LN229
Cell line · Product number 305043
LN229 is a human glioblastoma cell line derived from a 60-year-old White female patient with glioblastoma multiforme (GBM), specifically from the right fr...
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01General information
- Description
LN229 是一种人类胶质母细胞瘤细胞系,来源于一名 60 岁的白人女性多形性胶质母细胞瘤(GBM)患者,特别是右额顶枕叶皮层的胶质母细胞瘤。胶质母细胞瘤是最具侵袭性和致命性的脑癌之一,LN229 细胞被广泛用于研究,以了解这种疾病的分子基础并开发潜在的治疗策略。LN229 细胞具有上皮样形态和粘附生长特性,因此非常适合体外研究。由于它们具有很高的致瘤潜能,因此将它们注射到裸鼠体内很容易形成肿瘤,使它们成为癌症研究的有力模型。
LN229 细胞的关键特征之一是存在突变的 p53 基因(TP53),在第 98 个密码子处有一个从 CCT(Pro)到 CTT(Leu)的特定突变。这种突变在很大程度上导致了细胞株的侵袭行为和对细胞凋亡的抵抗力。此外,LN229 细胞具有野生型 PTEN 基因,但它们的 p16 和 p14ARF 抑癌基因出现了同源缺失,而这两个基因是细胞周期和细胞凋亡的重要调节因子。这些基因改变使 LN229 成为研究这些突变对肿瘤生物学和治疗耐药性影响的宝贵模型。
LN229 细胞对凋亡研究尤其有用。在 Fas 配体的刺激下,它们会发生凋亡,细胞会在 16 小时内死亡。有趣的是,虽然 Bcl-2 的表达能保护 LN229 细胞免于 Fas 配体诱导的细胞凋亡,但它只能在蛋白质合成抑制剂嘌呤霉素诱导的细胞凋亡中提供有限的保护。这种选择性抗性模式使 LN229 细胞成为了解胶质母细胞瘤细胞凋亡分子机制和测试潜在凋亡调节疗法的重要模型。与所有体外研究模型一样,LN229 细胞不适合用于治疗或体内应用。
- Tissue
- 大脑,右侧额顶枕皮层
- Disease
- 胶质母细胞瘤
- Synonyms
- LN 229
- LN229
- LNT-229
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮细胞
- Doubling time
- 31 小时
04Identifiers
- Citation
- LN229(Cytion 产品编号 305043)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0393
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM,w:4.5 克/升葡萄糖,w:4 毫摩尔 L-谷氨酰胺,w:3.7 克/升 NaHCO3,w:1.0 毫摩尔丙酮酸钠(Cytion 编号 820300a)。
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 在培养基中添加 10% FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
- Fluid renewal
- 每周 2 至 3 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
07Donor
- Donor age
- 60 年
- Ethnicity
- 欧洲
08Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时,必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时,必须穿戴适当的防护手套和防护服,并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险,因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Warranty
在Cytion,我们保证产品的质量和活力。 我们保证,从我们的工厂发货后 60 天内,我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息,请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
