
- Tissue
- ปอด
- Disease
- มะเร็งปอดชนิดไม่ใช่เซลล์เล็ก
- Metastatic site
- น้ำในช่องเยื่อหุ้มปอดชนิดร้าย (ตำแหน่งที่เก็บตัวอย่าง)
- Synonyms
- HCC-366, HCC0366, Hamon Cancer Center 366
Documents
HCC366
Cell line · Product number 302155
HCC366 is a human lung adenosquamous carcinoma cell line established from the malignant pleural effusion of an 80-year-old European female patient at the ...
Customization / Recommendations
- HCC366Cell line€430.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
HCC366 เป็นสายเซลล์มะเร็งปอดชนิดอะดีโนสความัสของมนุษย์ ที่ถูกสร้างขึ้นจากน้ำในช่องเยื่อหุ้มปอดที่เป็นมะเร็งของผู้ป่วยหญิงชาวยุโรปอายุ 80 ปี ที่ศูนย์มะเร็งฮามอน (Hamon Cancer Center) ศูนย์การแพทย์ UT Southwestern Medical Center มะเร็งอะดีโนสความัสเป็นชนิดย่อยทางเนื้อเยื่อวิทยาแบบผสมที่พบได้น้อยของมะเร็งปอดเซลล์ไม่เล็ก (NSCLC) ซึ่งรวมลักษณะของทั้งมะเร็งอะดีโนคาร์ซิโนมาและมะเร็งเซลล์สความัส HCC366 ถูกรวมอยู่ในชุดข้อมูล Cancer Dependency Map (DepMap), CCLE, COSMIC cell lines และ MD Anderson Cell Lines Project panels. สายเซลล์นี้มีการกลายพันธุ์แบบโฮโมไซกัสของ TP53 p.Tyr220Cys (การกลายพันธุ์เชิงโครงสร้างของโดเมนจับ DNA) และการกลายพันธุ์แบบเฮเทอโรไซกัสของ ATM p.Pro534Ala สายเซลล์นี้ไม่มีการกลายพันธุ์ตัวขับเคลื่อน KRAS, EGFR หรือ STK11 และแสดงถึงความเสถียรของไมโครแซทเทลไลต์ (MSS) เวลาเพิ่มจำนวนเซลล์ประมาณ 60–70 ชั่วโมง
HCC366 สามารถนำไปใช้ในวิจัย NSCLC ได้ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการศึกษาชีววิทยาของมะเร็งปอดชนิดอะเดโนสความัส ซึ่งยังได้รับการศึกษาน้อยเมื่อเทียบกับชนิดย่อยของมะเร็งอะเดโนคาร์ซิโนมาหรือมะเร็งเซลล์สความัสแบบบริสุทธิ์ การประยุกต์ใช้หลัก ได้แก่: การศึกษาการกลายพันธุ์ที่ทำให้ TP53 มีหน้าที่เพิ่มขึ้น; การตอบสนองต่อความเสียหายของ DNA ที่ถูกควบคุมโดย ATM; การทดสอบความไวและความต้านทานต่อเคมีบำบัด (cisplatin, paclitaxel, gemcitabine); การประเมินประสิทธิภาพของยาเป้าหมาย; การวิเคราะห์โปรไฟล์ความไวต่อยาภายในกรอบ DepMap และ CCLE; การค้นพบไบโอมาร์คเกอร์สำหรับ NSCLC ที่มีโครงสร้างเนื้อเยื่อผสม; จีโนมิกส์เปรียบเทียบ; และการวิเคราะห์โปรไฟล์โปรตีโอมิกส์/ทรานสคริปโตมิกส์ HCC366 ยังมีส่วนร่วมในการศึกษาชีววิทยาของเซลล์มะเร็งปอด รวมถึงกลไกการเพิ่มจำนวน การเคลื่อนที่ และการรุกรานที่เกี่ยวข้องกับโรคเยื่อหุ้มปอดชนิดร้าย
- Tissue
- ปอด
- Disease
- มะเร็งปอดชนิดไม่ใช่เซลล์เล็ก
- Metastatic site
- น้ำในช่องเยื่อหุ้มปอดชนิดร้าย (ตำแหน่งที่เก็บตัวอย่าง)
- Applications
- การวิจัย NSCLC; ชีววิทยาของมะเร็งปอดชนิดอะดีโนสควอมัส; การศึกษาการทำงานเพิ่มขึ้นของ TP53 p.Tyr220Cys; การตอบสนองต่อความเสียหายของ DNA โดย ATM; ความไวต่อเคมีบำบัด (cisplatin, paclitaxel, gemcitabine); การวิเคราะห์ความไวต่อยา DepMap/CCLE; การค้นพบตัวบ่งชี้ทางชีวภาพ; ชีววิทยาระดับจีโนมเปรียบเทียบของ NSCLC; ชีววิทยาของโรคเยื่อหุ้มปอดมะเร็ง
- Synonyms
- HCC-366
- HCC0366
- Hamon Cancer Center 366
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- Non-GMO
- GMO status details
- No genetic modification; wildtype NSCLC cell line with endogenous somatic mutations (TP53 p.Tyr220Cys homozygous; ATM p.Pro534Ala heterozygous)
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
- Cell type
- เซลล์เยื่อบุผิว
- MSI status
- เอ็มเอสเอส
- Doubling time
- ประมาณ 60 ถึง 70 ชั่วโมง
04Identifiers
- Citation
- HCC366 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 302155)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2059
05Expression and susceptibility
- Mutational profile
- TP53 p.Tyr220Cys (c.659A>G) ชนิดโฮโมไซโกต; ATM p.Pro534Ala (c.1600C>G) ชนิดเฮเทอโรไซโกต
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น
- Supplements
- เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS ที่ทำให้ไม่ทำงานทางชีวภาพด้วยความร้อน 10%
- Dissociation reagent
- แอคคูเทส
- Subculturing
- นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
- Split ratio
- 1 ถึง 5
- Seeding density
- 1 ถึง 3 × 10⁴ เซลล์/ตารางเซนติเมตร
- Fluid renewal
- 2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
- Post-thaw recovery
- หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเลี้ยงเซลล์บนจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 × 10⁴ เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ยึดเกาะอย่างน้อย 24 ชั่วโมงก่อนเปลี่ยนอาหารเลี้ยงเซลล์ครั้งแรก
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง
เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน
- Freeze medium
- ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
- Storage conditions
สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น
- Shipping conditions
เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
08Donor
- Donor age
- 80 ปี
- Ethnicity
- ยุโรป
09Legal and safety
- Safety precautions
- เมื่อวางแผนที่จะเก็บขวดแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวเพื่อการละลายในอนาคต จำเป็นต้องปฏิบัติตามมาตรการความปลอดภัยอย่างเคร่งครัด การสวมถุงมือป้องกันและเสื้อผ้าที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็น และต้องใช้หน้ากากหรือแว่นตานิรภัยในระหว่างการถ่ายโอนตัวอย่างแช่แข็งไปยังหรือจากถังไนโตรเจนเหลว ทั้งนี้เพื่อลดความเสี่ยงจากการบาดเจ็บที่อาจเกิดจากการระเบิดของขวดแช่แข็งเมื่อนำออก ซึ่งอาจทำให้เศษแหลมคมกระเด็นออกมาได้
- Warranty
ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์
สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.
- Material Transfer Agreement required
- Yes