LN229

La LN229 est une lignée cellulaire de glioblastome humain dérivée d’une patiente blanche âgée de 60 ans atteinte d’un glioblastome multiforme (GBM), plus précisément du cortex frontal-pariéto-occipital droit. Le glioblastome est l’une des formes les plus agressives et les plus mortelles de cancer du cerveau, et les cellules LN229 sont largement utilisées dans la recherche pour comprendre les mécanismes moléculaires sous-jacents de la maladie et pour développer des stratégies thérapeutiques potentielles. Ces cellules présentent une morphologie de type épithélial et des propriétés de croissance adhérente, ce qui les rend idéales pour les études in vitro. Compte tenu de leur fort potentiel tumorigène, elles forment facilement des tumeurs lorsqu’elles sont injectées à des souris nues, ce qui en fait un modèle robuste pour la recherche sur le cancer.

L’une des caractéristiques essentielles des cellules LN229 est la présence d’un gène p53 (TP53) muté, présentant une mutation spécifique de CCT (Pro) en CTT (Leu) au codon 98. Cette mutation contribue de manière significative au comportement agressif de la lignée cellulaire et à sa résistance à l’apoptose. De plus, les cellules LN229 possèdent un gène PTEN de type sauvage, mais présentent des délétions homozygotes dans les gènes suppresseurs de tumeurs p16 et p14ARF, qui sont des régulateurs essentiels du cycle cellulaire et de l’apoptose. Ces altérations génétiques font de la LN229 un modèle précieux pour étudier l’impact de ces mutations sur la biologie tumorale et la résistance thérapeutique.

Les cellules LN229 sont particulièrement utiles dans les études sur l’apoptose. Elles subissent l’apoptose lorsqu’elles sont stimulées par le ligand de Fas, la mort cellulaire survenant dans les 16 heures. Il est intéressant de noter que, bien que l’expression de Bcl-2 puisse protéger les cellules LN229 de l’apoptose induite par le ligand de Fas, elle n’offre qu’une protection limitée contre l’apoptose induite par la puromycine, un inhibiteur de la synthèse protéique. Ce profil de résistance sélective fait des cellules LN229 un modèle essentiel pour comprendre les mécanismes moléculaires de l’apoptose dans le glioblastome et pour tester des thérapies potentielles modulant l’apoptose. Comme pour tous les modèles de recherche in vitro, les cellules LN229 ne conviennent pas à des applications thérapeutiques ou in vivo.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.