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MM.1S
Tecido
Sangue periférico
Doença
Mieloma múltiplo
Sinónimos
MM1.S, MM1-S, MM-1S, MM1S

Documentos

MM.1S

Cell line · Número do produto 305304

€430.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

Feito por encomenda
Lote
Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular MM.1S faz parte da série MM.1, que foi desenvolvida a partir de um único doente com mieloma múltiplo (MM) para estudar várias fases da progressão da doença e a resposta à terapêutica com glucocorticóides (GC). A MM.1S é especificamente sensível a glucocorticóides, como a dexametasona, e serve de modelo para investigar os mecanismos de apoptose induzida por GC em células de mieloma múltiplo. Esta sensibilidade faz da MM.1S uma ferramenta crucial para estudar as fases iniciais do tratamento do MM e as vias celulares que conduzem à reatividade aos GC.

As células MM.1S, tal como outras linhas MM.1, apresentam uma morfologia típica de mieloma, incluindo células redondas com núcleos localizados excentricamente, muitos dos quais são binucleados ou multinucleados. Estas células expressam marcadores caraterísticos dos plasmócitos, como o CD38 e o PCA-1, mas não possuem marcadores típicos das células B, como o CD19 e o CD20, o que reflecte o seu estatuto de células plasmáticas terminalmente diferenciadas. Apresentam também níveis elevados de expressão da cadeia leve da imunoglobulina lambda (λ), o que é consistente com a sua origem. Esta linha celular tem sido vital para explorar as vias de ação dos medicamentos, a resistência e a apoptose no MM, especialmente no contexto do tratamento com GC.

Uma das principais caraterísticas da MM.1S é a sua dependência de receptores de glucocorticóides (GR) funcionais para a reação aos medicamentos. No MM.1S, níveis elevados de GR de tipo selvagem permitem que a dexametasona induza a apoptose de forma eficaz, constituindo um sistema valioso para o estudo dos acontecimentos moleculares subjacentes a este processo. Esta linha é frequentemente comparada com a sua homóloga resistente, MM.1R, para investigar os mecanismos de resistência aos GC, uma questão crítica no tratamento do MM. No seu conjunto, a linha celular MM.1S oferece conhecimentos sobre a sensibilidade aos medicamentos, a progressão da doença e potenciais estratégias terapêuticas para o mieloma múltiplo.

Tecido
Sangue periférico
Doença
Mieloma múltiplo
Sinónimos
  • MM1.S
  • MM1-S
  • MM-1S
  • MM1S

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Adesão e suspensão
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Linfoblasto
Tipo de célula
Célula B

04Identificadores

Referência
MM.1S (número de catálogo Cytion 305304)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_8792

05Expressão e suscetibilidade

Perfil mutacional
Mutação: KRAS, p.Gly12Ala (c.35G>C), heterozigótico; Mutação: TRAF3, p.Val536_Asn545delValPheValAlaGlnThrValLeuGluAsninsAsp (c.1604-1630delTCTTTGTGTGCCCAAACTGTTCTAGAAA), homozigótica
Produtos
IgA lambda

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS inactivado pelo calor
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Reunir as células em suspensão num tubo de 15 ml e lavar suavemente as células aderentes com PBS sem cálcio e magnésio (utilizar 3-5 ml para os frascos T25 e 5-10 ml para os frascos T75). Aplicar Accutase (1-2 ml para os frascos T25, 2,5 ml para os frascos T75), assegurando a cobertura total da camada celular. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 10 minutos. Após a incubação, combinar e centrifugar tanto a suspensão como as células aderentes. Após a centrifugação, ressuspender cuidadosamente o pellet de células e transferir a suspensão de células para novos frascos com meio fresco.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
45 anos
Etnia
Afro-americano

10Detalhes do produto

Tabela de composição