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HCC4006
Tecido
Metastático
Doença
Adenocarcinoma do pulmão
Local da metástase
Derrame pleural
Sinónimos
HCC-4006, Hamon Cancer Center 4006

Documentos

HCC4006

Cell line · Número do produto 305785

HCC4006 is a human non-small cell lung cancer (NSCLC) cell line derived from a lung adenocarcinoma. It is characterized by an activating exon 19 deletion ...

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1

01Informações gerais

Descrição

A HCC4006 é uma linha celular humana de cancro do pulmão de células não pequenas (NSCLC) derivada de um adenocarcinoma do pulmão. Caracteriza-se por uma supressão do exão 19 ativador no gene EGFR, o que a torna particularmente sensível aos inibidores da tirosina quinase (TKI) do EGFR, como o erlotinib e o gefitinib. Esta caraterística fez do HCC4006 um modelo amplamente utilizado para estudar o CPNPC com mutação do EGFR e os mecanismos de resistência a terapias direcionadas para o EGFR. Na Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), o HCC4006 foi exaustivamente caracterizado a nível genómico, transcriptómico e epigenético, confirmando a sua elevada sensibilidade à inibição do EGFR e realçando a sua utilização como modelo de referência farmacogenómico.

Estudos genómicos de alta resolução revelaram que o HCC4006 apresenta um cariótipo relativamente simples em comparação com outros modelos de NSCLC, o que pode facilitar uma interpretação mais clara das respostas aos medicamentos e das alterações genómicas. Não apresenta mutações de resistência comuns, como a T790M no gene EGFR, o que o torna adequado para modelar as respostas iniciais ao tratamento. No entanto, a resistência pode ser induzida in vitro, permitindo aos investigadores estudar os mecanismos de resistência adquirida. Por exemplo, a resistência aos TKI do EGFR no HCC4006 foi associada à transição epitelial-mesenquimal (EMT) e à ativação de vias de sinalização alternativas, como a sobreexpressão da quinase AXL.

O HCC4006 foi também avaliado em comparações transcriptómicas em grande escala de linhas celulares e tumores primários. É uma das linhas celulares de adenocarcinoma do pulmão que demonstra uma correlação moderada com os perfis de expressão de genes de tumores primários, embora o grau de correlação possa variar consoante a pureza das amostras de tumores utilizadas para comparação. Estas análises sublinham a relevância da linhagem HCC4006 na modelação de determinados aspectos moleculares do adenocarcinoma do pulmão, em particular os associados à oncogénese impulsionada pelo EGFR, ao mesmo tempo que salientam as suas limitações na recapitulação completa da heterogeneidade dos tumores primários.

Tecido
Metastático
Doença
Adenocarcinoma do pulmão
Local da metástase
Derrame pleural
Sinónimos
  • HCC-4006
  • Hamon Cancer Center 4006

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial
Tipo de célula
Célula epitelial
Tempo de duplicação
46 horas

04Identificadores

Referência
HCC4006 (número de catálogo Cytion 305785)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1269

05Expressão e suscetibilidade

Perfil mutacional
Mutação: EGFR, Simples, p.Leu747_Glu749del (c.2239_2247delTAAGAGAA), Heterozigótico (ATCC=CRL-2871, TP53, Simples, p.Tyr205His (c.613T>C), Homozigótico (DepMap=ACH-000066).

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
>50 anos
Etnia
Caucasiano