Skip to content
HCC366
Tissue
ריאה
Disease
סרטן ריאות תאים לא קטנים
Metastatic site
הצטברות נוזל פלאורלי ממאיר (אתר לקיחת הדגימה)
Synonyms
HCC-366, HCC0366, Hamon Cancer Center 366

Documents

HCC366

Cell line · Product number 302155

HCC366 is a human lung adenosquamous carcinoma cell line established from the malignant pleural effusion of an 80-year-old European female patient at the ...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

HCC366 הוא קו תאים של קרצינומה אדנו-סקוואמוסית של הריאה האנושית, שהופק מהצטברות נוזל פלאורלי ממאיר של מטופלת אירופית בת 80 במרכז הסרטן "המון" (Hamon Cancer Center), במרכז הרפואי UT Southwestern. קרצינומה אדנוסקוואמוסית היא תת-סוג היסטולוגי מעורב נדיר של סרטן ריאה שאינו קטן-תאי (NSCLC), המשלב מאפיינים של אדנוקרצינומה ושל קרצינומה של תאי קשקש. HCC366 נכלל בפאנלים של Cancer Dependency Map (DepMap), CCLE, קווי תאים COSMIC, ו-MD Anderson Cell Lines Project. הקו נושא מוטציה הומוזיגוטית TP53 p.Tyr220Cys (מוטציה מבנית של תחום קישור ה-DNA) ומוטציה הטרוזיגוטית ATM p.Pro534Ala. הוא אינו נושא מוטציות מדרבנות ב-KRAS, EGFR או STK11, ומפגין יציבות מיקרו-סאטליטית (MSS). זמן הכפלה הוא כ-60–70 שעות.

HCC366 מתאים למחקר בנושא NSCLC, ובפרט למחקרים העוסקים בביולוגיה של קרצינומה אדנוסקוואמוטית של הריאה, תחום שעדיין לא נחקר מספיק בהשוואה לתתי-סוגים של אדנוקרצינומה טהורה או קרצינומה של תאי קשקש. היישומים העיקריים כוללים: מחקרים על מוטציות של רווח תפקוד ב-TP53; תגובה לנזק ב-DNA בתיווך ATM; בדיקות רגישות ועמידות לכימותרפיה (ציספלטין, פקליטקסל, גמציטאבין); הערכת תרופות ממוקדות; פרופיל רגישות לתרופות במסגרת DepMap ו-CCLE; גילוי סמנים ביולוגיים ל-NSCLC בהיסטולוגיה מעורבת; גנומיקה השוואתית; ופרופיל פרוטאומי/טרנסקריפטומי. HCC366 תרם גם למחקרים בתחום הביולוגיה התאית של סרטן הריאה, לרבות מנגנוני התרבות, נדידה ופלישה הרלוונטיים למחלות פלאורליות ממאירות.

Tissue
ריאה
Disease
סרטן ריאות תאים לא קטנים
Metastatic site
הצטברות נוזל פלאורלי ממאיר (אתר לקיחת הדגימה)
Applications
מחקר בנושא NSCLC; הביולוגיה של קרצינומה אדנוסקוואמוסית של הריאה; מחקרים על רווח תפקוד של TP53 p.Tyr220Cys; תגובת ATM לנזק ב-DNA; רגישות לכימותרפיה (ציספלטין, פקליטקסל, גמציטאבין); פרופיל רגישות לתרופות באמצעות DepMap/CCLE; גילוי סמנים ביולוגיים; גנומיקה השוואתית של NSCLC; ביולוגיה של מחלות פלאורליות ממאירות
Synonyms
  • HCC-366
  • HCC0366
  • Hamon Cancer Center 366

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype NSCLC cell line with endogenous somatic mutations (TP53 p.Tyr220Cys homozygous; ATM p.Pro534Ala heterozygous)
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Cell type
תאי אפיתל
MSI status
MSS
Doubling time
כ-60 עד 70 שעות

04Identifiers

Citation
HCC366 (מספר קטלוגי Cytion 302155)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2059

05Expression and susceptibility

Mutational profile
TP53 p.Tyr220Cys (c.659A>G) הומוזיגוטי; ATM p.Pro534Ala (c.1600C>G) הטרוזיגוטי

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS מנוטרל בחום
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Split ratio
1 עד 5
Seeding density
1 עד 3 × 10⁴ תאים/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, יש להניח את התאים בצפיפות של 5 × 10⁴ תאים/סמ"ר ולהמתין לפחות 24 שעות עד שהן ייקלטו לפני החלפת התווך הראשונה.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
80 שנים
Ethnicity
אירופאי