A375 สายเซลล์ - คู่มือการวิจัยเมลาโนมา

A375 เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งผิวหนังของมนุษย์ที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในงานวิจัยด้านพิษวิทยาและภูมิคุ้มกันมะเร็ง นักวิจัยใช้สายพันธุ์เซลล์นี้เพื่อศึกษาชีววิทยาของมะเร็งและเส้นทางการส่งสัญญาณ ทดสอบหรือคัดกรองสารต้านมะเร็งที่มีศักยภาพ และพัฒนาวิธีการรักษาใหม่ที่มีประสิทธิภาพ

ที่มาและลักษณะทั่วไปของเซลล์ A375

การรู้เกี่ยวกับต้นกำเนิดและลักษณะทั่วไปของสายเซลล์สามารถช่วยคุณวางแผนการใช้ในวิจัยได้. ส่วนนี้จะครอบคลุมถึงต้นกำเนิดและลักษณะของสายเซลล์ A375. ตัวอย่างเช่น สายเซลล์ A375 คืออะไร? ลักษณะของเซลล์สายพันธุ์ A375 คืออะไร? เซลล์ A375 มาจากที่ไหน? รูปร่างของเซลล์มะเร็งผิวหนัง A375 เป็นอย่างไร? ขนาดของเซลล์ A375 เท่าใด?

• เซลล์ไลน์มะเร็งผิวหนัง A375 มีต้นกำเนิดจากวัฒนธรรมการปลูกถ่ายของเนื้องอกแข็งในผู้หญิงอายุ 54 ปีที่เป็นมะเร็งผิวหนังเมลาโนมาชนิดร้ายแรง [1]
• เซลล์ A375 มีลักษณะทางสัณฐานวิทยาคล้ายเยื่อบุผิว
• ขนาดเซลล์ A375 มีขนาดเล็กกว่าเซลล์ไลน์อื่น ๆ อย่างเห็นได้ชัด โดยประมาณมีเส้นผ่าศูนย์กลางอยู่ที่ 12 ไมโครเมตร
• เซลล์มะเร็งผิวหนังชนิดเมลาโนมา A375 เป็นเซลล์ที่มีโครโมโซมต่ำกว่าปกติ (hypotriploid) จำนวนโครโมโซมที่เป็นค่ากลางสำหรับสายพันธุ์เซลล์นี้คือ 62 ตัว โดยปกติแล้วแต่ละเซลล์จะมีโครโมโซมเครื่องหมาย 9 ตัว และโครโมโซม N2, N6 และ N22 ปกติอย่างละ 1 ชุด

แพทย์ตรวจดูการเจริญเติบโตบนผิวหนังของผู้ใหญ่เพื่อหาโรคมะเร็งผิวหนัง

เซลล์ A375: ข้อมูลการเพาะเลี้ยงเซลล์

การเพาะเลี้ยงเซลล์ A375 นั้นง่ายต่อการดูแลรักษา ไม่มีความต้องการที่ซับซ้อนในการเพาะเลี้ยงเซลล์ ส่วนนี้จะช่วยให้คุณเรียนรู้ข้อมูลที่จำเป็นเกี่ยวกับการเพาะเลี้ยงเซลล์ เช่น เวลาในการเพิ่มจำนวนเซลล์ A375 คืออะไร สื่อที่ใช้ในการเพาะเลี้ยงเซลล์ A375 คืออะไร ความหนาแน่นในการเพาะเลี้ยงเซลล์ A375 คืออะไร เซลล์มะเร็งผิวหนัง A375 ติดผนังหรือไม่

จุดสำคัญสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ A375

เวลาการเพิ่มจำนวนประชากรเป็นสองเท่า:

เวลาสองเท่าของ A375 คือ 20 ชั่วโมง

ติดกันหรือแขวนลอย:

A375 เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งผิวหนังของมนุษย์ที่เกาะติดได้

ความหนาแน่นของการหว่านเมล็ด:

ความหนาแน่นของเซลล์ 1 x 10⁴ เซลล์/cm² เป็นค่าที่เหมาะสมสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ A375 เซลล์ที่เกาะติดจะถูกล้างด้วย 1 x ฟอสเฟตบัฟเฟอร์เกลือ (PBS) และบ่มด้วยสารละลายสำหรับการผ่านเซลล์ (Accutase) หลังจากนั้น จะเติมอาหารเลี้ยงเซลล์และปั่นเหวี่ยง เซลล์ที่เก็บเกี่ยวจะถูกแขวนลอยในอาหารเลี้ยงเซลล์และแบ่งใส่ขวดใหม่เพื่อการเจริญเติบโต

อาหารเลี้ยงเชื้อ:

DMEM เป็นอาหารเลี้ยงเซลล์ที่เหมาะสมที่สุดสำหรับ A375 เมื่อเติมเซรั่มจากเลือดวัวอ่อน (FBS) 10%, กลูโคส 4.5 กรัม/ลิตร, NaHCO3 1.5 กรัม/ลิตร, L-Glutamine 4 มิลลิโมลาร์ และ Sodium pyruvate 1.0 มิลลิโมลาร์ ควรเปลี่ยนอาหารเลี้ยงเซลล์ A375 ทุก 2-3 วันต่อสัปดาห์

เงื่อนไขการเจริญเติบโต:

เซลล์มะเร็งผิวหนังชนิดเมลาโนมา A375 ถูกเพาะเลี้ยงในตู้บ่มเพาะที่มีความชื้น (37°C) พร้อมการจ่ายก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ 5%

การเก็บรักษา:

เซลล์ A375 ที่ถูกแช่แข็งควรเก็บไว้ที่อุณหภูมิต่ำกว่า -150°C ในสถานะไอของไนโตรเจนเหลวหรือในตู้แช่แข็งไฟฟ้า

กระบวนการแช่แข็งและตัวกลาง:

CM-1 หรือ CM-ACF media ใช้สำหรับการแช่แข็งสายเซลล์ A375 กระบวนการแช่แข็งช้าที่อนุญาตให้ลดอุณหภูมิลงอย่างค่อยเป็นค่อยไป 1°C ต่อชั่วโมงได้ถูกเลือกใช้เพื่อปกป้องความมีชีวิตของเซลล์

กระบวนการละลาย

หลอดบรรจุเซลล์มะเร็งผิวหนัง A375 ที่ถูกแช่แข็งจะถูกเขย่าอย่างรวดเร็วในอ่างน้ำเป็นเวลา 40 ถึง 60 วินาที จนเหลือเพียงก้อนน้ำแข็งขนาดเล็ก จากนั้นเติมเซลล์ด้วยอาหารเลี้ยงเซลล์สดและปั่นเหวี่ยงเพื่อกำจัดองค์ประกอบของอาหารเลี้ยงเซลล์ที่ใช้ในการแช่แข็ง เซลล์ที่ตกตะกอนจะถูกแขวนลอยอีกครั้งและเทลงในขวดเพาะเลี้ยงใหม่

ระดับความปลอดภัยทางชีวภาพ:

การเพาะเลี้ยง A375 ถูกจัดการและดูแลในห้องปฏิบัติการระดับความปลอดภัยทางชีวภาพระดับ 1

ชั้นเซลล์ A375 ที่เกาะติดกันอย่างสมบูรณ์ภายใต้กำลังขยาย 20 เท่า

ข้อดีและข้อจำกัดของเซลล์ไลน์ A375

เช่นเดียวกับเซลล์ไลน์อื่น ๆ เซลล์ไลน์มะเร็งผิวหนัง A375 มีความเกี่ยวข้องกับการผสมผสานที่เป็นเอกลักษณ์ของข้อดีและข้อจำกัด ทำให้เป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าสำหรับการวิจัยมะเร็งผิวหนัง ส่วนนี้ได้ระบุข้อดีและข้อเสียที่สำคัญเพียงไม่กี่ประการของเซลล์ไลน์ A375

ข้อดี

ข้อได้เปรียบที่สำคัญของเซลล์ A375 ได้ถูกกล่าวไว้ด้านล่าง:

• แบบจำลองเนื้องอกเมลาโนมา: สายเซลล์ A375 ถูกแยกจากเนื้องอกเมลาโนมาที่เป็นมะเร็ง จึงเป็นแบบจำลองเนื้องอกที่มีคุณค่าอย่างยิ่งในการศึกษาชีววิทยาของเมลาโนมาและการรักษา เซลล์เหล่านี้แสดงคุณสมบัติคล้ายเมลาโนมา เช่น อัตราการเพิ่มจำนวนสูงและความสามารถในการรุกราน
• ความสามารถในการก่อเนื้องอก: เซลล์ A375 มีความสามารถในการก่อเนื้องอกสูงมาก หมายความว่าสามารถก่อตัวเป็นเนื้องอกได้ มีการรายงานว่าเซลล์ A375 สามารถก่อให้เกิดมะเร็งผิวหนังเมลาโนมาชนิดไม่สร้างเม็ดสีที่มีความรุนแรงในหนู NIH Swiss ที่ได้รับการรักษาด้วยเซรั่มต้านที-เซลล์ (สารกดภูมิคุ้มกัน)
• มีการระบุลักษณะอย่างชัดเจน: A375 เป็นสายพันธุ์เซลล์ที่มีการระบุลักษณะทางพันธุกรรมอย่างชัดเจน มีลักษณะการกลายพันธุ์ทางพันธุกรรมเฉพาะเช่นเดียวกับมะเร็งผิวหนังชนิดเมลาโนมา การกลายพันธุ์ของ A375 รวมถึงการเปลี่ยนแปลงของยีน BRAF ใน A375 ซึ่งทำให้ไวต่อสารยับยั้งเฉพาะ BRAF โปรไฟล์ทางพันธุกรรมนี้ทำให้เซลล์ A375 เป็นเครื่องมือวิจัยมะเร็งที่ยอดเยี่ยมสำหรับการศึกษาเส้นทางโมเลกุลพื้นฐานและการรักษาแบบมุ่งเป้า

ข้อจำกัด

ข้อจำกัดที่เกี่ยวข้องกับเซลล์ A375 ได้แก่:

• ข้อจำกัดในหลอดทดลอง: A375 เป็นแบบจำลองเนื้องอกในหลอดทดลอง แม้ว่าจะเลียนแบบลักษณะของมะเร็งผิวหนังเมลาโนมาได้ แต่ไม่สามารถแสดงถึงความซับซ้อนของเนื้องอกมะเร็งผิวหนังเมลาโนมาได้อย่างสมบูรณ์ ดังนั้น จึงควรใช้ความระมัดระวังเมื่อนำผลการทดลองในหลอดทดลองไปสรุปผลในงานวิจัยทางคลินิก

ซื้อเซลล์ A375 ของคุณตอนนี้

การวิจัยการประยุกต์ใช้สายพันธุ์เซลล์ A375

สายเซลล์ A375 มีการประยุกต์ใช้ในงานวิจัยอย่างกว้างขวางในด้านการวิจัยมะเร็ง ต่อไปนี้คือบางพื้นที่ทั่วไปที่เซลล์ A375 ถูกนำมาใช้

• การวิจัยโรคมะเร็ง: เซลล์ A375 มีการประยุกต์ใช้อย่างแพร่หลายในการวิจัยเกี่ยวกับมะเร็งผิวหนังชนิดเมลาโนมา นักวิจัยใช้เซลล์เหล่านี้เพื่อศึกษาชีววิทยาของมะเร็งผิวหนัง กระบวนการ และกลไกการส่งสัญญาณของเซลล์ที่อยู่เบื้องหลัง รวมถึงการเพิ่มจำนวนเซลล์ การเคลื่อนที่ และการรุกรานของเซลล์ ซึ่งอาจช่วยให้นักวิจัยสามารถระบุเป้าหมายการรักษาแบบโมเลกุลใหม่ได้ การศึกษาที่ดำเนินการโดย Lin Zhu และคณะในปี 2019 ได้ใช้เซลล์มะเร็งผิวหนังชนิดเมลาโนมาที่มีความก้าวร้าวสูง A375 และพบบทบาทของไมโครอาร์เอ็นเอ-3662 ต่อการเจริญเติบโตและการรุกรานของเซลล์มะเร็งผิวหนังเมลาโนมา A375 ผลการศึกษาพบว่าไมโครอาร์เอ็นเอ-3662 มีเป้าหมายที่ยีน ZEB1 และควบคุมการเจริญเติบโตของเซลล์มะเร็งเมลาโนมาในหลอดทดลองและในร่างกายหนูทดลองแบบ in vivo ในแบบจำลองเนื้องอก A375 [2] ในทำนองเดียวกัน งานวิจัยที่ดำเนินการในปี 2018 พบว่า เส้นทาง PI3K/AKT และ MAPK/ERK มีส่วนเกี่ยวข้องกับการเพิ่มจำนวนและการแพร่กระจายของเซลล์สายพันธุ์ A375 [3]
• การค้นพบและทดสอบยา: สายเซลล์ A375 เป็นแบบจำลองเนื้องอกในหลอดทดลองที่มีประโยชน์สำหรับการทดสอบและคัดกรองสารต้านมะเร็งที่มีศักยภาพ นักวิจัยประเมินความเป็นพิษและประสิทธิภาพของยาเคมีบำบัดชนิดใหม่ สารประกอบ และการบำบัดอื่นๆ โดยใช้เซลล์มะเร็งผิวหนัง A375 เหล่านี้ ตัวอย่างเช่น การศึกษาหนึ่งได้สำรวจคุณสมบัติต้านมะเร็งของไมโครและนาโนเวสิเคิลที่ได้จากเกรปฟรุตต่อเซลล์มะเร็งผิวหนังมนุษย์ A375 ผลการศึกษาพบว่าไมโครและนาโนเวสิเคิลทำให้เกิดการหยุดชะงักของวัฏจักรเซลล์และการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิส และขัดขวางการแสดงออกของยีนในกระบวนการเพิ่มจำนวนเซลล์ การเคลื่อนที่ และการรุกราน [4]

เซลล์ A375: สิ่งตีพิมพ์

มีการกล่าวถึงงานวิจัยสำคัญบางฉบับที่มีการใช้เซลล์ A375 เป็นส่วนหนึ่งที่นี่

วิตามินดีและสารอนุพันธ์ที่มีแคลเซียมต่ำของมันปรับคุณสมบัติต้านมะเร็งของซิสพลาตินและดาคาร์บาซีนในเซลล์ไลน์มะเร็งผิวหนังมนุษย์ A375

การศึกษานี้ได้รับการตีพิมพ์ในวารสาร Journal of Oncology ในปี 2019 การศึกษานี้เสนอว่าการรักษาร่วมด้วยวิตามินดีและสารเลียนแบบช่วยปรับปรุงกิจกรรมต้านมะเร็งของซิสพลาตินและดาคาร์บาซีนในเซลล์มะเร็งผิวหนัง A375

การประเมินผลในหลอดทดลองของฤทธิ์ต้านมะเร็งผิวหนังเมลาโนมา (สายพันธุ์เซลล์ A375) ของเจลและสารสกัดจากใบทั้งใบของว่านหางจระเข้สายพันธุ์ที่คัดเลือก

งานวิจัยนี้ได้รับการตีพิมพ์ในวารสาร Journal of Herbal Medicine ในปี 2022 การศึกษานี้สำรวจผลของเจลว่านหางจระเข้ต่อการต้านมะเร็งผิวหนังเมลาโนมาในเซลล์มะเร็งผิวหนังเมลาโนมา A375

สมาชิกครอบครัว Fermitin 2 ส่งเสริมการลุกลามของมะเร็งผิวหนังเมลาโนมาโดยการเพิ่มการจับของ p-α-Pix กับ Rac1 เพื่อกระตุ้นเส้นทาง MAPK

การศึกษาในวารสาร Oncogene (2021) ได้เสนอว่าสมาชิกในตระกูลเฟอร์มิติน 2 (FERMT2 หรือ kindlin-2) ส่งเสริมการลุกลามของมะเร็งผิวหนังเมลาโนมาโดยการกระตุ้น MAPK ผ่านการจับกับ p-α-Pix และ Rac1

FARP1 ช่วยส่งเสริมการเพิ่มจำนวนเซลล์โดยการปรับเส้นทางสัญญาณ MAPK ในมะเร็งผิวหนังเมลาโนมา

การศึกษาในวารสาร The American Journal of Dermatopathology (2019) ได้เสนอว่า FARP1 อาจมีส่วนช่วยในการพัฒนาและการลุกลามของมะเร็งผิวหนังเมลาโนมา ดังนั้น FARP1 อาจเป็นเป้าหมายที่มีประโยชน์สำหรับการรักษา

ศักยภาพในการทำลายเซลล์และการตายแบบอะพอพโทซิสของสารสกัดจาก Phyllodium elegans ต่อเซลล์มะเร็งมนุษย์

บทความวิจัยนี้ได้รับการตีพิมพ์ในวารสาร Bioengineered (2019) การศึกษานี้สำรวจฤทธิ์ในการทำลายเซลล์และการเหนี่ยวนำให้เกิดการตายแบบอะพอพโทซิสของสารสกัดจากพืช Phyllodium elegans ต่อเซลล์มะเร็งผิวหนังมนุษย์หลายสายพันธุ์ รวมถึง A375

ทรัพยากรสำหรับสายเซลล์ A375: โปรโตคอล, วิดีโอ, และอื่น ๆ

ต่อไปนี้คือแหล่งข้อมูลออนไลน์บางส่วนที่เกี่ยวข้องกับเซลล์ A375

• การถ่ายยีนในเซลล์ A375: วิดีโอสอนนี้จะช่วยให้คุณเรียนรู้การถ่ายยีนในเซลล์ A375 ทีละขั้นตอน
• การเพาะเลี้ยงเซลล์: วิดีโอนี้มีข้อมูลที่เป็นประโยชน์มากเกี่ยวกับการเพาะเลี้ยงสายพันธุ์เซลล์

โปรโตคอลการเพาะเลี้ยงเซลล์สำหรับเซลล์ A375 ได้ระบุไว้ที่นี่

• สายเซลล์ A375: ลิงก์นี้มีข้อมูลที่เป็นประโยชน์เกี่ยวกับการเพาะเลี้ยงและการดูแลรักษาสายเซลล์ A375 รวมถึงสื่ออาหารเลี้ยงเซลล์ A375 และการจัดการกับเซลล์ A375 ที่แช่แข็งและกำลังขยายตัว

คำถามที่พบบ่อย (FAQ) สำหรับเซลล์ A375

เอกสารอ้างอิง

1. Avram, S., และคณะ, การมาตรฐานของแบบจำลองมะเร็งผิวหนังมนุษย์ A375 บนเยื่อหุ้มไข่แดงของตัวอ่อนไก่และหนู Balb/c nude. Oncol Rep, 2017. 38(1): หน้า 89-99.
2. จู, แอล., และคณะ, ไมโครอาร์เอ็นเอ-3662 เป็นเป้าหมายของ ZEB1 และลดการรุกรานของเซลล์มะเร็งผิวหนังชนิดรุนแรงสูง A375. Cancer Manag Res, 2019. 11: หน้า 5845-5856.
3. เพ็ง, เอ็กซ์., และผู้อื่น, ออกซีฟาดิคัลโคน ซี ยับยั้งการเจริญเติบโตของเซลล์มะเร็งผิวหนัง A375 และการแพร่กระจายผ่านทางการยับยั้งเส้นทาง PI3K/Akt และ MAPK/ERK. วิทยาศาสตร์ชีวภาพ, 2018. 206: หน้า 35-44.
4. Stanly, C., และคณะ, ไมโครและนาโนเวสิเคิลที่ได้จากเกรปฟรุตแสดงโปรไฟล์เมตาโบโลมและกิจกรรมต้านมะเร็งที่แตกต่างกันในเซลล์มะเร็งผิวหนังมนุษย์สายพันธุ์ A375. Cells, 2020. 9(12): หน้า 2722.