HEK293-VEGF-TM
Cell line · Product number 305991
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01General information
- Description
免责声明：所显示的细胞系价格仅适用于学术/非营利客户。对于商业机构，价格约为 6,250 欧元。
如果您代表商业机构，或不确定自己属于哪一类，请 联系我们。
HEK293-VEGF-TM细胞是经过基因工程改造的人胚胎肾293（HEK293）细胞，可稳定表达膜结合型血管内皮生长因子（VEGF），通常通过与跨膜结构域融合，在细胞表面呈现VEGF。 与分泌至细胞外环境的可溶性 VEGF 同工型不同，VEGF-TM 构建体可在细胞膜上实现 VEGF 配体的局部和持续展示，从而有助于对 VEGF 受体相互作用和细胞间信号传导机制进行可控研究。这些工程化模型对于研究主要通过 VEGFR1（FLT1）和 VEGFR2（KDR）介导的血管生成信号通路非常有用，这些通路调节内皮细胞增殖、迁移、血管通透性和新生血管形成。
HEK293-VEGF-TM细胞广泛应用于血管生成研究及治疗药物开发，用于表征VEGF靶向抗体、受体捕获剂、抗血管生成生物制剂以及工程化免疫细胞疗法。膜锚定VEGF的呈现方式可实现对受体结合、配体可及性、抗体阻断、受体聚集以及细胞接触依赖性信号事件的定量评估。 这些细胞在基于流式细胞术的结合实验、共培养系统、报告基因检测以及评估 VEGF/VEGFR 通路抑制的高通量筛选平台中具有特别重要的价值。此外，HEK293-VEGF-TM 模型还可支持针对 VEGF 导向的 CAR-T 细胞或双特异性抗体平台所进行的突触形成和靶标识别研究。
- Tissue
- 胎儿肾脏
- Disease
- 转染/永生化；无致瘤性（HEK293背景）
- Applications
- 跨膜血管内皮生长因子（VEGF-TM）研究；抗VEGF抗体开发；肿瘤血管生成研究；ADCC/CDC检测；流式细胞术；肿瘤学和眼科研究
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This HEK293 cell line contains a transmembrane VEGF (VEGF-TM) expression construct for cell-surface VEGF studies and anti-angiogenic therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮样
- Cell type
- 上皮细胞
- Doubling time
- 约24-36小时
04Identifiers
- Citation
- HEK293-VEGF-TM（Cytion 产品编号 305991）
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_6G30
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- VEGF-TM
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640，w：2.0 mM 稳定谷氨酰胺，w：2.0 g/L NaHCO3（Cytion 文章编号 820700a）。
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 在培养基中添加 10% FBS、1 mM 丙酮酸钠、10 mM HEPES 和 1% NEAA。加入基因素（G418-硫酸酯），使最终浓度达到 1 mg/mL。
- Dissociation reagent
- 胰蛋白酶-EDTA
- Subculturing
- 常规粘附细胞培养：吸出粘附细胞中的旧培养基，并用 PBS 冲洗以去除残留的培养基。吸出 PBS 后，根据培养皿大小加入适量的胰蛋白酶/EDTA 溶液（如 T25 烧瓶 1 毫升，T75 烧瓶 3 毫升），室温或 37°C 孵育直至细胞分离（5-10 分钟）。在显微镜下观察分离情况，必要时轻轻拍打容器以释放细胞。细胞分离后，加入完全培养基以灭活胰蛋白酶/EDTA，轻轻重悬细胞，然后将等分的细胞悬浮液转移到装有新鲜培养基的新培养皿中。将培养皿放入温度为 37°C、二氧化碳浓度为 5%的培养箱中，每 2-3 天更换一次培养基。
- Split ratio
- 1 到 5
- Seeding density
- 2至4×10⁴个细胞/平方厘米
- Fluid renewal
- 每周 2 至 3 次
- Post-thaw recovery
解冻后，按 1:2 至 1:3 的比例将细胞分装在 T25 烧瓶中，让细胞从冷冻过程中恢复并附着至少 24 小时。
为了在解冻细胞后获得最佳的附着力和存活率，我们建议在冷冻恢复后使用涂有胶原蛋白的烧瓶或平板进行首次播种。随后的细胞常规培养不需要胶原涂层。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
08Donor
- Donor age
- 胎儿
09Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时，必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时，必须穿戴适当的防护手套和防护服，并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险，因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Warranty
在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Third-party agreements apply
- Yes
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