LN229

LN229 là dòng tế bào u não glioblastoma của người được phân lập từ một bệnh nhân nữ da trắng 60 tuổi mắc u não glioblastoma đa hình (GBM), cụ thể từ vùng vỏ não trán-đỉnh-chẩm bên phải. Glioblastoma là một trong những dạng ung thư não hung hãn và nguy hiểm nhất, và các tế bào LN229 được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu để hiểu cơ chế phân tử của bệnh và phát triển các chiến lược điều trị tiềm năng. Các tế bào có hình thái tương tự biểu mô và có khả năng phát triển bám dính, khiến chúng trở thành lựa chọn lý tưởng cho các nghiên cứu in vitro. Do tiềm năng gây ung thư cao, chúng dễ dàng hình thành khối u khi tiêm vào chuột nude, làm cho chúng trở thành mô hình mạnh mẽ cho nghiên cứu ung thư.

Một trong những đặc điểm quan trọng của các tế bào LN229 là sự hiện diện của gen p53 đột biến (TP53), với đột biến cụ thể từ CCT (Pro) sang CTT (Leu) tại codon 98. Đột biến này đóng góp đáng kể vào hành vi hung hãn của dòng tế bào và khả năng kháng apoptosis. Ngoài ra, tế bào LN229 có gen PTEN kiểu hoang dã, nhưng chúng có sự xóa đồng hợp tử trong các gen ức chế khối u p16 và p14ARF, là các điều hòa quan trọng của chu kỳ tế bào và apoptosis. Những biến đổi di truyền này khiến LN229 trở thành mô hình quý giá để nghiên cứu tác động của các đột biến này đối với sinh học khối u và kháng trị liệu.

Tế bào LN229 đặc biệt hữu ích trong các nghiên cứu về apoptosis. Chúng trải qua quá trình apoptosis khi được kích thích bằng ligand Fas, với sự chết tế bào xảy ra trong vòng 16 giờ. Điều thú vị là, trong khi biểu hiện Bcl-2 có thể bảo vệ tế bào LN229 khỏi apoptosis do ligand Fas gây ra, nó chỉ cung cấp sự bảo vệ hạn chế đối với apoptosis do puromycin, một chất ức chế tổng hợp protein, gây ra. Mô hình kháng thuốc chọn lọc này khiến các tế bào LN229 trở thành mô hình quan trọng để hiểu các cơ chế phân tử của apoptosis trong u não đa hình và để thử nghiệm các liệu pháp điều chỉnh apoptosis tiềm năng. Giống như tất cả các mô hình nghiên cứu in vitro, các tế bào LN229 không phù hợp cho các ứng dụng điều trị hoặc in vivo.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.