Siirry sisältöön
CTLL-2
Kudos
Veri
Synonyymit
CTLL 2, CTLL2, CTLL(2)

Asiakirjat

CTLL-2

Cell line · Tuotenumero 400482

CTLL-2, or cytotoxic T lymphocyte cell line-2, is an immortalized mouse cell line that originates from cytotoxic T cells. These cells were obtained throug...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

CTLL-2 eli sytotoksinen T-lymfosyyttisolulinja-2 on kuolematon hiiren solulinja, joka on peräisin sytotoksisista T-soluista. Nämä solut saatiin toistuvilla allogeenisilla sekoitetuilla kasvainlymfosyyttiviljelmillä (MTLC) C57BL/6-hiirten pernasoluista, jotka oli immunisoitu F4-5 Friend -viruksen (FLV) aiheuttamilla leukemiasoluilla. Tämä spesifinen johdannainen tekee CTLL-2:sta erittäin relevantin mallin, jolla voidaan tutkia T-solujen välittämiä vasteita viruksen aiheuttamaan onkogeneesiin ja kasvainten immunologiaan. Solulinja vaatii interleukiini-2:n (IL-2) läsnäoloa kasvatusympäristössään selviytyäkseen ja lisääntyäkseen, mikä korostaa sen hyödyllisyyttä sytokiinivetoisten soluprosessien tutkimisessa.

Immunologisessa tutkimuksessa CTLL-2 toimii kriittisenä välineenä T-solujen toiminnan ja sytokiinibiologian eri näkökohtien tutkimisessa. Sen riippuvuus IL-2:sta kasvun ja ylläpidon kannalta on erityisen hyödyllistä tutkittaessa tämän sytokiinin aktivoimia signalointireittejä sekä laajempia geeniekspressiomuutoksia T-soluissa, jotka reagoivat ulkoisiin ärsykkeisiin. Lisäksi CTLL-2:ta käytetään T-solureseptorin (TCR) aktivoitumiseen liittyvissä tutkimuksissa, jolloin saadaan tietoa solujen proliferaatiosta, apoptoosista ja sytokiinien erityksestä. Näiden ominaisuuksien ansiosta CTLL-2 on välttämätön uusien immunomoduloivien aineiden löytämiseen tähtäävissä korkean läpimenon seulontatesteissä sekä syövän immunoterapiassa ja autoimmuunisairauksien hoidossa keskeisessä asemassa olevien IL-2-muodostelmien biologisen aktiivisuuden testaamisessa.

Kudos
Veri
Synonyymit
  • CTLL 2
  • CTLL2
  • CTLL(2)

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Kasvuominaisuudet
Jousitus
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Yksittäinen solususpensio, pyöreät, kiiltävät solut
Solutyyppi
Lymfoblastit
Karyotyyppi
Ei määritelty

04Tunnisteet

Lähdeviite
CTLL-2 (Cytionin luettelonumero 400482)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_0227

05Ilmentyminen ja alttius

Ilmentyvät reseptorit
IL-2
Virukset
Testattu ja todettu negatiiviseksi ektromelia-viruksen (hiiren rokon) osalta .

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
i2Cult (Emme toimita tätä tuotetta; harkitse muita toimittajia.) Kerro meille, jos tarvitset lisäapua)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Soluviljely
Välittömästi sulatuksen jälkeen mitattiin noin 50 % elinkelpoisista soluista Trypan Blue -väriaineen poissulkemisen avulla. Solujen elinkelpoisuus laskee lopulta vieläkin alhaisempiin arvoihin. Solujen elinkelpoisuuden pitäisi kuitenkin nousta yli 80 prosenttiin 48 tunnin kuluessa, kun solupitoisuus on noin 1 miljoona solua/ml. Solut viljellään uudelleen inokulaatiotiheydellä 40000 solua/ml. Tarkasta solujen elinkelpoisuus päivittäin. Pidä solut 37 asteen lämpötilassa ja 5 %CO2:ssa.
Kylvötiheys
5 x 105 solua/ml
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Anna solujen palautua pakastuksesta vähintään 48 tuntia.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.