Pāriet uz saturu
CTLL-2
Audums
Asinis
Sinonīmi
CTLL 2, CTLL2, CTLL(2)

Dokumenti

CTLL-2

Cell line · Preces numurs 400482

CTLL-2, or cytotoxic T lymphocyte cell line-2, is an immortalized mouse cell line that originates from cytotoxic T cells. These cells were obtained throug...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

CTLL-2 jeb citotoksisko T limfocītu šūnu līnija-2 ir imortizēta peļu šūnu līnija, kas iegūta no citotoksiskajām T šūnām. Šīs šūnas tika iegūtas, izmantojot atkārtotas alogēnas jauktas audzēja-limfocītu kultūras (MTLC) no liesas šūnām, kas iegūtas no C57BL/6 pelēm, kuras imunizētas ar F4-5 Friend vīrusa (FLV) izraisītas leikēmijas šūnām. Šis specifiskais iegūšanas veids padara CTLL-2 par ļoti piemērotu modeli, lai pētītu T-šūnu mediētās atbildes reakcijas uz vīrusu onkoģenēzi un audzēju imunoloģiju. Šai šūnu līnijai ir nepieciešama interleikīna-2 (IL-2) klātbūtne tās barotnē, lai tā izdzīvotu un proliferētu, tādējādi uzsverot tās lietderību citokīnu izraisītu šūnu procesu izpētē.

Imunoloģiskajos pētījumos CTLL-2 kalpo kā svarīgs instruments, lai pētītu dažādus T-šūnu funkcijas un citokīnu bioloģijas aspektus. Tās atkarība no IL-2 augšanai un uzturēšanai ir īpaši noderīga, lai pētītu šī citokīna aktivizētos signalizācijas ceļus, kā arī plašākas gēnu ekspresijas izmaiņas T šūnās, reaģējot uz ārējiem stimuliem. Turklāt CTLL-2 izmanto pētījumos, kas saistīti ar T-šūnu receptoru (TCR) aktivāciju, tādējādi gūstot ieskatu šūnu proliferācijā, apoptozē un citokīnu sekrēcijā. Pateicoties šīm īpašībām, CTLL-2 ir būtiska augstas izšķirtspējas skrīninga testos, kuru mērķis ir atklāt jaunus imūnmodulējošus līdzekļus, un IL-2 preparātu bioloģiskās aktivitātes testēšanā, kas ir ļoti svarīgi vēža imūnterapijā un autoimūno slimību ārstēšanā.

Audums
Asinis
Sinonīmi
  • CTLL 2
  • CTLL2
  • CTLL(2)

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Augšanas īpašības
Atsperes
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Vienas šūnas suspensija, apaļas, spīdošas šūnas
Šūnu tips
Limfoblasts
Kariotips
Nav norādīts

04Identifikatori

Atsauce
CTLL-2 (Cytion kataloga numurs 400482)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_0227

05Pazīmes un uzņēmība

Ekspresētie receptori
IL-2
Vīrusi
Veiktas pārbaudes un konstatēts negatīvs rezultāts attiecībā uz ektromēlijas vīrusu (peļu bakas) .

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
i2Cult (Mēs nepiegādājam šo produktu; lūdzu, apsveriet citus piegādātājus. Lūdzu, sazinieties ar mums, ja jums nepieciešama papildu palīdzība)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Pārstādīšana
Tūlīt pēc atkausēšanas, izmantojot Trypan Blue krāsas izslēgšanu, tika noteikts aptuveni 50 % dzīvotspējīgo šūnu. Šūnu dzīvotspēja ar laiku samazināsies līdz vēl zemākām vērtībām. Tomēr šūnu dzīvotspējai 48 stundu laikā jāpalielinās līdz > 80 %, ja šūnu koncentrācija ir aptuveni 1 miljons šūnu/ml. Subkulturējiet šūnas ar inokulācijas blīvumu 40000 šūnu/ml. Kontrolēt šūnu dzīvotspēju katru dienu. Glabāt šūnas 37 grādu temperatūrā un 5 %CO2.
Sēšanas blīvums
5 x 105 šūnas/ml
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Ļaujiet šūnām atgūties pēc sasaldēšanas procesa vismaz 48 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.