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HuCC-T1
Tecido
Fígado
Doença
Colangiocarcinoma intra-hepático
Local da metástase
Ascite
Sinónimos
HuCCT-1, HUCCT-1, HUCC-T1, HUCCT1, HuCCT1

Documentos

HuCC-T1

Cell line · Número do produto 300469

HuCC-T1 is a human cholangiocarcinoma cell line established from an intrahepatic bile duct carcinoma. Cholangiocarcinoma is a highly aggressive malignancy...

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01Informações gerais

Descrição

HuCC-T1 é uma linha celular de colangiocarcinoma humano estabelecida a partir de um carcinoma intra-hepático do ducto biliar. O colangiocarcinoma é uma neoplasia maligna altamente agressiva com opções de tratamento limitadas e um mau prognóstico. As células HuCC-T1 têm sido amplamente utilizadas na investigação para estudar a fisiopatologia do colangiocarcinoma e para explorar potenciais abordagens terapêuticas. A linha celular é particularmente valiosa para estudar os efeitos de vários agentes quimioterapêuticos, incluindo as estatinas, que demonstraram potencial para suprimir a proliferação de células de colangiocarcinoma.

Em estudos com a HuCC-T1, observou-se que as estatinas, como a pitavastatina e a atorvastatina, inibiam significativamente a proliferação celular, particularmente quando combinadas com agentes quimioterapêuticos convencionais como a gemcitabina, a cisplatina e o 5-fluorouracil (5-FU). A combinação destes fármacos resultou numa maior supressão do crescimento celular, indicando potenciais efeitos sinérgicos. O mecanismo de ação envolve a indução de apoptose através da supressão da via de sinalização MAPK/ERK, como evidenciado pelo aumento dos níveis de caspase-3 clivada e níveis reduzidos de ERK fosforilada (p-ERK). Estes resultados sugerem que as estatinas podem servir como uma terapia adjuvante promissora no tratamento do colangiocarcinoma, melhorando potencialmente os resultados quando utilizadas juntamente com os medicamentos anticancerígenos existentes.

Além disso, a linha celular HuCC-T1 foi caracterizada para vários marcadores moleculares, incluindo o estado do gene p53, que desempenha um papel crítico na regulação do ciclo celular e na apoptose. O estado exato da mutação do p53 na HuCC-T1 poderia fornecer informações sobre a resposta da linha celular a agentes que danificam o ADN e o seu potencial tumorigénico global. Tendo em conta as suas caraterísticas moleculares, a HuCC-T1 continua a ser uma ferramenta fundamental na investigação do colangiocarcinoma, oferecendo conhecimentos sobre os fundamentos moleculares da doença e ajudando no desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas.

Tecido
Fígado
Doença
Colangiocarcinoma intra-hepático
Local da metástase
Ascite
Aplicações
Estudos do mecanismo de secreção de marcadores tumorais e crescimento de células tumorais no carcinoma colangiocelular humano
Sinónimos
  • HuCCT-1
  • HUCCT-1
  • HUCC-T1
  • HUCCT1
  • HuCCT1

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial
Tumorigénico
Sim, em ratinhos nus.

04Identificadores

Referência
HuCC-T1 (número de catálogo Cytion 300469)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0324

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Deitar fora o meio antigo e lavar as células com PBS. Adicionar uma solução recém-preparada de tripsina a 0,025%/0,02% de EDTA aquecida a 37 graus Celsius e aguardar até que as células se desprendam, o que normalmente demora cerca de 5 minutos. Neutralizar a tripsina adicionando meio fresco e, em seguida, transferir a mistura de células para um tubo e centrifugar. Após a centrifugação, remover o sobrenadante, ressuspender o pellet de células em meio de cultura fresco e transferir a suspensão para novos frascos. Incorporar G418 no meio de cultura para obter uma concentração final de 0,5 mg/ml
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
56 anos
Etnia
Japonês