เซลล์ B16-F10 - การสำรวจเซลล์ไลน์มะเร็งผิวหนัง B16-F10 ในการวิจัยการแพร่กระจาย

เซลล์ B16-F10 เป็นสายพันธุ์เซลล์เมลาโนมาที่มาจากหนู C57BL/6J ซึ่งถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในการวิจัยมะเร็งผิวหนัง นักวิจัยใช้เซลล์เหล่านี้เพื่อศึกษาการพัฒนาและการลุกลามของเนื้องอก รวมถึงการแทรกแซงทางการรักษา บทความนี้จะครอบคลุมแง่มุมพื้นฐานของเซลล์มะเร็งผิวหนัง B16-F10 โดยเฉพาะอย่างยิ่งจะรวมถึง:

1. ที่มาและลักษณะทั่วไปของเซลล์ไลน์ B16-F10
2. การเพาะเลี้ยงข้อมูลของเซลล์ B16-F10
3. เซลล์ B16-F10: ข้อดีและข้อเสีย
4. การประยุกต์ใช้เซลล์ B16-F10 ในการวิจัย
5. สิ่งพิมพ์ที่นำเสนอสายเซลล์ B16-F10
6. ทรัพยากรสำหรับสายเซลล์ B16-F10: โปรโตคอล, วิดีโอ, และอื่น ๆ

ที่มาและลักษณะทั่วไปของเซลล์ไลน์ B16-F10

ส่วนนี้จะให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับต้นกำเนิดและลักษณะเฉพาะของเซลล์เนื้องอกมะเร็งผิวหนัง B16F10 ซึ่งจะช่วยให้คุณใช้สายเซลล์นี้ได้อย่างมีประสิทธิภาพในงานวิจัยของคุณ โดยหลักแล้ว คุณจะได้เรียนรู้ว่า: เซลล์ B16-F10 คืออะไร? B16F10 มาจากอะไร? ลักษณะของสายพันธุ์เซลล์ B16F12 เป็นอย่างไร? ขนาดของเซลล์ B16F10 เท่าใด?

• B16-F10 เป็นสายพันธุ์ย่อยของเซลล์มะเร็ง B16 ที่ได้มาจากเนื้อเยื่อผิวหนังของหนู C57BL/6J ในที่นี้ เซลล์มะเร็งผิวหนัง B16F10 ถูกพัฒนาขึ้นหลังจากฉีดเซลล์สายพันธุ์ B16 เข้าสู่หนูที่มีภูมิคุ้มกันบกพร่องหรือหนูสายพันธุ์เดียวกันทางหลอดเลือดดำ เซลล์เหล่านี้ถูกคัดเลือกเนื่องจากมีศักยภาพในการก่อตัวเป็นอาณานิคมของมะเร็งที่แพร่กระจายในปอดในร่างกาย และถูกสร้างขึ้นหลังจากผ่านกระบวนการสร้างอาณานิคมในปอดในหลอดทดลองสิบรอบ [1] การพัฒนานี้ดำเนินการโดย Fidler และคณะในปี 1976
• เซลล์ไลน์ B16-F10 มีลักษณะคล้ายเยื่อบุผิวและมีรูปร่างคล้ายแกนหมุน
• ขนาดโดยประมาณของเซลล์ B16-F10 คือ 15.4 ± 1.4 μm [2]

เซลล์ B16-F1 และเซลล์ B16-F10

เซลล์ B16-F1 และ B16-F10 ถูกแยกมาจากสายพันธุ์เซลล์ต้นกำเนิด B16 ทั้งสองมีต้นกำเนิดเดียวกันและมีลักษณะเกือบจะเหมือนกัน อย่างไรก็ตาม ความแตกต่างหลักคือความสามารถในการแพร่กระจายของเซลล์ เซลล์ B16-F10 มีศักยภาพในการแพร่กระจายสูง ในขณะที่เซลล์ B16-F1 มีศักยภาพในการแพร่กระจายต่ำ [3]

ภาพตัดขวางที่ขยายใหญ่มากของเนื้องอกเมลาโนมาชนิดร้ายภายใต้กล้องจุลทรรศน์

การเพาะเลี้ยงข้อมูลของเซลล์ B16-F10

ก่อนการจัดการและเพาะเลี้ยงเซลล์ไลน์ คุณต้องทราบเกี่ยวกับเวลาการเพิ่มจำนวนเป็นสองเท่า สื่อการเจริญเติบโต สภาวะ และโปรโตคอลการเพาะเลี้ยงเซลล์ ส่วนนี้จะกล่าวถึง: เวลาการเพิ่มจำนวนเป็นสองเท่าของเซลล์ b16-f10 คืออะไร? คุณจะเพาะเลี้ยงเซลล์ B16F10 ได้อย่างไร? สื่อการเพาะเลี้ยงเซลล์ B16-F10 คืออะไร? สภาวะวัฒนธรรมใดที่แนะนำสำหรับเซลล์ B16-F10?

จุดสำคัญในการเพาะเลี้ยงเซลล์ B16-F10

เวลาสองเท่า:

ระยะเวลาที่เซลล์ B16-F10 จะเพิ่มจำนวนเป็นสองเท่าคือประมาณ 20.1 ชั่วโมง ซึ่งอาจอยู่ในช่วง 17 ถึง 21 ชั่วโมง ขึ้นอยู่กับสภาพการเพาะเลี้ยง

ติดแน่นหรือแขวนลอย:

B16-F10 เป็นสายพันธุ์เซลล์ที่เกาะติดกัน เซลล์เจริญเติบโตอย่างรวดเร็วและสร้างชั้นเดียว

อัตราส่วนการแบ่ง:

เซลล์ B16-F10 ถูกเพาะเลี้ยงต่อในอัตราส่วน 1:2 ถึง 1:4 แล้วล้างเซลล์ด้วยสารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์เกลือ (1x) จากนั้นนำไปบ่มกับสารละลาย Accutase สำหรับการผ่านเซลล์เป็นเวลา 8 ถึง 10 นาที ที่อุณหภูมิห้อง จากนั้นเติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่และปั่นเหวี่ยง นำก้อนเซลล์ที่เก็บเกี่ยวแล้วมาแขวนลอยอีกครั้ง และนำเซลล์ไปกระจายลงในขวดใหม่ที่มีอาหารเลี้ยงเชื้อสดตามอัตราส่วนการแบ่ง

อาหารเลี้ยงเชื้อ:

เซลล์ B16-F10 ถูกเพาะเลี้ยงในอาหารเลี้ยงเซลล์ DMEM โดยเติมอาหารเสริม 10% FBS, 4 มิลลิโมลาร์ L-Glutamine, 1.5 กรัม/ลิตร NaHCO3, 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส และ 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต เพื่อการเจริญเติบโตที่เหมาะสมของเซลล์ ควรเปลี่ยนสื่อ 2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์

เงื่อนไขการเจริญเติบโต:

เซลล์ B16-F10 ถูกเพาะเลี้ยงในตู้อบควบคุมความชื้นที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส โดยมีก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ 5%

การเก็บรักษา:

เซลล์ที่ถูกแช่แข็งจะถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิต่ำกว่า -150 °C ในตู้แช่แข็งอุณหภูมิต่ำพิเศษแบบใช้ไฟฟ้า หรือในสถานะไอของไนโตรเจนเหลว เพื่อรักษาความมีชีวิตของเซลล์

กระบวนการแช่แข็งและตัวกลาง:

เซลล์ B16-F10 ถูกแช่แข็งในสื่อ CM-1 หรือ CM-ACF สำหรับการเก็บรักษา สำหรับการนี้ แนะนำให้ใช้กระบวนการแช่แข็งช้าซึ่งอนุญาตให้อุณหภูมิลดลงเพียง 1°C ต่อนาทีเพื่อป้องกันเซลล์จากการช็อก

กระบวนการละลาย

เซลล์ B16-F10 ที่ถูกแช่แข็งจะถูกละลายในอ่างน้ำที่ตั้งไว้ที่อุณหภูมิ 37°C เป็นเวลา 40 ถึง 60 วินาที จากนั้นนำเซลล์ที่ละลายแล้วไปเติมในอาหารเลี้ยงเชื้อใหม่และปั่นเหวี่ยงเพื่อกำจัดส่วนประกอบของอาหารเลี้ยงเชื้อที่ใช้ในการแช่แข็ง เซลล์ที่เก็บได้จะถูกแขวนลอยในอาหารเลี้ยงเชื้อสำหรับการเจริญเติบโตและเทลงในขวดเลี้ยงเชื้อเพื่อทำการเพาะเลี้ยง

ระดับความปลอดภัยทางชีวภาพ:

ห้องปฏิบัติการความปลอดภัยทางชีวภาพระดับ 1 จำเป็นต้องใช้ในการจัดการและดูแลสายเซลล์ B16-F10

เซลล์ B16-F10 ที่มีการรวมตัวกันครึ่งหนึ่ง ที่กำลังขยาย 20 เท่า และ 10 เท่า

เซลล์ B16-F10: ข้อได้เปรียบ & ข้อเสีย

เช่นเดียวกับเซลล์ไลน์อื่น ๆ B16-F10 ก็มีข้อดีและข้อเสียบางประการเช่นกัน ข้อดีและข้อเสียที่สำคัญบางประการของเซลล์ไลน์มะเร็งผิวหนังเมลาโนมาชนิดนี้ จะถูกกล่าวถึงในส่วนนี้

ข้อดี

เซลล์ไลน์ B16-F10 ถูกใช้อย่างแพร่หลายในงานวิจัยมะเร็ง ข้อดีของเซลล์ B16-F10 คือ:

ศักยภาพในการแพร่กระจาย

เซลล์มะเร็งผิวหนังเมลาโนมา B16F10 แสดงศักยภาพในการแพร่กระจายสูง ทำให้มีคุณค่าในการศึกษาการแพร่กระจายของมะเร็งและกลไกพื้นฐานที่เกี่ยวข้อง

แบบจำลองเนื้องอกในหลอดทดลอง

เซลล์ B16-F10 ทำหน้าที่เป็นแบบจำลองในหลอดทดลองสำหรับการศึกษาการลุกลามและการเจริญเติบโตของมะเร็ง ช่วยให้นักวิจัยเข้าใจกลไกระดับเซลล์และระดับโมเลกุลที่ขับเคลื่อนการเกิดมะเร็ง

 

ข้อเสีย

ข้อเสียที่เกี่ยวข้องกับเซลล์ไลน์ B16-F10 ได้แก่:

สายพันธุ์เซลล์ที่ได้จากหนู

B16-F10 เป็นสายพันธุ์เซลล์ที่ได้จากหนู ซึ่งจำกัดการใช้งานเฉพาะในงานวิจัยที่เกี่ยวข้องกับมนุษย์เท่านั้น ผลการวิจัยที่ได้จากเซลล์เหล่านี้อาจไม่สามารถนำไปประยุกต์ใช้กับชีววิทยาของมนุษย์ได้อย่างแท้จริงเสมอไป

 

การประยุกต์ใช้เซลล์ B16-F10 ในการวิจัย

เซลล์ไลน์ B16-F10 ถูกใช้อย่างแพร่หลายในงานวิจัยมะเร็ง การประยุกต์ใช้งานที่มีแนวโน้มดีบางประการของเซลล์ไลน์นี้จะถูกกล่าวถึงในที่นี้

• การวิจัยโรคมะเร็ง: สายเซลล์ B16-F10 เป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าในการศึกษาการกระบวนการของเซลล์มะเร็ง รวมถึงการเจริญเติบโต การบุกรุก การเคลื่อนที่ และการตายของเซลล์หรือการตายแบบอะพอพโทซิส นอกจากนี้ ยังช่วยให้ผู้วิจัยได้รับความเข้าใจในกลไกโมเลกุลและเส้นทางที่ขับเคลื่อนกระบวนการเซลล์เหล่านี้ การศึกษาที่ดำเนินการในปี 2018 ได้สำรวจบทบาทของ CCR5 (ตัวรับเคโมไคน์ชนิด C-C ประเภทที่ห้า) ในการเปลี่ยนแปลงของเซลล์เมลาโนมาจากเซลล์เยื่อบุผิวเป็นเซลล์มีเซนไคม์และการแพร่กระจายของมะเร็ง ผลการวิจัยพบว่า การขาด CCR5 จำกัดการเจริญเติบโตและการแพร่กระจายของเนื้องอก ในขณะที่การแสดงออกในระดับสูงนำไปสู่การเจริญเติบโตและการแพร่กระจายที่เพิ่มขึ้นของเซลล์ B16-F10 การวิจัยเพิ่มเติมรายงานว่า CCR5 ควบคุมการแสดงออกของ TGFβ1 ซึ่งควบคุมการส่งสัญญาณ PI3K/AKT/GSK3β เพื่อส่งเสริมการเปลี่ยนแปลงจากเซลล์เยื่อบุผิวเป็นเซลล์มีเซนไคม์และการเคลื่อนที่ของเซลล์ [4]
• การทดสอบและพัฒนายา: เซลล์มะเร็งผิวหนังชนิดเมลาโนมา B16F10 มีความก้าวร้าวสูง จึงเหมาะสำหรับการทดสอบยาและวิธีการรักษาที่อาจมีประสิทธิภาพในการต่อต้านเนื้องอก นักวิจัยใช้เซลล์เหล่านี้เพื่อประเมินผลของสารประกอบต่างๆ ต่อการเจริญเติบโต การเพิ่มจำนวน และการแพร่กระจายของเซลล์ ซึ่งช่วยในการพัฒนายา การศึกษาที่ดำเนินการในปี 2018 โดย Valentina Nanni และคณะ ได้ศึกษาผลทางการรักษาของสารสกัดไฮโดรแอลกอฮอล์จากดอก Spartium junceum การศึกษาได้เสนอว่าสารสกัดจากดอกไม้มีประสิทธิภาพในการกระตุ้นการแก่ของเซลล์ B16-F10 ซึ่งนำไปสู่การเจริญเติบโตของเซลล์และการยับยั้งการสร้างเม็ดสีเมลานิน ดังนั้น สารสกัดนี้อาจมีฤทธิ์ต้านมะเร็งได้ [5]

5. สิ่งพิมพ์ที่นำเสนอสายเซลล์ B16-F10

นี่คือเอกสารวิจัยที่สำคัญบางฉบับที่นำเสนอข้อมูลเกี่ยวกับสายพันธุ์เซลล์มะเร็งผิวหนัง B16-F10:

ฤทธิ์ต้านการสร้างเมลานินของสารสกัดเอทานอลจากข้าวฟ่างสองสีต่อกระบวนการสร้างเมลานินที่ถูกเหนี่ยวนำด้วย IBMX ในเซลล์มะเร็งผิวหนัง B16/F10

การศึกษานี้ได้รับการตีพิมพ์ในวารสาร Nutrients (2020) โดยเสนอว่าสารสกัดเอทานอลจากข้าวฟ่างสองสี (Sorghum bicolor) มีฤทธิ์ต้านการสร้างเม็ดสีเมลานินในเซลล์มะเร็งผิวหนังเมลาโนมา B16F10

แคลซิไตรออลยับยั้งการเพิ่มจำนวนและอาจเหนี่ยวนำให้เกิดการตายแบบอะพอพโทซิสในเซลล์ B16–F10

งานวิจัยที่ตีพิมพ์ในวารสาร Medical Science Monitor Basic Research (2022) เสนอว่ายาแคลซิไตรออลออกฤทธิ์ต้านเนื้องอกในเซลล์มะเร็งผิวหนัง B16-F10 โดยยับยั้งการเพิ่มจำนวนเซลล์และกระตุ้นการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิส

ผลโปรออกซิเดทีฟของคาร์ดอลมีส่วนเกี่ยวข้องกับฤทธิ์ทำลายเซลล์ของสารนี้ต่อเซลล์มะเร็งเมลาโนมา B16–F10 ในหนู

บทความนี้ได้รับการตีพิมพ์ในวารสาร Biochemical and Biophysical Research Communications (2022) ผลการวิจัยพบว่า Cardols และ resorcinolic lipids มีฤทธิ์เป็นพิษต่อเซลล์อย่างรุนแรงต่อเซลล์ไลน์ B16-F10

สารสกัดจากเปลือกนอกของแปะก๊วยยับยั้งการแพร่กระจายของมะเร็งผิวหนัง B16-F10 ที่เกี่ยวข้องกับเส้นทางการส่งสัญญาณ PI3K/akt/NF-κB/MMP-9

การศึกษาที่ตีพิมพ์ในวารสาร Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) ได้สำรวจศักยภาพในการต้านการแพร่กระจายของสารสกัดจากเปลือกนอกใบแปะก๊วย (Ginkgo biloba) โดยใช้เซลล์ B16-F10

ไทโมควิโนนเหนี่ยวนำให้เกิดการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิสในเซลล์มะเร็งผิวหนัง B16-F10 ผ่านการยับยั้ง p-STAT3 และยับยั้งการเจริญเติบโตของเนื้องอกในหนูที่มีมะเร็งผิวหนังในสมอง ...

งานวิจัยในวารสาร World Neurosurgery (2018) เสนอว่า ไทมอกีโนนสามารถเป็นวิธีการรักษาที่มีประสิทธิภาพต่อรอยโรคที่แพร่กระจายในสมอง เนื่องจากสามารถยับยั้งการเจริญเติบโตของเซลล์ B16-F10 และกระตุ้นการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิส 

ทรัพยากรสำหรับสายเซลล์ B16-F10: โปรโตคอล, วิดีโอ, และอื่น ๆ

เซลล์เยื่อบุผิว B16F10 ถูกใช้อย่างแพร่หลายในการวิจัยมะเร็งผิวหนัง ต่อไปนี้คือแหล่งข้อมูลออนไลน์ที่อธิบายวิธีการเพาะเลี้ยงและการถ่ายยีนของเซลล์เหล่านี้:

• การถ่ายยีนในเซลล์มะเร็งผิวหนัง B16F10: วิดีโอสอนนี้จะช่วยให้คุณเรียนรู้ขั้นตอนการถ่ายยีนในเซลล์ B16-F10
• การถ่ายยีน B16-F10: เอกสารนี้จะอธิบายขั้นตอนการถ่ายยีน DNA ในหลอดทดลองสำหรับเซลล์มะเร็งผิวหนัง B16F10

ลิงก์ต่อไปนี้ประกอบด้วยโปรโตคอลการเพาะเลี้ยงเซลล์สำหรับเซลล์ B16-F10:

• การเพาะเลี้ยงเซลล์ B16-F10: เว็บไซต์นี้มีข้อมูลที่เป็นประโยชน์เกี่ยวกับเซลล์เนื้องอกมะเร็งผิวหนัง B16F10 ซึ่งรวมถึงอาหารเลี้ยงเซลล์, ระยะเวลาการเพิ่มจำนวนเซลล์, สภาพแวดล้อมในการเพาะเลี้ยง, และขั้นตอนการเพาะเลี้ยงเซลล์, รวมถึงการจัดการกับเซลล์ที่ถูกแช่แข็งและเซลล์ที่กำลังเพิ่มจำนวน

เอกสารอ้างอิง

1. Poste, G., และคณะ, การเปรียบเทียบคุณสมบัติการแพร่กระจายของเซลล์มะเร็งผิวหนัง B16 ที่แยกได้จากเซลล์ไลน์ที่เพาะเลี้ยง, เนื้องอกใต้ผิวหนัง, และการแพร่กระจายไปยังปอดรายบุคคล. Cancer Research, 1982. 42(7): หน้า 2770-2778.
2. นากามูระ, เอ็ม., ดี. โอโนะ, และ เอส. ซูกิตะ, การศึกษาลักษณะเชิงกลของเซลล์มะเร็งผิวหนัง B16 สายพันธุ์ต่างๆ เพื่อประเมินประสิทธิภาพของการรักษาด้วย (-)-Epigallocatechin Gallate โดยใช้เครื่องมือไมโครฟลูอิดิกทรงเรียว. ไมโครแมชชีน, 2019. 10(3): หน้า 207
3. Danciu, C., และคณะ, พฤติกรรมของเซลล์มะเร็งผิวหนังเมลาโนมาชนิด B16 สายพันธุ์ย่อย 4 ชนิด: ผิวหนังหนูสายพันธุ์ C57BL/6J. Int J Exp Pathol, 2015. 96(2): หน้า 73-80.
4. Liu, J., และคณะ, การแสดงออกสูงของ CCR5 ในเมลาโนมาเพิ่มการเปลี่ยนผ่านจากเยื่อบุผิวไปเป็นเยื่อบุและแพร่กระจายผ่าน TGFβ1. วารสารพยาธิวิทยา, 2019. 247(4): หน้า 481-493.
5. นันนี, ว., และคณะ, สารสกัดไฮโดรแอลกอฮอล์จากดอกสปาร์เทียม จุนเซียม แอล. ยับยั้งการเจริญเติบโตและการสร้างเมลานินในเซลล์ B16-F10 โดยการเหนี่ยวนำให้เกิดความชรา. ฟิตอเมดิซีน, 2018. 46: หน้า 1-10.