Skip to content
HEK293-VEGF-TM
Tissue
Thận thai nhi
Disease
Đã biến đổi/bất tử hóa; không gây ung thư (trên nền tế bào HEK293)

Documents

HEK293-VEGF-TM

Cell line · Product number 305991

Disclaimer: The prices displayed for cell lines are exclusively for academic/not-for-profit customers. For commercial entitites the pr...

€1,600.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

Made to order
1

01General information

Description

Lưu ý: Giá niêm yết cho các dòng tế bào chỉ áp dụng cho khách hàng thuộc lĩnh vực học thuật hoặc phi lợi nhuận. Đối với các tổ chức thương mại, giá khoảng 6.250 €.
Nếu quý vị đại diện cho một tổ chức thương mại hoặc không chắc chắn mình thuộc nhóm nào, vui lòng liên hệ với chúng tôi.


Tế bào HEK293-VEGF-TM là tế bào thận phôi người 293 (HEK293) được thiết kế để biểu hiện ổn định một dạng yếu tố tăng trưởng nội mô mạch máu (VEGF) gắn với màng, thường được thiết kế để trình bày VEGF trên bề mặt tế bào thông qua sự hợp nhất với một miền xuyên màng. Khác với các dạng VEGF hòa tan được tiết ra vào môi trường ngoại bào, các cấu trúc VEGF-TM cho phép trình bày cục bộ và liên tục các ligand VEGF trên màng plasma, tạo điều kiện thuận lợi cho việc nghiên cứu có kiểm soát các tương tác thụ thể VEGF và cơ chế tín hiệu tế bào-tế bào. Các mô hình được công nghệ hóa này hữu ích cho việc nghiên cứu các con đường tín hiệu tạo mạch chủ yếu thông qua VEGFR1 (FLT1) và VEGFR2 (KDR), điều chỉnh sự tăng sinh, di chuyển của tế bào nội mô, tính thấm mạch máu và quá trình tạo mạch mới.

Tế bào HEK293-VEGF-TM được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu tạo mạch và phát triển liệu pháp để đặc trưng hóa các kháng thể nhắm mục tiêu VEGF, bẫy thụ thể, sinh phẩm chống tạo mạch và liệu pháp tế bào miễn dịch được thiết kế. Việc trình bày VEGF gắn màng cho phép đánh giá định lượng sự gắn kết thụ thể, khả năng tiếp cận của ligand, chặn kháng thể, tập trung thụ thể và các sự kiện tín hiệu phụ thuộc vào tiếp xúc tế bào. Các tế bào này đặc biệt có giá trị trong các thử nghiệm liên kết dựa trên phân tích tế bào dòng chảy, hệ thống đồng nuôi cấy, thử nghiệm báo cáo và các nền tảng sàng lọc thông lượng cao để đánh giá sự ức chế con đường VEGF/VEGFR. Ngoài ra, các mô hình HEK293-VEGF-TM có thể hỗ trợ các nghiên cứu kiểm tra sự hình thành khớp thần kinh và nhận diện mục tiêu bằng các tế bào CAR-T hướng VEGF hoặc các nền tảng kháng thể song đặc hiệu.

Tissue
Thận thai nhi
Disease
Đã biến đổi/bất tử hóa; không gây ung thư (trên nền tế bào HEK293)
Applications
Nghiên cứu về VEGF xuyên màng (VEGF-TM); phát triển kháng thể chống VEGF; nghiên cứu về quá trình hình thành mạch máu khối u; các phương pháp xét nghiệm ADCC/CDC; phân tích tế bào bằng kỹ thuật đo lưu lượng; nghiên cứu về ung thư và nhãn khoa

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a transmembrane VEGF (VEGF-TM) expression construct for cell-surface VEGF studies and anti-angiogenic therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tương tự biểu mô
Cell type
Tế bào biểu mô
Doubling time
khoảng 24–36 giờ

04Identifiers

Citation
HEK293-VEGF-TM (Mã sản phẩm Cytion 305991)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_6G30

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
VEGF-TM

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, chứa: 2,0 mM glutamine ổn định, chứa: 2,0 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung vào môi trường 10% FBS, 1 mM natri pyruvate, 10 mM HEPES, 1% NEAA. Thêm Geneticin (G418-Sulfat) để đạt nồng độ cuối cùng là 1 mg/mL.
Dissociation reagent
Trypsin-EDTA
Subculturing
Đối với nuôi cấy tế bào bám dính thông thường: Hút bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS để loại bỏ bất kỳ môi trường còn lại nào. Sau khi hút hết PBS, thêm lượng thích hợp dung dịch Trypsin/EDTA dựa trên kích thước bình nuôi cấy (ví dụ: 1 ml cho bình T25, 3 ml cho bình T75) và ủ ở nhiệt độ phòng hoặc 37°C cho đến khi tế bào tách ra (5-10 phút). Theo dõi quá trình tách rời dưới kính hiển vi và nhẹ nhàng gõ nhẹ vào bình nếu cần thiết để giải phóng tế bào. Sau khi tách rời, thêm môi trường nuôi cấy hoàn chỉnh để vô hiệu hóa Trypsin/EDTA, nhẹ nhàng trộn đều tế bào và chuyển một phần của hỗn hợp tế bào vào bình nuôi cấy mới chứa môi trường tươi. Đặt bình vào tủ ấm được cài đặt ở 37°C với 5%CO₂, và thay môi trường mỗi 2-3 ngày.
Split ratio
1 đến 5
Seeding density
2 đến 4 × 10⁴ tế bào/cm²
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Post-thaw recovery

Sau khi rã đông, chia tế bào theo tỷ lệ 1:2 đến 1:3 trong các bình T25 và để tế bào phục hồi sau quá trình đông lạnh và bám dính ít nhất 24 giờ.

Để đạt được độ bám dính và khả năng sống sót tốt nhất sau khi rã đông tế bào, chúng tôi khuyến nghị sử dụng ống nghiệm hoặc đĩa phủ collagen cho lần gieo tế bào ban đầu sau khi phục hồi đông lạnh. Việc phủ collagen không cần thiết cho các lần nuôi cấy thường xuyên sau đó của tế bào.

Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
Thai nhi