ETK-1

ETK-1 je človeška celična linija intrahepatičnega holangiokarcinoma (IHCCA), ki je bila prvotno vzpostavljena iz ascitične tekočine odraslega bolnika s sarkomatoidnim holangiokarcinomom. Tumor, iz katerega je bila pridobljena linija ETK-1, je vseboval tako tubularni adenokarcinom kot sarkomatoidne komponente, celična linija pa odraža sarkomatoidni fenotip. Celice ETK-1 rastejo adhezivno kot enotna epitelijska monosloj z videzom tlakovcev, sestavljena predvsem iz majhnih poligonalnih celic z okroglimi do ovalnimi jedri in izrazitimi nukleoli. Celice v zgodnjih pasážah so pokazale čas podvojitve populacije približno 70 ur ter hiperdiploidni kariotip z modalnim številom kromosomov v sredini 70-ih, kar je skladno s kromosomsko nestabilnostjo, značilno za agresivne maligne obolenja žolčnih poti.

Imunofenotipsko celice ETK-1 izražajo markerje žolčnega epitelija, vključno z γ-glutamil transpeptidazo (GGT), citocheratinom 18 (CK18) in citocheratinom 19 (CK19), kar potrjuje njihov holangiocitni izvor. V bazalnih pogojih so negativne za markerje, povezane s hepatociti, kot sta alfa-fetoprotein (AFP) in albumin. Celice ETK-1 izražajo vimentin, kar odraža njihove sarkomatoidne značilnosti in delni mezenhimalni fenotip, medtem ko ne izražajo karcinoembrionalnega antigena (CEA) in ogljikovodnega antigena 19-9 (CA19-9). Ta profil markerjev ustreza sarkomatoidni komponenti, opazovani v primarnem tumorju, in poudarja značilnosti, skladne z lastnostmi, podobnimi epitelno-mezenhimalni tranziciji.

ETK-1 se je uporabljal tudi kot model za preučevanje celične plastičnosti in diferenciacije linije pri holangiokarcinomu. Zdravljenje z zaviralcem metiltransferaze DNA 5-azacitidinom je povzročilo morfološke in fenotipne spremembe, kar je privedlo do izpeljane celične linije z značilnostmi, podobnimi hepatocitom, vključno z izražanjem AFP, albumina, integrina α1 in trombopoietina, skupaj z izgubo nekaterih žolčnih markerjev. V modelih ksenotransplantatov nezdravljene celice ETK-1 tvorijo tumorje, ki ustrezajo tubularnemu adenokarcinomu z duktalnim fenotipom. Ti izsledki kažejo, da ETK-1 ohranja plastičnost diferenciacije in služi kot dragocen in vitro sistem za preučevanje transdiferenciacije iz žolčnega epitelija v hepatocite, epigenetske regulacije in heterogenosti tumorja pri intrahepatičnem holangiokarcinomu.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo