HCC366

A HCC366 é uma linhagem celular de carcinoma adenoescamoso pulmonar humano, isolada a partir do derrame pleural maligno de uma paciente europeia de 80 anos no Hamon Cancer Center, do UT Southwestern Medical Center. O carcinoma adenoescamoso é um subtipo histológico misto raro do câncer de pulmão de células não pequenas (NSCLC), que combina características tanto do adenocarcinoma quanto do carcinoma de células escamosas. A HCC366 está incluída nos painéis do Cancer Dependency Map (DepMap), CCLE, linhas celulares COSMIC e no MD Anderson Cell Lines Project. A linhagem apresenta uma mutação homozigótica TP53 p.Tyr220Cys (uma mutação estrutural do domínio de ligação ao DNA) e uma mutação heterozigótica ATM p.Pro534Ala. Ela não apresenta mutações impulsionadoras em KRAS, EGFR ou STK11 e exibe estabilidade de microssatélites (MSS). O tempo de duplicação é de aproximadamente 60 a 70 horas.

A HCC366 é aplicável em pesquisas sobre NSCLC, particularmente em estudos da biologia do carcinoma adenoescamoso de pulmão, que ainda é pouco estudado em comparação com os subtipos de adenocarcinoma puro ou carcinoma de células escamosas. As principais aplicações incluem: estudos de mutações de ganho de função do TP53; resposta a danos no DNA mediada por ATM; testes de sensibilidade e resistência à quimioterapia (cisplatina, paclitaxel, gemcitabina); avaliação de agentes direcionados; perfil de sensibilidade a medicamentos nas estruturas DepMap e CCLE; descoberta de biomarcadores para NSCLC de histologia mista; genômica comparativa; e perfil proteômico/transcriptômico. A linha celular HCC366 também contribuiu para estudos da biologia celular do câncer de pulmão, incluindo mecanismos de proliferação, migração e invasão relevantes para a doença pleural maligna.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.