lai pētītu GK izraisītas apoptozes mehānismus multiplās mielomas šūnās. Šī jutība padara MM.1S par svarīgu instrumentu, lai pētītu agrīnās MM ārstēšanas fāzes un šūnu ceļus, kas izraisa reakciju uz GC.

MM.1S šūnām, tāpat kā citām MM.1 līnijām, ir tipiska mielomas morfoloģija, tostarp apaļas šūnas ar ekscentriski izvietotiem kodoliem, no kuriem daudzi ir divkodolu vai daudzkodolu. Šīs šūnas ekspresē plazmatiskajām šūnām raksturīgos marķierus, piemēram, CD38 un PCA-1, bet tām nav tipisku B šūnu marķieru, piemēram, CD19 un CD20, kas atspoguļo to kā plazmatisko šūnu terminālo diferenciāciju. Tām ir arī augsts imūnglobulīna lambda (λ) vieglās ķēdes ekspresijas līmenis, kas atbilst to izcelsmei. Šī šūnu līnija ir bijusi ļoti svarīga, lai izpētītu zāļu iedarbības, rezistences un apoptozes ceļus MM, jo īpaši saistībā ar ārstēšanu ar GC.

Viena no galvenajām MM.1S īpašībām ir tās atkarība no funkcionāliem glikokortikoīdu receptoriem (GR), kas nodrošina reakciju uz zālēm. MM.1S ir augsts savvaļas tipa GR līmenis, kas ļauj deksametazonam efektīvi izraisīt apoptozi, nodrošinot vērtīgu sistēmu šī procesa pamatā esošo molekulāro notikumu izpētei. Šo līniju bieži salīdzina ar tās rezistento kolēģi MM.1R, lai pētītu rezistences pret GR mehānismus, kas ir būtisks jautājums MM ārstēšanā. Kopumā MM.1S šūnu līnija sniedz ieskatu par jutību pret zālēm, slimības progresēšanu un iespējamām multiplās mielomas terapeitiskajām stratēģijām.

Audums
Perifērās asinis
Slimība
Multiplā mieloma
Sinonīmi
  • MM1.S
  • MM1-S
  • MM-1S
  • MM1S

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Adhēzija un suspensija
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Limfoblasts
Šūnu tips
B šūna

04Identifikatori

Atsauce
MM.1S (Cytion kataloga numurs 305304)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_8792

05Pazīmes un uzņēmība

Mutāciju profils
Mutācija: Gly12Ala (c.35G>C), heterozigotiska; Mutācija: KRAS, p.Gly12Ala (c.35G>C), heterozigotiska; Mutācija: TRAF3, p.Val536_Asn545delValPheValAlaGlnThrValLeuGluAsninsAsp (c.1604-1630delTCTTTGTGGGCCCAAACTGTTCTAGAAA), homozigotiska
Produkti
IgA lambda

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% termiski inaktivētu FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Savāc suspensijas šūnas 15 ml mēģenē un saudzīgi izmazgā pielipušās šūnas ar PBS bez kalcija un magnija (T25 kolbām izmanto 3-5 ml, bet T75 kolbām - 5-10 ml). Uzklājiet Accutase (1-2 ml T25 kolbām, 2,5 ml T75 kolbām), nodrošinot pilnīgu šūnu slāņa pārklājumu. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 10 minūtes. Pēc inkubācijas apvienot un centrifugēt gan suspensiju, gan pielipušās šūnas. Pēc centrifugēšanas uzmanīgi resuspendēt šūnu granulas un pārvietot šūnu suspensiju jaunās kolbās ar svaigu barotni.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
45 gadi
Etniskā piederība
Afroamerikānis

10Informācija par produktu

Sastāva tabula