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Células Capan-2
Tecido
Pâncreas
Doença
Adenocarcinoma
Sinónimos
CaPan-2, CAPAN-2, Capan 2, CAPAN 2, Capan2, CAPAN2

Documentos

Células Capan-2

Cell line · Número do produto 300144

A linha celular Capan-2 é uma linha celular de adenocarcinoma pancreático humano, isolada pela primeira vez a partir do tecido tumoral pancreático de um homem caucasiano de 56 anos. É...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular Capan-2 é uma linha celular de adenocarcinoma pancreático humano isolada pela primeira vez a partir do tecido tumoral pancreático de um homem caucasiano de 56 anos. Foi derivada de um local metastático no fígado, indicando a sua origem num tumor secundário, o que a torna particularmente valiosa para a investigação de processos metastáticos e da biologia do cancro pancreático. As células apresentam uma morfologia epitelial e têm sido amplamente utilizadas para estudar o cancro pancreático, a resistência aos medicamentos e a biologia tumoral.

Sabe-se que as células Capan-2 exprimem uma forma mutante do homólogo do oncogene viral do sarcoma de rato de Kirsten (KRAS), uma mutação comum no cancro do pâncreas, o que as torna um modelo robusto para o estudo da tumorigénese provocada pelo KRAS. Além disso, caracterizam-se pela expressão de mutações no gene supressor de tumores p53 e observou-se que apresentam instabilidades cromossómicas, que são caraterísticas críticas relevantes para a progressão do cancro e a resposta ao tratamento. Esta linha celular tem sido utilizada em numerosos estudos, incluindo os que avaliam a eficácia quimioterapêutica, exploram as vias moleculares da progressão do cancro e desenvolvem estratégias de terapia orientada.

Tecido
Pâncreas
Doença
Adenocarcinoma
Sinónimos
  • CaPan-2
  • CAPAN-2
  • Capan 2
  • CAPAN 2
  • Capan2
  • CAPAN2

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Poligonal
Tumorigénico
Sim, em ratinhos nus. Forma um adenocarcinoma bem diferenciado consistente com o carcinoma pancreático
Estado de ploidia
Aneuploide
Tempo de duplicação
45 a 60 horas

04Identificadores

Referência
Capan-2 (número de catálogo Cytion 300144)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0026

05Expressão e suscetibilidade

Expressão proteica
P53 negativo
Expressão do antígeno
Tipo de sangue B, Rh+
Isoenzimas
Me-2, 2, PGM3, 2, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, G6PD, B, GLO-1, 2, Produto de frequência fenotípica: 0.0004
Perfil mutacional
As células Capan-2 são portadoras de uma mutação Kras heterozigótica no códão 12: GGT>GTT
Produtos
Mucina (apomucina, MUC-1, MUC-2)

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
McCoys 5a, com: 3,0 g/L de glucose, com: glutamina estável, com: 2,0 mM de piruvato de sódio, com: 2,2 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820200a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1 x 104 células/cm² resultará numa monocamada confluente em 7 dias.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento
Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 5 x 104 células/cm² e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 48 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
56 anos
Etnia
Caucasiano