Skip to content
LN229
Tissue
מוח, קליפת המוח הקדמית הימנית-עכבית-עורפית
Disease
גליובלסטומה
Synonyms
LN 229, LN229, LNT-229

Documents

LN229

Cell line · Product number 305043

LN229 is a human glioblastoma cell line derived from a 60-year-old White female patient with glioblastoma multiforme (GBM), specifically from the right fr...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

LN229 הוא קו תאים של גליובלסטומה אנושית שמקורו בחולה לבנה בת 60 עם גליובלסטומה מולטיפורמה (GBM), ובאופן ספציפי מקליפת המוח הקדמית-עכברית-עכברית הימנית. גליובלסטומה היא אחד מסוגי הסרטן המוחיים האגרסיביים והקטלניים ביותר, ותאי LN229 משמשים רבות במחקר כדי להבין את הבסיס המולקולרי של המחלה ולפתח אסטרטגיות טיפוליות פוטנציאליות. התאים מציגים מורפולוגיה דמוית אפיתל ומפגינים תכונות צמיחה דבקות, מה שהופך אותם לאידיאליים למחקרים במבחנה. בשל הפוטנציאל הגבוה שלהם ליצירת גידולים, הם יוצרים גידולים בקלות כאשר מוזרקים לעכברים עירומים, מה שהופך אותם למודל חזק למחקר סרטן.

אחד המאפיינים הקריטיים של תאי LN229 הוא נוכחותו של גן p53 מוטציה (TP53), עם מוטציה ספציפית של CCT (Pro) ל-CTT (Leu) בקודון 98. מוטציה זו תורמת באופן משמעותי להתנהגות האגרסיבית של קו התאים ולעמידותו לאפופטוזיס. בנוסף, לתאי LN229 יש גן PTEN מסוג בר, אך הם מציגים מחיקות הומוזיגוטיות בגנים p16 ו-p14ARF המדכאים גידולים, שהם רגולטורים חיוניים של מחזור התא ואפופטוזיס. שינויים גנטיים אלה הופכים את LN229 למודל חשוב לחקר ההשפעה של מוטציות אלה על ביולוגיה של גידולים ועמידות טיפולית.

תאי LN229 שימושיים במיוחד במחקרים על אפופטוזיס. הם עוברים אפופטוזיס לאחר גירוי עם ליגנד Fas, כאשר מות התאים מתרחש תוך 16 שעות. מעניין לציין כי בעוד שביטוי Bcl-2 יכול להגן על תאי LN229 מפני אפופטוזיס המושרה על ידי ליגנד Fas, הוא מספק הגנה מוגבלת בלבד מפני אפופטוזיס המושרה על ידי פורומיצין, מעכב סינתזת חלבונים. דפוס עמידות סלקטיבי זה הופך את תאי LN229 למודל קריטי להבנת המנגנונים המולקולריים של אפופטוזיס בגליובלסטומה ולבחינת טיפולים פוטנציאליים המווסתים אפופטוזיס. כמו בכל מודלי המחקר במבחנה, תאי LN229 אינם מתאימים ליישומים טיפוליים או in vivo.

Tissue
מוח, קליפת המוח הקדמית הימנית-עכבית-עורפית
Disease
גליובלסטומה
Synonyms
  • LN 229
  • LN229
  • LNT-229

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
אפיתל
Doubling time
31 שעות

04Identifiers

Citation
LN229 (מספר קטלוג Cytion 305043)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0393

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

07Donor

Donor age
60 שנים
Ethnicity
אירופאי