
- Tissue
- 肺
- Disease
- 非小細胞肺癌
- Metastatic site
- 惡性胸腔積液(樣本採集部位)
- Synonyms
- HCC-366, HCC0366, Hamon Cancer Center 366
Documents
HCC366
Cell line · Product number 302155
HCC366 is a human lung adenosquamous carcinoma cell line established from the malignant pleural effusion of an 80-year-old European female patient at the ...
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01General information
- Description
HCC366 是一種人類肺腺鱗狀細胞癌細胞系,由德克薩斯大學西南醫學中心哈蒙癌症中心(Hamon Cancer Center, UT Southwestern Medical Center)從一名 80 歲歐洲女性患者的惡性胸腔積液中建立。 腺鱗狀細胞癌是非小細胞肺癌(NSCLC)中一種罕見的混合組織學亞型,兼具腺癌與鱗狀細胞癌的特徵。 HCC366 已被納入「癌症依賴性地圖」(DepMap)、CCLE、COSMIC 細胞系以及 MD Anderson 細胞系計畫的檢測面板中。 該細胞系攜帶純合子 TP53 p.Tyr220Cys 突變(DNA 結合域的結構突變)以及雜合子 ATM p.Pro534Ala 突變。 該細胞系未攜帶 KRAS、EGFR 或 STK11 驅動突變,且表現出微衛星穩定性(MSS)。倍增時間約為 60–70 小時。
HCC366 適用於非小細胞肺癌(NSCLC)研究,特別是針對肺腺鱗癌生物學的研究——相較於純腺癌或鱗狀細胞癌亞型,此類研究目前仍相對不足。主要應用包括:TP53 功能獲得性突變研究; ATM 介導的 DNA 損傷反應;化療敏感性與抗藥性檢測(順鉑、紫杉醇、吉西他濱);標靶藥物評估;在 DepMap 和 CCLE 框架下的藥物敏感性分析;混合組織學非小細胞肺癌(NSCLC)的生物標記物發現;比較基因組學;以及蛋白質組學/轉錄組學分析。 HCC366 亦為肺癌細胞生物學研究作出貢獻,包括與惡性胸膜疾病相關的增殖、遷移及侵襲機制。
- Tissue
- 肺
- Disease
- 非小細胞肺癌
- Metastatic site
- 惡性胸腔積液(樣本採集部位)
- Applications
- 非小細胞肺癌(NSCLC)研究;肺腺鱗狀細胞癌生物學;TP53 p.Tyr220Cys 功能獲得性研究;ATM DNA 損傷應答;化療敏感性(順鉑、紫杉醇、吉西他濱); DepMap/CCLE 藥物敏感性分析;生物標記物發現;非小細胞肺癌(NSCLC)比較基因組學;惡性胸膜疾病生物學
- Synonyms
- HCC-366
- HCC0366
- Hamon Cancer Center 366
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- Non-GMO
- GMO status details
- No genetic modification; wildtype NSCLC cell line with endogenous somatic mutations (TP53 p.Tyr220Cys homozygous; ATM p.Pro534Ala heterozygous)
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮樣
- Cell type
- 上皮細胞
- MSI status
- MSS
- Doubling time
- 約 60 至 70 小時
04Identifiers
- Citation
- HCC366(Cytion 型號 302155)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2059
05Expression and susceptibility
- Mutational profile
- TP53 p.Tyr220Cys (c.659A>G) 純合子;ATM p.Pro534Ala (c.1600C>G) 雜合子
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640,含 2.0 mM 穩定谷氨醯胺,含 2.0 g/L NaHCO₃(Cytion 產品編號 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C,5% CO₂,加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% 經熱滅活的胎牛血清
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Split ratio
- 1 至 5
- Seeding density
- 1 至 3 × 10⁴ 個細胞/cm²
- Fluid renewal
- 每週 2 至 3 次
- Post-thaw recovery
- 解凍後,將細胞以 5 × 10⁴ 個細胞/cm² 的密度接種至培養皿中,並在進行首次培養基更換前,讓細胞附著至少 24 小時。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
08Donor
- Donor age
- 80年
- Ethnicity
- 歐洲的
09Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍,必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服,且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時,必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險,此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion,我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證,自本公司設施出貨後 60 天內,我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及/或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes