LN229

La LN229 es una línea celular de glioblastoma humano derivada de una paciente de raza blanca de 60 años con glioblastoma multiforme (GBM), específicamente de la corteza frontal-parieto-occipital derecha. El glioblastoma es una de las formas más agresivas y letales de cáncer cerebral, y las células LN229 se utilizan ampliamente en la investigación para comprender los fundamentos moleculares de la enfermedad y desarrollar posibles estrategias terapéuticas. Las células presentan una morfología de tipo epitelial y muestran propiedades de crecimiento adherente, lo que las hace ideales para estudios in vitro. Dado su alto potencial tumorigénico, forman tumores fácilmente cuando se inyectan en ratones desnudos, lo que las convierte en un modelo robusto para la investigación del cáncer.

Una de las características fundamentales de las células LN229 es la presencia de un gen p53 (TP53) mutado, con una mutación específica de CCT (Pro) a CTT (Leu) en el codón 98. Esta mutación contribuye significativamente al comportamiento agresivo de la línea celular y a su resistencia a la apoptosis. Además, las células LN229 tienen un gen PTEN de tipo silvestre, pero presentan deleciones homocigóticas en los genes supresores de tumores p16 y p14ARF, que son reguladores vitales del ciclo celular y la apoptosis. Estas alteraciones genéticas convierten a la LN229 en un modelo valioso para estudiar el impacto de estas mutaciones en la biología tumoral y la resistencia terapéutica.

Las células LN229 son particularmente útiles en estudios de apoptosis. Sufren apoptosis tras la estimulación con el ligando de Fas, y la muerte celular ocurre en un plazo de 16 horas. Curiosamente, si bien la expresión de Bcl-2 puede proteger a las células LN229 de la apoptosis inducida por el ligando de Fas, solo ofrece una protección limitada contra la apoptosis inducida por la puromicina, un inhibidor de la síntesis proteica. Este patrón de resistencia selectiva convierte a las células LN229 en un modelo fundamental para comprender los mecanismos moleculares de la apoptosis en el glioblastoma y para evaluar posibles terapias moduladoras de la apoptosis. Al igual que con todos los modelos de investigación in vitro, las células LN229 no son adecuadas para aplicaciones terapéuticas o in vivo.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.