HT-29 細胞系

HT-29 是一種人類結直腸癌細胞系，在癌症及毒理學研究領域具有廣泛的應用。例如，這些細胞對針對結直腸癌的標準化療方案具有敏感性。 此外，HT-29 細胞系是一種特徵明確的體外模型，可用於研究腸上皮細胞對細菌感染的反應。HT-29 細胞模擬了成熟腸細胞（即腸上皮細胞）的特徵，因此適合用於細胞附著及作用機制研究。

HT-29 細胞：來源與一般資訊

在使用任何細胞系之前，您應了解該細胞系的一般特性與來源。本節將協助您了解：何謂 HT-29 細胞？HT-29 是否為大腸直腸癌細胞系？HT-29 細胞的形態為何？

何謂 HT-29 細胞系？HT-29 是一種由 Trempe 和 Fogh 於 1964 年建立的結直腸腺癌細胞系。 該細胞最初源自一名患有大腸直腸腺癌的白人女性（44 歲）的原發性腫瘤 [1]。自建立以來，此細胞系一直被用於研究癌症的生物學特性。

HT-29 細胞的形態：HT-29 細胞系通常具有上皮樣形態。 分化後的細胞以單層形式生長，形成緊密的細胞間連接，並具有頂端刷狀緣。若將這些細胞培養於缺乏葡萄糖的培養基中，或添加丁酸或酸等誘導劑，它們便會展現出類似腸上皮細胞的特徵。

細胞大小：HT-29 結直腸癌細胞系的直徑為 11 μm。

基因組與倍性：HT-29 細胞系的模態染色體數為 71，範圍可能介於 68 至 72 之間。此外，HT-29 細胞的簡化染色體數為超三倍體，其中 2S 成分的發生率為 2.4%。

何謂 HT29 MTX？HT29 MTX 是一種從原始 HT-29 人結直腸癌細胞系中，經適應 10 µM 甲氨蝶呤後所分離出的甲氨蝶呤抗性細胞系。這些細胞呈現黏液分泌型成熟杯狀細胞的特徵。

顯微鏡下結直腸癌細胞的分裂與移動。

HT-29 細胞系的細胞培養資訊

了解細胞系的基本培養要求，能讓您更輕鬆地進行相關研究。您應了解：HT-29 細胞系的倍增時間是多少？HT-29 細胞的接種密度是多少？HT-29 細胞應使用何種培養基？

倍增時間

HT-29 細胞系的平均倍增時間為 24 小時。

貼壁／懸浮

HT-29 屬於貼壁型細胞系。 

接種密度

HT-29 細胞的建議接種密度為 3 × 10^⁴ 細胞/cm^²。將生長的細胞以 1× PBS 洗滌，並與 Accutase 孵育 8-10 分鐘後使其脫附。 加入新鮮培養基，並將細胞離心。將細胞沉澱重新懸浮，並按建議的細胞密度分裝至新的培養瓶中。

生長培養基

為使 HT-29 細胞達到最佳培養效果，應使用添加 2.5 mM L-谷氨醯胺及 10 % FBS 的 Eagle 最小必需培養基（EMEM）。培養基應每週更換 2 至 3 次。

生長條件

HT-29 細胞需在 37°C 溫度及 5 % CO₂ 供應的加濕培養箱中生長。

儲存

這些細胞應儲存於液態氮的氣相中，溫度需低於 -195°C。  

 

冷凍培養基與冷凍流程

HT-29 細胞系所使用的冷凍培養基為 CM-1 或 CM-ACF。細胞採用緩慢冷凍法進行冷凍，該方法使溫度以 1 °C 為單位逐步下降，能有效保護細胞的存活率。

解凍程序

冷凍的 HT-29 細胞需置於設定為 37°C 的水浴中進行解凍。這些細胞可重新懸浮，並直接分裝至裝有新鮮生長培養基的燒瓶中。 此外，亦可將解凍後的細胞進行離心處理以去除冷凍介質殘留物，再懸浮於新鮮培養基中，並於培養瓶內進行培養。

生物安全等級

處理及維護 HT-29 細胞系時，應採用生物安全等級 1。

10倍與20倍放大倍率下的 HT-29 細胞。

HT-29 細胞：優點與限制

每種細胞系都有其獨特的優點與缺點，使其有別於其他細胞系。本節將探討 HT-29 細胞的主要優點與限制。

優點

HT-29 細胞的主要優點包括：

• 易於培養

  HT-29 細胞系操作與維護簡便，培養要求並不複雜，因此在研究實驗室中被廣泛培養。

• 腸道細胞的體外模型

  在特定的培養條件下，HT-29 細胞可分化為成熟的腸道細胞（腸上皮細胞和黏液分泌細胞）。它們被用作細胞模型，用於研究食物消化與生物利用度。

• 高轉染效率

  HT-29 結腸癌細胞具有高轉染效率，使其適合用於基因表達與調控研究。可透過多種方法進行暫時性及穩定性轉染實驗。

• 藥物敏感性

  HT-29 細胞對氟尿嘧啶和奧沙利鉑等常用於結腸癌治療的化療藥物具有敏感性。該細胞系常被用於研究藥物抗性，並篩選潛在的結直腸癌治療藥物。

限制

• 異質性

  HT-29 細胞與其他癌細胞系一樣，具有異質性，可能無法形成均勻的細胞群。這可能會影響某些檢測中結果的可重複性，並導致實驗結果出現輕微差異。

• 分化能力有限

  HT-29 細胞的分化潛能有限。它們無法完全分化為腸道或結腸細胞，僅展現少數特徵性徵象。此限制可能影響其在研究更複雜生物過程時的應用。

HT-29 細胞：應用

由於應用範圍廣泛，HT-29 細胞系在研究實驗室中被廣泛培養。本節僅介紹 HT-29 細胞的幾項重要應用。

癌症研究：HT-29 是一種結直腸腺癌細胞系，因此被用於研究癌症的進展、發展及其潛在的分子機制。一項於 2018 年進行的研究利用 HT-29 細胞系，探究負責轉移的細胞分子。 該研究觀察到，維曼汀（vimentin）和 CXCR4 基因會調節細胞轉移。而轉染 microRNA-193a-5p 模擬物可降低這些基因的 mRNA 水平，並成功抑制癌細胞轉移 [2]。

毒理學研究：HT-29 細胞系廣泛應用於毒理學研究。這些結直腸癌細胞被用於透過各種檢測方法評估不同候選藥物的毒性。例如，一項研究探討了植物 Syzygium cumini 的乙醇萃取物對 HT-29 細胞系的潛在毒性。 結果顯示該萃取物能顯著抑制 HT-29 細胞的生長，表明該萃取物具有極具前景的抗癌特性 [3]。

微生物學：HT-29 可用作宿主細胞系統，以探究潛在微生物（即細菌和病毒）的致病機制。 研究人員可讓 HT-29 細胞感染微生物，以探究其致病性及宿主反應。某項研究即利用 HT-29 細胞探討乳酸菌的益生菌特性 [4]。另一項研究則利用 HT-29 細胞評估噬菌體治療的療效與安全性 [5]。

5. 關於 HT-29 細胞的研究文獻

本節將介紹一些關於 HT-29 細胞的值得注意的文獻，這些文獻將有助於您規劃研究計畫。

Syzygium cumini 乙醇萃取物對 HT-29 結直腸癌細胞系的抗癌效果評估

本研究提出 Syzygium cumini 乙醇萃取物可作為針對結直腸癌細胞系 HT-29 的潛在抗癌劑。該萃取物顯著抑制了癌細胞的生長。

Tetrandrine 透過 Bcl-2/Caspase 3/PARP 路徑及 G1/S 期抑制結腸癌 HT-29 細胞的生長

這篇發表於《生物科學報告》（Bioscience Reports）的論文，測試了化合物「四烷鹼」（Tetrandrine）對 HT-29 細胞的抗癌活性。結果顯示，四烷鹼是透過調節細胞訊號傳導途徑來抑制癌細胞的增殖與生長。

microRNA-193a-5p 透過抑制轉移途徑來抑制人類 HT-29 結腸癌細胞的遷移

這項研究提出，miRNA-193a-5p 可能透過調控與轉移相關的基因，來調節 HT-29 細胞的轉移。

噬菌體對含有人類細胞的細菌比在細菌培養基中更具致病性；來自 HT-29 細胞的見解

本論文於 2018 年發表於《自然－科學報告》（Nature Scientific Reports）。本研究利用 HT-29 致瘤細胞系作為腸道細胞模型，以評估所提議的噬菌體治療方案之療效。

乳酸桿菌的益生菌特性及其抑制腸道致病菌黏附於 Caco-2 和 HT-29 細胞的能力

在這項研究中，研究人員利用 HT-29 細胞來探究乳酸菌的益生菌活性。值得注意的是，研究結果顯示乳酸菌能防止致病菌附著於結腸細胞上。

HT-29 細胞資源：操作手冊、影片及其他

本節將介紹關於 HT-29 細胞的線上資源，這些資源有助於學習其維護、培養及轉染操作流程。

細胞培養操作指南

以下資源將引導您了解 HT-29 細胞的傳代培養。

• HT-29 細胞培養：此連結將提供有關 HT-29 細胞生長培養基、解凍及傳代的基本知識。
• HT-29 細胞培養的維護：本文包含有關 HT-29 細胞培養與維護的所有實用資訊。

轉染操作流程

HT-29 細胞系具有極高的轉染效率，常被用於基因表達研究。以下資源描述了針對此類細胞的各種轉染操作流程。

• HT-29 轉染：此網站連結包含 HT-29 細胞轉染的詳細操作流程。
• HT-29 細胞系的轉染：本文件說明使用質體 DNA 對 HT-29 細胞系進行轉染的操作流程。

與 HT-29 細胞系相關的影片

以下是一些關於此致瘤細胞系培養與維護的影片。

• 細胞傳代：此影片展示貼壁細胞系的傳代操作流程。
• HT-29 細胞轉染：本影片將引導您了解 HT-29 細胞的轉染方法。

我們期望本文中的資訊對您處理與維護 HT-29 細胞系具有實用價值且內容完備。若您計劃在研究中使用 HT-29 細胞，歡迎向我們訂購。

參考文獻

1. Martínez-Maqueda, D., B. Miralles 及 I. Recio，《HT29 細胞系》。《食品生物活性物質對健康的影響：體外與離體模型》，2015 年：第 113-124 頁。
2. Shirafkan, N. 等，microRNA-193a-5p 透過抑制轉移途徑來抑制人類 HT-29 結腸癌細胞的遷移。《細胞生物化學期刊》，2019 年，120(5)：第 8775-8783 頁。
3. Khodavirdipour, A., R. Zarean 及 R. Safaralizadeh，《Syzygium cumini 乙醇萃取物對 HT-29 結直腸癌細胞系的抗癌效果評估》。《胃腸道癌症期刊》，2021 年，第 52 卷：第 575-581 頁。
4. Fonseca, H.C.等人，乳酸桿菌的益生菌特性及其抑制腸道致病菌黏附於 Caco-2 和 HT-29 細胞的能力。 《益生菌與抗菌蛋白》，2021年，第13卷：第102-112頁。
5. Shan, J.等人，噬菌體對含有人類細胞的細菌所展現的毒力，高於其在細菌培養基中的毒力；來自HT-29細胞的見解。《科學報告》，2018年，第8卷第1期：第5091頁。