HCC366

HCC366 es una línea celular de carcinoma adenoescamoso pulmonar humano establecida a partir del derrame pleural maligno de una paciente europea de 80 años en el Centro Oncológico Hamon, del Centro Médico UT Southwestern. El carcinoma adenoescamoso es un subtipo histológico mixto poco común de cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) que combina características tanto del adenocarcinoma como del carcinoma de células escamosas. La línea HCC366 está incluida en los paneles del Mapa de Dependencia del Cáncer (DepMap), CCLE, líneas celulares COSMIC y el Proyecto de Líneas Celulares del MD Anderson. La línea presenta una mutación homocigótica en TP53 p.Tyr220Cys (una mutación estructural del dominio de unión al ADN) y una mutación heterocigótica en ATM p.Pro534Ala. No presenta mutaciones impulsoras en KRAS, EGFR ni STK11, y muestra estabilidad de microsatélites (MSS). El tiempo de duplicación es de aproximadamente 60 a 70 horas.

La línea HCC366 es aplicable en la investigación del cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC), particularmente en estudios sobre la biología del carcinoma adenoescamoso de pulmón, que sigue siendo poco estudiada en comparación con los subtipos de adenocarcinoma puro o carcinoma de células escamosas. Las aplicaciones clave incluyen: estudios de mutaciones de ganancia de función en TP53; respuesta al daño en el ADN mediada por ATM; pruebas de sensibilidad y resistencia a la quimioterapia (cisplatino, paclitaxel, gemcitabina); evaluación de agentes dirigidos; perfiles de sensibilidad a fármacos en los marcos DepMap y CCLE; descubrimiento de biomarcadores para el CPNM de histología mixta; genómica comparativa; y perfiles proteómicos y transcriptómicos. La línea celular HCC366 también ha contribuido a estudios sobre la biología celular del cáncer de pulmón, incluyendo los mecanismos de proliferación, migración e invasión relevantes para la enfermedad pleural maligna.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.