Skip to content
C17.2
Tissue
สมอง, สมองน้อย
Synonyms
C17

Documents

C17.2

Cell line · Product number 305354

The C17.2 cell line is a neural progenitor line derived from the mouse cerebellum using retroviral-mediated oncogene transfer with the avian myc gene. It ...

€550.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ C17.2 เป็นเซลล์ต้นกำเนิดประสาทที่สกัดจากสมองน้อยของหนูโดยใช้การถ่ายโอนยีนก่อมะเร็งผ่านไวรัสเรโทรไวรัสที่มียีน avian myc เป็นหนึ่งในหลายเซลล์ไลน์ที่พัฒนาขึ้นเพื่อศึกษาศักยภาพในการเปลี่ยนแปลงของเซลล์ต้นกำเนิดประสาท โดยเฉพาะอย่างยิ่งเน้นไปที่สายพันธุ์เซลล์ประสาทและเซลล์เกลียเซลล์ C17.2 แสดงลักษณะสำคัญของเซลล์ต้นกำเนิดประสาท และสามารถเปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์ประสาทและเซลล์เกลียได้ภายใต้สภาวะที่เหมาะสม ทำให้เซลล์เหล่านี้มีคุณค่าสำหรับการศึกษาการพัฒนาของระบบประสาท การเกิดเซลล์ประสาทใหม่ และการเกิดเซลล์เกลีย

ลักษณะเด่นประการหนึ่งของ C17.2 คือศักยภาพในการเปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์ประสาทชนิดต่างๆ ในขณะที่ยังคงความสามารถในการแบ่งตัวแบบไมโทซิส ทำให้สามารถเพาะเลี้ยงและทดลองได้นานขึ้น สายพันธุ์นี้แสดงเครื่องหมายที่เป็นลักษณะเฉพาะของเซลล์ต้นกำเนิดและเซลล์ต้นกำเนิดประสาท และสามารถถูกกระตุ้นให้แสดงเครื่องหมายเฉพาะสายพันธุ์ได้ ขึ้นอยู่กับวิธีการเปลี่ยนแปลงความเสถียรและความสามารถในการเปลี่ยนแปลงหลายรูปแบบของ C17.2 ทำให้สามารถใช้ในการตรวจสอบปัจจัยที่มีผลต่อการตัดสินใจเลือกเส้นทางของเซลล์ประสาท รวมถึงการนำไปใช้ในการวิจัยการซ่อมแซมและการสร้างเซลล์ประสาทใหม่

นักวิจัยใช้เซลล์ C17.2 ในทั้งบริบท in vitro และ in vivo เพื่อทำความเข้าใจกลไกที่ควบคุมชะตากรรมของเซลล์ภายในระบบประสาทส่วนกลาง (CNS) นอกจากนี้ ตำแหน่งการรวมตัวของยีนที่มีการระบุลักษณะอย่างดีและความคงเส้นคงวาในการแสดงออกของเครื่องหมายเฉพาะของเซลล์ประสาททำให้เซลล์สายพันธุ์นี้เป็นแบบจำลองที่เชื่อถือได้สำหรับการศึกษาพัฒนาการของระบบประสาทและการสำรวจบทบาทการรักษาที่เป็นไปได้ของเซลล์ต้นกำเนิดประสาทในแบบจำลองโรคความเสื่อมของระบบประสาท

Tissue
สมอง, สมองน้อย
Synonyms
  • C17

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
เซลล์ต้นกำเนิดประสาท

04Identifiers

Citation
C17.2 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305354)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_4511

05Expression and susceptibility

Oncogenes
ทรานส์ฟอร์แมนท์: v-Myc

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
2 ถึง 4 x 104 เซลล์/ซม.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
C57BL/6 x CD-1
Donor age
ทารกแรกเกิด