
- Vävnad
- Fetal njure
- Sjukdom
- Transformerad/odödliggjord; icke-tumörbildande (HEK293-bakgrund)
Dokument
HEK293-VEGF-TM
Cell line · Produktnummer 305991
Ansvarsfriskrivning: De priser som anges för cellinjer gäller uteslutande för akademiska kunder och kunder inom ideella organisationer. För kommersiella aktörer gäller pr...
Anpassning / Rekommendationer
- HEK293-VEGF-TMCell line€1,600.00
01Allmän information
- Beskrivning
Ansvarsfriskrivning: De priser som anges för cellinjer gäller endast för akademiska kunder och ideella organisationer. För kommersiella aktörer är priset cirka 6 250 euro.
Om du representerar en kommersiell aktör eller är osäker på vilken kategori som gäller, vänligen kontakta oss.
HEK293-VEGF-TM-celler är humana embryonala njurceller 293 (HEK293) som har modifierats för att stabilt uttrycka en membranbunden form av vaskulär endotelial tillväxtfaktor (VEGF), vanligtvis utformad för att presentera VEGF på cellytan genom fusion med en transmembrandomän. Till skillnad från lösliga VEGF-isoformer som utsöndras i den extracellulära miljön möjliggör VEGF-TM-konstruktioner lokaliserad och ihållande presentation av VEGF-ligander på plasmamembranet, vilket underlättar kontrollerad undersökning av VEGF-receptorinteraktioner och cell-cell-signaleringsmekanismer. Dessa modifierade modeller är användbara för att studera angiogena signalvägar som främst medieras genom VEGFR1 (FLT1) och VEGFR2 (KDR), vilka reglerar endotelial proliferation, migration, vaskulär permeabilitet och neovaskularisering.
HEK293-VEGF-TM-celler används i stor utsträckning inom angiogenesforskning och terapeutisk utveckling för karakterisering av VEGF-riktade antikroppar, receptorfällor, antiangiogena biologiska läkemedel och konstruerade immuncellsterapier. Den membranankrade VEGF-presentationen möjliggör kvantitativ bedömning av receptorbindning, ligandtillgänglighet, antikroppsblockering, receptorklusterbildning och cellkontaktberoende signaleringshändelser. Dessa celler är särskilt värdefulla i flödescytometribaserade bindningsanalyser, samodlingssystem, reporteranalyser och plattformar för högkapacitetsscreening som utvärderar hämning av VEGF/VEGFR-signalvägen. Dessutom kan HEK293-VEGF-TM-modeller stödja studier som undersöker synapsbildning och måligenkänning av VEGF-riktade CAR-T-celler eller bispecifika antikroppsplattformar.
- Vävnad
- Fetal njure
- Sjukdom
- Transformerad/odödliggjord; icke-tumörbildande (HEK293-bakgrund)
- Ansökningar
- Forskning om transmembran-VEGF (VEGF-TM); utveckling av anti-VEGF-antikroppar; studier av tumörangiogenes; ADCC/CDC-analyser; flödescytometri; forskning inom onkologi och oftalmologi
02Klassificering
- Organism
- Människa
- Kön
- Kvinna
- Tillväxtegenskaper
- Följsam
- GMO-status
- GMO-S1
- Detaljer om GMO-status
- GMO-S1: This HEK293 cell line contains a transmembrane VEGF (VEGF-TM) expression construct for cell-surface VEGF studies and anti-angiogenic therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosäkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Epitelliknande
- Celltyp
- Epiteliala celler
- Fördubblingstid
- ca 24–36 timmar
04Identifierare
- Källa
- HEK293-VEGF-TM (Cytion-artikelnummer 305991)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_6G30
05Uttryck och mottaglighet
- Receptorer som uttrycks
- VEGF-TM
06Hantering och odling
- Odlingsmedium
- RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
- Inkubationsatmosfär
37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.
- Kosttillskott
- Komplettera med 10% FBS, 1 mM natriumpyruvat, 10 mM HEPES, 1% NEAA. Tillsätt Geneticin (G418-Sulfat) för att uppnå en slutlig koncentration på 1 mg/ml.
- Dissociationsmedel
- Trypsin-EDTA
- Vidareodling
- För rutinmässig adherent cellkultur: Aspirera det gamla odlingsmediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS för att avlägsna eventuellt kvarvarande medium. Efter aspirering av PBS, tillsätt lämplig volym Trypsin/EDTA-lösning baserat på odlingskärlets storlek (t.ex. 1 ml för en T25-kolv, 3 ml för en T75-kolv) och inkubera vid rumstemperatur eller 37°C tills cellerna lossnar (5-10 minuter). Övervaka avskiljningen under mikroskop och knacka försiktigt på kärlet om det behövs för att frigöra cellerna. När cellerna har lossnat, tillsätt komplett medium för att inaktivera trypsin/EDTA, resuspendera cellerna försiktigt och överför en alikvot av cellsuspensionen till ett nytt odlingskärl med färskt medium. Placera kärlet i en inkubator inställd på 37°C med 5%CO2 och byt medium var 2-3:e dag.
- Uppdelningsförhållande
- 1 till 5
- Såtäthet
- 2 till 4 x 104 celler/cm2
- Vätskeförnyelse
- 2 till 3 gånger per vecka
- Återhämtning efter upptining
Efter upptining, dela upp cellerna i förhållandet 1:2 till 1:3 i T25-kolvar och låt cellerna återhämta sig från frysningsprocessen och fästa i minst 24 timmar.
För bästa vidhäftning och viabilitet efter upptining av cellerna rekommenderar vi att kollagenbelagda kolvar eller plattor används för den första sådden efter kryoåterhämtning. Kollagenbeläggning krävs inte för efterföljande rutinmässig odling av cellerna.
- Upptining och odling
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontroll och kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.
För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.
- Frysmedel
- Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
- Förvaringsförhållanden
För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.
- Leveransvillkor
Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.
08Donator
- Donatorns ålder
- Foster
09Juridiska frågor och säkerhet
- Säkerhetsföreskrifter
- När man planerar att förvara en kryovial i flytande kväve för framtida upptining är det obligatoriskt att följa strikta säkerhetsåtgärder. Lämpliga skyddshandskar och skyddskläder är nödvändiga, och ansiktsmask eller skyddsglasögon måste användas vid överföring av frysta prover till eller från tanken med flytande kväve. Detta för att minska risken för skador på grund av eventuella explosioner i frysbehållaren vid borttagning, vilket kan leda till att vassa fragment projiceras.
- Garanti
På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet
För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring
- Avtal med tredje part gäller
- Ja






.jpg)
