HCC366

La lignée cellulaire HCC366 est une lignée de carcinome adénosquameux pulmonaire humain établie à partir de l’épanchement pleural malin d’une patiente européenne âgée de 80 ans au Hamon Cancer Center, du Centre médical UT Southwestern. Le carcinome adénosquameux est un sous-type histologique mixte rare de cancer du poumon à cellules non petites (CPNCP) combinant les caractéristiques de l’adénocarcinome et du carcinome épidermoïde. La lignée HCC366 fait partie des panels de la Cancer Dependency Map (DepMap), du CCLE, des lignées cellulaires COSMIC et du projet de lignées cellulaires du MD Anderson. Cette lignée porte une mutation homozygote TP53 p.Tyr220Cys (une mutation structurelle du domaine de liaison à l’ADN) et une mutation hétérozygote ATM p.Pro534Ala. Elle ne porte pas de mutations motrices KRAS, EGFR ou STK11 et présente une stabilité microsatellitaire (MSS). Son temps de doublement est d’environ 60 à 70 heures.

La lignée HCC366 est utile dans la recherche sur le cancer du poumon non à petites cellules (CPNPC), en particulier dans les études sur la biologie du carcinome adénosquameux du poumon, qui reste peu étudiée par rapport aux sous-types d’adénocarcinome pur ou de carcinome épidermoïde. Les principales applications comprennent : les études sur les mutations à gain de fonction du gène TP53; la réponse aux dommages à l’ADN médiée par l’ATM; les tests de sensibilité et de résistance à la chimiothérapie (cisplatine, paclitaxel, gemcitabine); l’évaluation d’agents ciblés; le profilage de la sensibilité aux médicaments dans les cadres DepMap et CCLE; la découverte de biomarqueurs pour le CPNPC à histologie mixte; la génomique comparative; et le profilage protéomique et transcriptomique. La lignée HCC366 a également contribué à des études sur la biologie cellulaire du cancer du poumon, notamment les mécanismes de prolifération, de migration et d’invasion liés aux maladies pleurales malignes.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.