LN229

LN229 เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งสมองชนิดกลีโอโบลาสโตมา (glioblastoma) ที่ได้มาจากผู้ป่วยหญิงชาวอเมริกันเชื้อสายยุโรป อายุ 60 ปี ซึ่งมีโรคกลีโอโบลาสโตมาหลายรูปแบบ (GBM) โดยเฉพาะจากบริเวณเปลือกสมองส่วนหน้าขวา (right frontal parieto-occipital cortex) กลีโอโบลาสโตมาเป็นหนึ่งในชนิดของมะเร็งสมองที่มีความรุนแรงและอันตรายที่สุด และเซลล์ LN229 ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในงานวิจัยเพื่อเข้าใจถึงสาเหตุทางโมเลกุลของโรค และเพื่อพัฒนาแนวทางการรักษาที่เป็นไปได้เซลล์แสดงลักษณะทางสัณฐานวิทยาคล้ายเยื่อบุผิวและมีคุณสมบัติการเจริญเติบโตแบบเกาะติด ซึ่งทำให้เหมาะสำหรับการศึกษาในหลอดทดลอง เนื่องจากมีศักยภาพในการก่อเนื้องอกสูง เซลล์เหล่านี้จึงสามารถก่อตัวเป็นเนื้องอกได้ง่ายเมื่อฉีดเข้าสู่หนูเมาส์ที่ไม่มีภูมิคุ้มกัน ทำให้เป็นแบบจำลองที่แข็งแกร่งสำหรับการวิจัยมะเร็ง

หนึ่งในลักษณะสำคัญของเซลล์ LN229 คือการมียีน p53 (TP53) ที่กลายพันธุ์ โดยมีการกลายพันธุ์เฉพาะจาก CCT (Pro) เป็น CTT (Leu) ที่ตำแหน่งโคดอน 98 การกลายพันธุ์นี้มีบทบาทสำคัญอย่างยิ่งต่อการแสดงพฤติกรรมที่ก้าวร้าวของสายพันธุ์เซลล์นี้และความต้านทานต่อการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิสนอกจากนี้ เซลล์ LN229 มียีน PTEN แบบปกติ แต่มีการลบยีน p16 และ p14ARF ซึ่งเป็นยีนต้านมะเร็งที่สำคัญอย่างยิ่ง ซึ่งควบคุมวงจรชีวิตของเซลล์และการตายของเซลล์ตามธรรมชาติ การเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมเหล่านี้ทำให้เซลล์ LN229 เป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาผลกระทบของการกลายพันธุ์เหล่านี้ต่อชีววิทยาของมะเร็งและการต้านทานการรักษา

เซลล์ LN229 มีประโยชน์อย่างยิ่งในการศึกษาการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิส (apoptosis) เซลล์เหล่านี้จะเข้าสู่กระบวนการอะพอพโทซิสเมื่อถูกกระตุ้นด้วย Fas ligand โดยเซลล์จะตายภายใน 16 ชั่วโมง ที่น่าสนใจคือ แม้การแสดงออกของ Bcl-2 จะสามารถปกป้องเซลล์ LN229 จากการตายของเซลล์ที่เกิดจาก Fas ligand ได้ แต่การปกป้องนี้จะจำกัดเฉพาะการตายของเซลล์ที่เกิดจาก puromycin ซึ่งเป็นสารยับยั้งการสังเคราะห์โปรตีนเท่านั้นรูปแบบการต้านทานที่เลือกสรรนี้ทำให้เซลล์ LN229 เป็นแบบจำลองที่สำคัญสำหรับการทำความเข้าใจกลไกโมเลกุลของการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิสในเนื้องอกสมองชนิดกลิโอบลาสโตมา และสำหรับการทดสอบการบำบัดที่อาจปรับเปลี่ยนการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิสได้ เช่นเดียวกับการวิจัยในหลอดทดลองทั้งหมด เซลล์ LN229 ไม่เหมาะสำหรับการบำบัดหรือการใช้งานในสิ่งมีชีวิต

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.