Skip to content
HCC366
Tissue
Phổi
Disease
Ung thư phổi không phải tế bào nhỏ
Metastatic site
Tràn dịch màng phổi ác tính (vị trí lấy mẫu)
Synonyms
HCC-366, HCC0366, Hamon Cancer Center 366

Documents

HCC366

Cell line · Product number 302155

HCC366 is a human lung adenosquamous carcinoma cell line established from the malignant pleural effusion of an 80-year-old European female patient at the ...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

HCC366 là dòng tế bào ung thư biểu mô tuyến-vảy phổi ở người, được phân lập từ dịch màng phổi ác tính của một bệnh nhân nữ người châu Âu 80 tuổi tại Trung tâm Ung thư Hamon, Trung tâm Y tế UT Southwestern. Ung thư biểu mô tuyến-vảy là một thể mô học hỗn hợp hiếm gặp của ung thư phổi không tế bào nhỏ (NSCLC), kết hợp các đặc điểm của cả ung thư biểu mô tuyến và ung thư biểu mô vảy. HCC366 được bao gồm trong các bảng dữ liệu của Cancer Dependency Map (DepMap), CCLE, COSMIC và Dự án Dòng tế bào MD Anderson. Dòng tế bào này mang đột biến đồng hợp tử TP53 p.Tyr220Cys (một đột biến cấu trúc của miền liên kết DNA) và đột biến dị hợp tử ATM p.Pro534Ala. Dòng tế bào này không mang các đột biến điều khiển KRAS, EGFR hoặc STK11, và thể hiện tính ổn định microsatellite (MSS). Thời gian nhân đôi khoảng 60–70 giờ.

HCC366 có thể được ứng dụng trong nghiên cứu ung thư phổi không tế bào nhỏ (NSCLC), đặc biệt là trong các nghiên cứu về sinh học của ung thư phổi dạng adenosquamous, vốn vẫn chưa được nghiên cứu đầy đủ so với các thể thuần túy như ung thư biểu mô tuyến hoặc ung thư biểu mô vảy. Các ứng dụng chính bao gồm: nghiên cứu đột biến tăng chức năng TP53; phản ứng tổn thương DNA qua trung gian ATM; thử nghiệm độ nhạy và kháng hóa trị (cisplatin, paclitaxel, gemcitabine); đánh giá các tác nhân nhắm mục tiêu; lập hồ sơ độ nhạy thuốc trong các khung DepMap và CCLE; phát hiện dấu ấn sinh học cho ung thư phổi không tế bào nhỏ (NSCLC) có mô học hỗn hợp; so sánh di truyền học; và lập hồ sơ proteomic/transcriptomic. HCC366 cũng đã đóng góp vào các nghiên cứu về sinh học tế bào ung thư phổi, bao gồm các cơ chế tăng sinh, di chuyển và xâm lấn liên quan đến bệnh màng phổi ác tính.

Tissue
Phổi
Disease
Ung thư phổi không phải tế bào nhỏ
Metastatic site
Tràn dịch màng phổi ác tính (vị trí lấy mẫu)
Applications
Nghiên cứu ung thư phổi không tế bào nhỏ (NSCLC); sinh học của ung thư biểu mô tuyến-vảy phổi; các nghiên cứu về sự tăng chức năng của đột biến TP53 p.Tyr220Cys; phản ứng của ATM đối với tổn thương DNA; độ nhạy cảm với hóa trị (cisplatin, paclitaxel, gemcitabine); Phân tích hồ sơ độ nhạy cảm với thuốc bằng DepMap/CCLE; phát hiện dấu ấn sinh học; so sánh di truyền học ung thư phổi không tế bào nhỏ (NSCLC); sinh học bệnh lý màng phổi ác tính
Synonyms
  • HCC-366
  • HCC0366
  • Hamon Cancer Center 366

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype NSCLC cell line with endogenous somatic mutations (TP53 p.Tyr220Cys homozygous; ATM p.Pro534Ala heterozygous)
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tương tự biểu mô
Cell type
Tế bào biểu mô
MSI status
MSS
Doubling time
khoảng 60 đến 70 giờ

04Identifiers

Citation
HCC366 (Số catalog Cytion 302155)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2059

05Expression and susceptibility

Mutational profile
TP53 p.Tyr220Cys (c.659A>G) đồng hợp tử; ATM p.Pro534Ala (c.1600C>G) dị hợp tử

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, chứa: 2,0 mM glutamine ổn định, chứa: 2,0 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung vào môi trường nuôi cấy 10% huyết thanh bò đã được khử hoạt tính bằng nhiệt
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Split ratio
1 đến 5
Seeding density
1 đến 3 × 10⁴ tế bào/cm²
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Post-thaw recovery
Sau khi rã đông, cấy tế bào với mật độ 5 × 10⁴ tế bào/cm² và để tế bào bám dính ít nhất 24 giờ trước khi thay môi trường nuôi cấy lần đầu tiên.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
80 năm
Ethnicity
Châu Âu