Skip to content
HCC366
Tissue
ปอด
Disease
มะเร็งปอดชนิดไม่ใช่เซลล์เล็ก
Metastatic site
น้ำในช่องเยื่อหุ้มปอดชนิดร้าย (ตำแหน่งที่เก็บตัวอย่าง)
Synonyms
HCC-366, HCC0366, Hamon Cancer Center 366

Documents

HCC366

Cell line · Product number 302155

HCC366 is a human lung adenosquamous carcinoma cell line established from the malignant pleural effusion of an 80-year-old European female patient at the ...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

HCC366 เป็นสายเซลล์มะเร็งปอดชนิดอะดีโนสความัสของมนุษย์ ที่ถูกสร้างขึ้นจากน้ำในช่องเยื่อหุ้มปอดที่เป็นมะเร็งของผู้ป่วยหญิงชาวยุโรปอายุ 80 ปี ที่ศูนย์มะเร็งฮามอน (Hamon Cancer Center) ศูนย์การแพทย์ UT Southwestern Medical Center มะเร็งอะดีโนสความัสเป็นชนิดย่อยทางเนื้อเยื่อวิทยาแบบผสมที่พบได้น้อยของมะเร็งปอดเซลล์ไม่เล็ก (NSCLC) ซึ่งรวมลักษณะของทั้งมะเร็งอะดีโนคาร์ซิโนมาและมะเร็งเซลล์สความัส HCC366 ถูกรวมอยู่ในชุดข้อมูล Cancer Dependency Map (DepMap), CCLE, COSMIC cell lines และ MD Anderson Cell Lines Project panels. สายเซลล์นี้มีการกลายพันธุ์แบบโฮโมไซกัสของ TP53 p.Tyr220Cys (การกลายพันธุ์เชิงโครงสร้างของโดเมนจับ DNA) และการกลายพันธุ์แบบเฮเทอโรไซกัสของ ATM p.Pro534Ala สายเซลล์นี้ไม่มีการกลายพันธุ์ตัวขับเคลื่อน KRAS, EGFR หรือ STK11 และแสดงถึงความเสถียรของไมโครแซทเทลไลต์ (MSS) เวลาเพิ่มจำนวนเซลล์ประมาณ 60–70 ชั่วโมง

HCC366 สามารถนำไปใช้ในวิจัย NSCLC ได้ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการศึกษาชีววิทยาของมะเร็งปอดชนิดอะเดโนสความัส ซึ่งยังได้รับการศึกษาน้อยเมื่อเทียบกับชนิดย่อยของมะเร็งอะเดโนคาร์ซิโนมาหรือมะเร็งเซลล์สความัสแบบบริสุทธิ์ การประยุกต์ใช้หลัก ได้แก่: การศึกษาการกลายพันธุ์ที่ทำให้ TP53 มีหน้าที่เพิ่มขึ้น; การตอบสนองต่อความเสียหายของ DNA ที่ถูกควบคุมโดย ATM; การทดสอบความไวและความต้านทานต่อเคมีบำบัด (cisplatin, paclitaxel, gemcitabine); การประเมินประสิทธิภาพของยาเป้าหมาย; การวิเคราะห์โปรไฟล์ความไวต่อยาภายในกรอบ DepMap และ CCLE; การค้นพบไบโอมาร์คเกอร์สำหรับ NSCLC ที่มีโครงสร้างเนื้อเยื่อผสม; จีโนมิกส์เปรียบเทียบ; และการวิเคราะห์โปรไฟล์โปรตีโอมิกส์/ทรานสคริปโตมิกส์ HCC366 ยังมีส่วนร่วมในการศึกษาชีววิทยาของเซลล์มะเร็งปอด รวมถึงกลไกการเพิ่มจำนวน การเคลื่อนที่ และการรุกรานที่เกี่ยวข้องกับโรคเยื่อหุ้มปอดชนิดร้าย

Tissue
ปอด
Disease
มะเร็งปอดชนิดไม่ใช่เซลล์เล็ก
Metastatic site
น้ำในช่องเยื่อหุ้มปอดชนิดร้าย (ตำแหน่งที่เก็บตัวอย่าง)
Applications
การวิจัย NSCLC; ชีววิทยาของมะเร็งปอดชนิดอะดีโนสควอมัส; การศึกษาการทำงานเพิ่มขึ้นของ TP53 p.Tyr220Cys; การตอบสนองต่อความเสียหายของ DNA โดย ATM; ความไวต่อเคมีบำบัด (cisplatin, paclitaxel, gemcitabine); การวิเคราะห์ความไวต่อยา DepMap/CCLE; การค้นพบตัวบ่งชี้ทางชีวภาพ; ชีววิทยาระดับจีโนมเปรียบเทียบของ NSCLC; ชีววิทยาของโรคเยื่อหุ้มปอดมะเร็ง
Synonyms
  • HCC-366
  • HCC0366
  • Hamon Cancer Center 366

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype NSCLC cell line with endogenous somatic mutations (TP53 p.Tyr220Cys homozygous; ATM p.Pro534Ala heterozygous)
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Cell type
เซลล์เยื่อบุผิว
MSI status
เอ็มเอสเอส
Doubling time
ประมาณ 60 ถึง 70 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
HCC366 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 302155)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2059

05Expression and susceptibility

Mutational profile
TP53 p.Tyr220Cys (c.659A>G) ชนิดโฮโมไซโกต; ATM p.Pro534Ala (c.1600C>G) ชนิดเฮเทอโรไซโกต

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS ที่ทำให้ไม่ทำงานทางชีวภาพด้วยความร้อน 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Split ratio
1 ถึง 5
Seeding density
1 ถึง 3 × 10⁴ เซลล์/ตารางเซนติเมตร
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเลี้ยงเซลล์บนจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 × 10⁴ เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ยึดเกาะอย่างน้อย 24 ชั่วโมงก่อนเปลี่ยนอาหารเลี้ยงเซลล์ครั้งแรก
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
80 ปี
Ethnicity
ยุโรป