เซลล์ไลน์ HT-29

HT-29 เป็นเซลล์ไลน์มะเร็งลำไส้ใหญ่ของมนุษย์ที่มีการประยุกต์ใช้อย่างกว้างขวางในงานวิจัยด้านมะเร็งและพิษวิทยา เช่น เซลล์เหล่านี้มีความไวต่อการรักษาด้วยเคมีบำบัดมาตรฐานที่ใช้กับมะเร็งลำไส้ใหญ่ นอกจากนี้ สายพันธุ์เซลล์ HT-29 ยังเป็นแบบจำลองในหลอดทดลองที่ได้รับการศึกษาอย่างละเอียดเพื่อตรวจสอบการตอบสนองของเยื่อบุผิวลำไส้ต่อการติดเชื้อแบคทีเรีย เซลล์ HT-29 มีลักษณะคล้ายกับเซลล์ลำไส้ที่เจริญเต็มที่ เช่น เซลล์เอนเทอโรไซต์ จึงเหมาะสำหรับการศึกษาการยึดเกาะและการศึกษาเชิงกลไก

เซลล์ HT-29: ต้นกำเนิดและข้อมูลทั่วไป

ก่อนการใช้เซลล์ไลน์ใด ๆ คุณควรทราบเกี่ยวกับลักษณะทั่วไปและแหล่งกำเนิดของเซลล์ไลน์นั้น ๆ บทความนี้จะช่วยให้คุณได้เรียนรู้: เซลล์ HT-29 คืออะไร? HT-29 เป็นเซลล์ไลน์ของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักหรือไม่? ลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเซลล์ HT-29 เป็นอย่างไร?

เซลล์ไลน์ HT-29 คืออะไร? HT-29 เป็นเซลล์ไลน์ของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมา ซึ่งถูกสร้างขึ้นในปี พ.ศ. 2507 โดย Trempe และ Fogh เซลล์เหล่านี้มีต้นกำเนิดมาจากเนื้องอกปฐมภูมิของผู้หญิงชาวคอเคเซียน (อายุ 44 ปี) ที่เป็นมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมา [1] ตั้งแต่การก่อตั้งสายพันธุ์เซลล์นี้ได้ถูกนำมาใช้ในการศึกษาชีววิทยาของมะเร็ง

สัณฐานวิทยาของเซลล์ HT-29: สายพันธุ์เซลล์ HT-29 มีลักษณะสัณฐานวิทยาคล้ายเซลล์เยื่อบุผิว เซลล์ที่แตกต่างจะเติบโตเป็นชั้นเดียว สร้างรอยต่อระหว่างเซลล์ที่แน่นหนา และมีขอบแปรงที่ปลายยอด หากเซลล์เหล่านี้ถูกเลี้ยงในอาหารที่มีกลูโคสไม่เพียงพอหรือได้รับสารกระตุ้นเช่น บัตียเรตหรือกรด พวกมันจะแสดงลักษณะคล้ายเซลล์เยื่อบุลำไส้

ขนาดเซลล์: เส้นผ่านศูนย์กลางของเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักสายพันธุ์ HT-29 คือ 11 ไมโครเมตร

จีโนมและจำนวนชุดโครโมโซม: จำนวนโครโมโซมที่พบมากที่สุดในเซลล์ไลน์ HT-29 คือ 71 ชุด ซึ่งอาจอยู่ในช่วง 68-72 ชุด นอกจากนี้ จำนวนโครโมโซมที่เรียบง่ายของเซลล์ HT-29 เป็นแบบไฮเปอร์ไตรพลอยด์ โดยมีส่วนประกอบ 2S เกิดขึ้นในอัตรา 2.4%

HT29 MTX คืออะไร? HT29 MTX เป็นสายพันธุ์เซลล์ที่ต้านทานยาเมโธเทรกเซต (methotrexate) ซึ่งแยกได้จากสายพันธุ์เซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ของมนุษย์ HT-29 ดั้งเดิม โดยการปรับตัวกับยาเมโธเทรกเซตที่ความเข้มข้น 10 µM เซลล์เหล่านี้มีลักษณะของเซลล์โกเบล็ตที่เจริญเต็มที่ซึ่งหลั่งสารเมือก

การแบ่งตัวและการเคลื่อนที่ของเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักภายใต้กล้องจุลทรรศน์

ข้อมูลการเพาะเลี้ยงเซลล์ของสายพันธุ์ HT-29

การรู้เกี่ยวกับความต้องการทางวัฒนธรรมพื้นฐานของเซลล์ไลน์สามารถทำให้การทำงานของคุณง่ายขึ้นได้ คุณควรรู้: ระยะเวลาการเพิ่มจำนวนสองเท่าของเซลล์ไลน์ HT-29 คืออะไร? ความหนาแน่นในการเพาะเลี้ยงของเซลล์ HT-29 คืออะไร? สื่ออาหารสำหรับเซลล์ HT-29 คืออะไร?

เวลาที่ใช้เป็นสองเท่า

ค่าเฉลี่ยของเวลาสองเท่าสำหรับสายเซลล์ HT-29 คือ 24 ชั่วโมง

ติดแน่น/แขวนลอย

HT-29 เป็นสายพันธุ์เซลล์ที่เกาะติด 

ความหนาแน่นของการหว่านเมล็ด

ความหนาแน่นของการเพาะเลี้ยงที่แนะนำสำหรับเซลล์ HT-29 คือ 3 x 10⁴ เซลล์/ซม.² เซลล์ที่เจริญเติบโตแล้วล้างด้วย 1 X PBS และแยกออกจากกันหลังจากการบ่มด้วย Accutase เป็นเวลา 8-10 นาที เติมสื่อใหม่และทำการปั่นเหวี่ยงเซลล์ จากนั้นนำตะกอนเซลล์มาแขวนลอยใหม่และแบ่งเซลล์ลงในขวดใหม่ตามความหนาแน่นที่แนะนำ

อาหารเลี้ยงเชื้อ

ใช้ Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) ที่เสริมด้วย L-glutamine 2.5 mM และ FBS 10% สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ HT-29 อย่างเหมาะสม ควรเปลี่ยนอาหารเลี้ยงเซลล์ทุก 2 ถึง 3 วัน

เงื่อนไขการเจริญเติบโต

เซลล์ HT-29 ต้องการตู้เพาะเลี้ยงที่มีสภาพดินอุดมด้วยฮิวมัส อุณหภูมิ 37°C และปริมาณ CO₂ 5% สำหรับการเจริญเติบโต

การจัดเก็บ

เซลล์เหล่านี้ถูกเก็บไว้ในสถานะไอของไนโตรเจนเหลวที่อุณหภูมิต่ำกว่า -195°C  

 

ตัวกลางและกระบวนการแช่แข็ง

ตัวกลางแช่แข็งที่ใช้สำหรับเซลล์ไลน์ HT-29 คือ CM-1 หรือ CM-ACF เซลล์จะถูกแช่แข็งโดยกระบวนการแช่แข็งช้าที่ทำให้อุณหภูมิลดลง 1 °C และช่วยปกป้องความมีชีวิตของเซลล์ได้อย่างมีประสิทธิภาพ

กระบวนการละลาย

เซลล์ HT-29 ที่ถูกแช่แข็งจะถูกนำมาละลายในอ่างน้ำที่ตั้งอุณหภูมิไว้ที่ 37°C เซลล์เหล่านี้สามารถนำไปแขวนลอยและแจกจ่ายโดยตรงลงในขวดเลี้ยงเชื้อที่มีอาหารเลี้ยงเชื้อสด ตรงกันข้ามกับสิ่งนี้ เซลล์ที่ละลายแล้วสามารถนำไปปั่นเหวี่ยงเพื่อกำจัดองค์ประกอบของสารละลายแช่แข็ง จากนั้นนำไปแขวนลอยในสารละลายใหม่ และเพาะเลี้ยงในขวดเพาะเชื้อ

ระดับความปลอดภัยทางชีวภาพ

ระดับความปลอดภัยทางชีวภาพ 1 ใช้สำหรับจัดการและดูแลรักษาสายเซลล์ HT-29

เซลล์ HT-29 ภายใต้การขยาย 10 เท่า และ 20 เท่า

เซลล์ HT-29: ข้อดีและข้อจำกัด

ทุกสายพันธุ์ของเซลล์มีข้อดีและข้อเสียที่เป็นเอกลักษณ์ซึ่งทำให้แตกต่างจากสายพันธุ์อื่น ๆ ส่วนนี้จะครอบคลุมถึงข้อได้เปรียบหลักและข้อจำกัดที่เกี่ยวข้องกับเซลล์ HT-29

ข้อดี

ข้อดีหลักของเซลล์ HT-29 คือ:

• เพาะเลี้ยงง่าย

  เซลล์ไลน์ HT-29 ง่ายต่อการจัดการและบำรุงรักษา โดยไม่มีความต้องการที่ซับซ้อนสำหรับการเพาะเลี้ยง และถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในห้องปฏิบัติการวิจัย

• แบบจำลองในหลอดทดลองของเซลล์ลำไส้

  เซลล์ HT-29 สามารถเปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์ลำไส้ที่สมบูรณ์ (เซลล์เยื่อบุผิวลำไส้และเซลล์ที่ผลิตเมือก) ภายใต้สภาวะการเพาะเลี้ยงเฉพาะ พวกมันถูกใช้เป็นแบบจำลองเซลล์เพื่อศึกษาการย่อยอาหารและการดูดซึมสารอาหาร

• ประสิทธิภาพการถ่ายโอนยีนสูง

  เซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ HT-29 มีประสิทธิภาพในการทรานส์เฟคสูง ทำให้เหมาะสำหรับการศึกษาการแสดงออกและการควบคุมยีน การทดลองทรานส์เฟคทั้งแบบชั่วคราวและแบบคงที่สามารถดำเนินการได้โดยใช้วิธีการต่างๆ

• ความไวต่อยา

  เซลล์ HT-29 มีความไวต่อยาเคมีบำบัด เช่น ฟลูออโรยูราซิล และออกซาลิพลาติน ซึ่งใช้กันอย่างแพร่หลายในการรักษามะเร็งลำไส้ใหญ่ พวกมันถูกใช้ในการศึกษาความต้านทานต่อยาและคัดกรองยาที่มีศักยภาพในการรักษาสำหรับมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก

ข้อจำกัด

• ความไม่สม่ำเสมอ

  เซลล์ HT-29 เช่นเดียวกับเซลล์มะเร็งสายพันธุ์อื่น ๆ แสดงความไม่สม่ำเสมอและอาจไม่สามารถสร้างประชากรเซลล์ที่เป็นเนื้อเดียวกันได้ ซึ่งอาจส่งผลต่อความสามารถในการทำซ้ำของผลลัพธ์ในบางการทดสอบและนำไปสู่ความแปรปรวนเล็กน้อยในผลลัพธ์ของการทดลอง

• การแยกแยะที่จำกัด

  เซลล์ HT-29 มีศักยภาพในการเปลี่ยนแปลงรูปเป็นเซลล์ชนิดอื่นได้จำกัด โดยไม่สามารถเปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์ลำไส้หรือเซลล์ลำไส้ใหญ่ได้อย่างสมบูรณ์ แต่จะแสดงลักษณะเฉพาะบางประการเท่านั้น ข้อจำกัดนี้อาจทำให้เซลล์ HT-29 ไม่เหมาะสมสำหรับการศึกษาในกระบวนการทางชีววิทยาที่มีความซับซ้อนมากขึ้น

เซลล์ HT-29: การประยุกต์ใช้งาน

เซลล์ไลน์ HT-29 ถูกเพาะเลี้ยงอย่างแพร่หลายในห้องปฏิบัติการวิจัยเนื่องจากมีขอบเขตการใช้งานที่หลากหลาย ส่วนนี้จะกล่าวถึงเพียงไม่กี่การประยุกต์ใช้ที่สำคัญของเซลล์ HT-29 เท่านั้น

การวิจัยมะเร็ง: HT-29 เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก ดังนั้นจึงถูกนำมาใช้ในการศึกษาการเจริญเติบโตของมะเร็ง การพัฒนา และกลไกโมเลกุลที่อยู่เบื้องหลัง การศึกษาที่ดำเนินการในปี 2018 ใช้สายพันธุ์เซลล์ HT-29 เพื่อตรวจสอบโมเลกุลของเซลล์ที่รับผิดชอบต่อการแพร่กระจายของมะเร็ง การศึกษานี้พบว่ายีน vimentin และ CXCR4 มีบทบาทในการควบคุมการแพร่กระจายของเซลล์ ในขณะที่การถ่ายยีน microRNA-193a-5p สามารถลดระดับ mRNA ของยีนเหล่านี้และลดการแพร่กระจายของเซลล์มะเร็งได้สำเร็จ [2]

การวิจัยพิษวิทยา: สายพันธุ์เซลล์ HT-29 ถูกใช้อย่างกว้างขวางในงานวิจัยพิษวิทยา เซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่เหล่านี้ถูกใช้ในการประเมินความเป็นพิษของสารต้นแบบยาต่างๆ โดยใช้การทดสอบที่หลากหลาย เช่น การศึกษาหนึ่งที่สำรวจศักยภาพความเป็นพิษของสารสกัดเอทานอลจากพืช Syzygium cumini ต่อสายพันธุ์เซลล์ HT-29 ผลการทดลองแสดงให้เห็นถึงการยับยั้งการเจริญเติบโตของเซลล์ HT-29 อย่างมีนัยสำคัญ ซึ่งบ่งชี้ถึงคุณสมบัติต้านมะเร็งที่น่าหวังของสารสกัด [3]

จุลชีววิทยา: HT-29 สามารถใช้เป็นระบบเซลล์โฮสต์ในการศึกษาพยาธิกำเนิดของจุลชีพที่อาจก่อโรค เช่น แบคทีเรียและไวรัส นักวิจัยสามารถติดเชื้อ HT-29 ด้วยจุลินทรีย์เพื่อศึกษาความรุนแรงของเชื้อและการตอบสนองของโฮสต์ การศึกษาดังกล่าวใช้เซลล์ HT-29 เพื่อสำรวจคุณสมบัติของแบคทีเรียกรดแลคติกในฐานะโปรไบโอติก [4] การศึกษาอีกชิ้นหนึ่งใช้เซลล์ HT-29 เพื่อประเมินประสิทธิภาพและความปลอดภัยของการรักษาด้วยแบคเทอริโอเฟจ [5]

5. วิจัยสิ่งพิมพ์เกี่ยวกับเซลล์ HT-29

ส่วนนี้จะให้ความรู้เกี่ยวกับสิ่งพิมพ์ที่น่าสนใจบางฉบับเกี่ยวกับเซลล์ HT-29 ที่จะช่วยคุณในการวางแผนการศึกษาวิจัยของคุณ

การประเมินผลต้านมะเร็งของสารสกัดเอทานอลจากผลมะขามป้อมต่อเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ HT-29

การศึกษานี้เสนอสารสกัดเอทานอลจาก Syzygium cumini เป็นสารต้านมะเร็งที่มีศักยภาพต่อเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักชนิด HT-29 สารสกัดนี้สามารถยับยั้งการเจริญเติบโตของเซลล์มะเร็งได้อย่างมีนัยสำคัญ

เตตรานดรินยับยั้งการเจริญเติบโตของเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ HT-29 ผ่านเส้นทาง Bcl-2/Caspase 3/PARP และระยะ G1/S

สิ่งพิมพ์นี้ใน Bioscience Reports ได้ทดสอบฤทธิ์ต้านมะเร็งของสารประกอบ Tetradrine ในเซลล์ HT-29 ผลการทดลองแสดงให้เห็นว่า tetrandrine ยับยั้งการเพิ่มจำนวนและการเจริญเติบโตของเซลล์มะเร็งผ่านการควบคุมเส้นทางการส่งสัญญาณของเซลล์

ไมโครอาร์เอ็นเอ‐193a‐5p ยับยั้งการเคลื่อนที่ของเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ชนิด HT-29 ของมนุษย์ผ่านการยับยั้งเส้นทางของการแพร่กระจาย

การศึกษานี้เสนอว่า miRNA-193a-5p อาจสามารถควบคุมการแพร่กระจายของเซลล์ HT-29 ได้โดยการควบคุมยีนที่เกี่ยวข้องกับการแพร่กระจาย

แบคทีริโอฟาจมีความรุนแรงต่อแบคทีเรียที่มีเซลล์มนุษย์มากกว่าในวัฒนธรรมแบคทีเรีย; ข้อมูลเชิงลึกจากเซลล์ HT-29

บทความนี้ได้รับการตีพิมพ์ในวารสาร Nature Scientific Reports ในปี 2018 การศึกษานี้ใช้สายพันธุ์เซลล์มะเร็ง HT-29 เป็นแบบจำลองเซลล์ลำไส้เพื่อประเมินประสิทธิภาพของการรักษาด้วยแบคทีริโอเฟจที่นำเสนอ

คุณสมบัติของโปรไบโอติกของแลคโตบาซิลลัสและความสามารถในการยับยั้งการเกาะติดของแบคทีเรียก่อโรคทางเดินอาหารต่อเซลล์ Caco-2 และ HT-29

ในการศึกษานี้ นักวิจัยใช้เซลล์ HT-29 เพื่อตรวจสอบกิจกรรมโปรไบโอติกของแบคทีเรียกรดแลคติก น่าสนใจที่การศึกษาชี้ให้เห็นว่าแบคทีเรียแลคโตบาซิลลัสสามารถป้องกันการยึดเกาะของแบคทีเรียก่อโรคกับเซลล์ลำไส้ใหญ่ได้

เซลล์ HT-29 ทรัพยากร: โปรโตคอล, วิดีโอ และอื่นๆ

ส่วนนี้จะครอบคลุมแหล่งข้อมูลออนไลน์ที่มีเกี่ยวกับเซลล์ HT-29 ซึ่งจะช่วยในการเรียนรู้การบำรุงรักษา การเพาะเลี้ยง และวิธีการทรานส์เฟคชัน

โปรโตคอลการเพาะเลี้ยงเซลล์

ทรัพยากรต่อไปนี้จะแนะนำคุณเกี่ยวกับการเพาะเลี้ยงเซลล์ HT-29 ในอาหารเลี้ยงเชื้อ

• การเพาะเลี้ยงเซลล์ HT-29: ลิงก์นี้จะให้ข้อมูลพื้นฐานเกี่ยวกับอาหารเลี้ยงเซลล์ การละลายน้ำแข็ง และการเพาะเลี้ยงต่อรุ่นของเซลล์ HT-29
• การดูแลรักษาเซลล์ HT-29: บทความนี้ประกอบด้วยข้อมูลที่เป็นประโยชน์ทั้งหมดเกี่ยวกับการเพาะเลี้ยงและการดูแลรักษาเซลล์ HT-29

โปรโตคอลการถ่ายโอนยีน

สายพันธุ์เซลล์ HT-29 มีประสิทธิภาพในการทรานส์เฟคสูงมาก และมักถูกใช้ในงานศึกษาการแสดงออกของยีน แหล่งข้อมูลต่อไปนี้อธิบายถึงวิธีการทรานส์เฟคที่เป็นไปได้สำหรับเซลล์เหล่านี้

• การถ่ายยีน HT-29: ลิงก์เว็บไซต์นี้มีโปรโตคอลโดยละเอียดสำหรับการถ่ายยีนในเซลล์ HT-29
• การถ่ายโอนยีนในเซลล์ไลน์ HT-29: เอกสารนี้อธิบายขั้นตอนการถ่ายโอนยีนในเซลล์ไลน์ HT-29 ด้วยพลาสมิด DNA

วิดีโอที่เกี่ยวข้องกับสายพันธุ์เซลล์ HT-29

นี่คือวิดีโอเกี่ยวกับการเพาะเลี้ยงและการดูแลรักษาเซลล์ไลน์ที่ก่อให้เกิดเนื้องอกนี้

• การเพาะเลี้ยงเซลล์: วิดีโอนี้แสดงวิธีการเพาะเลี้ยงเซลล์สำหรับสายพันธุ์เซลล์ที่เกาะติด
• การถ่ายยีนในเซลล์ HT-29: วิดีโอนี้จะแนะนำคุณเกี่ยวกับวิธีการถ่ายยีนที่ใช้สำหรับเซลล์ HT-29

เราคาดหวังว่าข้อมูลในบทความนี้มีคุณค่าและเพียงพอสำหรับคุณในการจัดการและบำรุงรักษาเซลล์ไลน์ HT-29 หากคุณวางแผนที่จะใช้เซลล์ HT-29 ในการศึกษาของคุณ กรุณาสั่งซื้อจากเรา

เอกสารอ้างอิง

1. Martínez-Maqueda, D., B. Miralles, และ I. Recio, สายเซลล์ HT29. ผลกระทบของสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพในอาหารต่อสุขภาพ: แบบจำลอง in vitro และ ex vivo, 2015: หน้า 113-124.
2. Shirafkan, N., et al., microRNA‐193a‐5p ยับยั้งการเคลื่อนที่ของเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ HT-29 ของมนุษย์ผ่านทางการยับยั้งเส้นทางของการแพร่กระจาย. วารสารชีวเคมีระดับเซลล์, 2019. 120(5): หน้า 8775-8783.
3. โคดาวิร์ดิพูร์, เอ., R. Zarean และ R. Safaralizadeh, การประเมินผลต้านมะเร็งของสารสกัดเอทานอลจาก Syzygium cumini ต่อเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่และไส้ตรงชนิด HT-29. วารสารมะเร็งทางเดินอาหาร, 2021. 52: หน้า 575-581.
4. ฟอนเซกา, เอช.ซี., และคณะ, คุณสมบัติของโปรไบโอติกของแลคโตบาซิลลัสและความสามารถในการยับยั้งการเกาะติดของแบคทีเรียที่ทำให้เกิดโรคทางเดินอาหารกับเซลล์ Caco-2 และ HT-29. โปรไบโอติกและโปรตีนต้านจุลชีพ, 2021. 13: หน้า 102-112.
5. Shan, J., และคณะ, แบคทีริโอฟาจมีความรุนแรงต่อแบคทีเรียที่มีเซลล์มนุษย์มากกว่าในวัฒนธรรมแบคทีเรีย; ข้อมูลเชิงลึกจากเซลล์ HT-29. รายงานทางวิทยาศาสตร์, 2018. 8(1): หน้า 5091.