İçeriğe atla
CTLL-2
Doku
Kan
Eş anlamlılar
CTLL 2, CTLL2, CTLL(2)

CTLL-2

Cell line · Ürün numarası 400482

CTLL-2, or cytotoxic T lymphocyte cell line-2, is an immortalized mouse cell line that originates from cytotoxic T cells. These cells were obtained throug...

€430.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

CTLL-2 veya sitotoksik T lenfosit hücre hattı-2, sitotoksik T hücrelerinden kaynaklanan ölümsüzleştirilmiş bir fare hücre hattıdır. Bu hücreler, F4-5 Friend virüsü (FLV) kaynaklı lösemi hücreleri ile aşılanmış C57BL/6 farelerinin dalak hücrelerinin tekrarlayan allojenik Karışık Tümör-Lenfosit Kültürleri (MTLC) yoluyla elde edilmiştir. Bu spesifik türetim, CTLL-2'yi viral onkogenez ve tümör immünolojisine T-hücresi aracılı yanıtları incelemek için oldukça uygun bir model haline getirmektedir. Hücre hattı, hayatta kalmak ve çoğalmak için kültür ortamında interlökin-2 (IL-2) bulunmasını gerektirir ve bu da sitokin güdümlü hücre süreçlerinin araştırılmasındaki faydasını vurgular.

İmmünolojik araştırmalarda CTLL-2, T-hücre fonksiyonu ve sitokin biyolojisinin çeşitli yönlerini incelemek için kritik bir araç olarak hizmet eder. Büyümesi ve beslenmesi için IL-2'ye olan bağımlılığı, bu sitokin tarafından aktive edilen sinyal yollarının yanı sıra dış uyaranlara yanıt veren T hücrelerindeki daha geniş gen ifadesi değişikliklerini araştırmak için özellikle yararlıdır. Ayrıca, CTLL-2, T-hücresi reseptörü (TCR) aktivasyonu ile ilgili çalışmalarda kullanılır ve hücre çoğalması, apoptoz ve sitokin salgılanması hakkında bilgi sağlar. Bu özellikler, CTLL-2'yi yeni immünomodülatör ajanlar keşfetmeyi amaçlayan yüksek verimli tarama deneyleri ve kanser immünoterapisi ve otoimmün hastalık yönetiminde çok önemli olan IL-2 formülasyonlarının biyolojik aktivitesini test etmek için gerekli kılmaktadır.

Doku
Kan
Eş anlamlılar
  • CTLL 2
  • CTLL2
  • CTLL(2)

02Sınıflandırma

Canlı
Fare
Büyüme özellikleri
Askıya alma
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Tek hücre süspansiyonu, yuvarlak, parlayan hücreler
Hücre türü
Lenfoblast
Karyotip
Belirtilmemiş

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
CTLL-2 (Cytion katalog numarası 400482)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10090
Cellosaurus
CVCL_0227

05İfade ve duyarlılık

Eksprese edilen reseptörler
IL-2
Virüsler
Ektromelia virüsü (fare çiçeği) için test edildi ve negatif bulundu.

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
i2Cult (Bu ürünü tedarik etmiyoruz; lütfen diğer tedarikçileri değerlendirin. Daha fazla yardıma ihtiyacınız olursa lütfen bize bildirin)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Alt kültür oluşturma
Çözüldükten hemen sonra, Trypan Mavisi boya dışlaması kullanılarak yaklaşık %50 canlı hücre ölçülmüştür. Hücrelerin canlılığı zamanla daha da düşük değerlere düşecektir. Ancak hücre canlılığı yaklaşık 1 milyon hücre/ml hücre konsantrasyonunda 48 saat içinde >%80'e çıkmalıdır. Hücreleri 40000 hücre/ml aşılama yoğunluğunda alt kültüre alın. Hücre canlılığını her gün kontrol edin. Hücreleri 37 santigrat derece ve %5CO2'de tutun.
Ekim yoğunluğu
5 x 105 hücre/mL
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Hücrelerin dondurma işleminden sonra en az 48 saat boyunca toparlanmasına izin verin.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.