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P3x63Ag8.653
Tissue
Hematopoyético
Disease
Mieloma
Synonyms
P3-x63-Ag8.653, P3-x63-Ag8-653, P3-x63-Ag8 653, P3-x63-Ag 8.653, P3-x63Ag8.653, P3-x63.Ag8.653, P3/x63/Ag8.653, P3x63 Ag8.653, P3x63 AG8-653, P3x63-Ag8.653, P3x63-Ag8.653, P3x63 AG 8.653, P3x63Ag8653, P3-x63-Ag8-6-5-3, P3x63Ag8-6-5-3, P3.times.63 Ag8.653, P3.653, x63-Ag 8.6.5.3, x63-AG 8.653, x63-Ag8-653, x63-Ag8.653, x63.Ag8.653, x63Ag8-653, x63Ag8.653, x63AG8.653, P3-653, GM03570, GM3570, GM03570E, NS653

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P3x63Ag8.653

Cell line · Product number 400118

The cells are resistant to 8-azaguanine and are HAT sensitive. They can be used as fusion partners for producing hybridomas. The cells do not secrete immunog...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
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Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description
Las células son resistentes a la 8-azaguanina y sensibles a la HAT. Pueden utilizarse como socios de fusión para la producción de hibridomas. Las células no secretan inmunoglobulina. Se ha informado que estas células son auxótrofas al colesterol debido a una deficiencia en la actividad de la 3-cetosteroide reductasa.
Tissue
Hematopoyético
Disease
Mieloma
Synonyms
  • P3-x63-Ag8.653
  • P3-x63-Ag8-653
  • P3-x63-Ag8 653
  • P3-x63-Ag 8.653
  • P3-x63Ag8.653
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  • P3/x63/Ag8.653
  • P3x63 Ag8.653
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  • x63Ag8.653
  • x63AG8.653
  • P3-653
  • GM03570
  • GM3570
  • GM03570E
  • NS653

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent and suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Células redondas

04Identifiers

Citation
P3x63Ag8.653 (número de catálogo de Cytion 400118)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_4032

05Expression and susceptibility

Viruses
El resultado de la prueba del virus de la ectromelia (viruela del ratón) fue negativo.

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, con 2,0 mM de glutamina estable y 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion: 820700a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

Supplements
Añade al medio un 10 % de FBS
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Recoja las células en suspensión en un tubo de 15 ml y lave suavemente las células adherentes con PBS sin calcio ni magnesio (utilice de 3 a 5 ml para frascos T25 y de 5 a 10 ml para frascos T75). Aplique Accutase (1 a 2 ml para frascos T25, 2,5 ml para frascos T75) asegurándose de cubrir completamente la capa celular. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 10 minutos. Tras la incubación, combine y centrifugue tanto la suspensión como las células adheridas. Después de la centrifugación, resuspender cuidadosamente el sedimento celular y transferir la suspensión celular a nuevos frascos que contengan medio fresco.
Seeding density
Inicie nuevos cultivos a una concentración de 4 x 10⁵ células/ml. La densidad celular no debe superar las 2 x 10⁶ células/ml.
Fluid renewal
Cada 3 o 4 días. Recoja las células flotantes, centrifúgelas y añádalas al matraz junto con medio fresco.
Post-thaw recovery
Después de descongelarlas, siembre las células a una densidad de 5 × 10⁴ células/cm² y deje que se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 48 horas.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Freeze medium
Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
Storage conditions

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Shipping conditions

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

08Donor

Breed / subspecies
BALB/c