HEK293-VEGF-TM

Aviso legal: Os preços exibidos para as linhagens celulares destinam-se exclusivamente a clientes acadêmicos ou sem fins lucrativos. Para entidades comerciais, o preço é de aproximadamente €6.250.
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As células HEK293-VEGF-TM são células renais embrionárias humanas 293 (HEK293) modificadas geneticamente para expressar de forma estável uma forma ligada à membrana do fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), comumente projetadas para apresentar o VEGF na superfície celular por meio da fusão com um domínio transmembranar. Ao contrário das isoformas solúveis do VEGF, que são secretadas para o ambiente extracelular, as construções VEGF-TM permitem a apresentação localizada e sustentada de ligantes do VEGF na membrana plasmática, facilitando a investigação controlada das interações dos receptores do VEGF e dos mecanismos de sinalização célula-célula. Esses modelos modificados são úteis para o estudo de vias de sinalização angiogênicas mediadas principalmente pelos receptores VEGFR1 (FLT1) e VEGFR2 (KDR), que regulam a proliferação endotelial, a migração, a permeabilidade vascular e a neovascularização.

As células HEK293-VEGF-TM são amplamente utilizadas na pesquisa em angiogênese e no desenvolvimento terapêutico para a caracterização de anticorpos direcionados ao VEGF, armadilhas de receptores, produtos biológicos antiangiogênicos e terapias com células imunes modificadas. A apresentação do VEGF ancorada à membrana permite a avaliação quantitativa da ligação ao receptor, da acessibilidade do ligante, do bloqueio por anticorpos, do agrupamento de receptores e de eventos de sinalização dependentes do contato celular. Essas células são particularmente valiosas em ensaios de ligação baseados em citometria de fluxo, sistemas de cocultura, ensaios com repórteres e plataformas de triagem de alto rendimento que avaliam a inibição da via VEGF/VEGFR. Além disso, os modelos HEK293-VEGF-TM podem apoiar estudos que examinam a formação de sinapses e o reconhecimento de alvos por células CAR-T direcionadas ao VEGF ou por plataformas de anticorpos bispecíficos.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Após o descongelamento, divida as células na proporção de 1:2 a 1:3 em frascos T25 e deixe que elas se recuperem do processo de congelamento e se adiram por pelo menos 24 horas.

Para obter melhor aderência e viabilidade após o descongelamento das células, recomendamos o uso de frascos ou placas revestidos com colágeno para a semeadura inicial após a recuperação criogênica. O revestimento com colágeno não é necessário para a cultura de rotina subsequente das células.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.