الانتقال إلى المحتوى
P3x63Ag8.653
الأنسجة
المكونة للدم
المرض
الورم النخاعي
المرادفات
P3-x63-Ag8.653, P3-x63-Ag8-653, P3-x63-Ag8 653, P3-x63-Ag 8.653, P3-x63Ag8.653, P3-x63.Ag8.653, P3/x63/Ag8.653, P3x63 Ag8.653, P3x63 AG8-653, P3x63-Ag8.653, P3x63-Ag8.653, P3x63 AG 8.653, P3x63Ag8653, P3-x63-Ag8-6-5-3, P3x63Ag8-6-5-3, P3.times.63 Ag8.653, P3.653, x63-Ag 8.6.5.3, x63-AG 8.653, x63-Ag8-653, x63-Ag8.653, x63.Ag8.653, x63Ag8-653, x63Ag8.653, x63AG8.653, P3-653, GM03570, GM3570, GM03570E, NS653

المستندات

P3x63Ag8.653

Cell line · رقم المنتج 400118

The cells are resistant to 8-azaguanine and are HAT sensitive. They can be used as fusion partners for producing hybridomas. The cells do not secrete immunog...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف
هذه الخلايا مقاومة ل 8-أزاغوانين وهي حساسة لـ HAT. يمكن استخدامها كشركاء اندماج لإنتاج خلايا هجينة. لا تفرز الخلايا الغلوبولين المناعي. وقد تم الإبلاغ عن أن هذه الخلايا تتغذى على الكوليسترول بسبب نقص في نشاط اختزال 3-كيتوستيرويد.
الأنسجة
المكونة للدم
المرض
الورم النخاعي
المرادفات
  • P3-x63-Ag8.653
  • P3-x63-Ag8-653
  • P3-x63-Ag8 653
  • P3-x63-Ag 8.653
  • P3-x63Ag8.653
  • P3-x63.Ag8.653
  • P3/x63/Ag8.653
  • P3x63 Ag8.653
  • P3x63 AG8-653
  • P3x63-Ag8.653
  • P3x63-Ag8.653
  • P3x63 AG 8.653
  • P3x63Ag8653
  • P3-x63-Ag8-6-5-3
  • P3x63Ag8-6-5-3
  • P3.times.63 Ag8.653
  • P3.653
  • x63-Ag 8.6.5.3
  • x63-AG 8.653
  • x63-Ag8-653
  • x63-Ag8.653
  • x63.Ag8.653
  • x63Ag8-653
  • x63Ag8.653
  • x63AG8.653
  • P3-653
  • GM03570
  • GM3570
  • GM03570E
  • NS653

02التصنيف

كائن حي
الماوس
الجنس
أنثى
خصائص النمو
التثبيت والتعليق
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الخلايا الدائرية

04المعرّفات

المرجع
P3x63Ag8.653 (كتالوج سايتون رقم 400118)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10090
سيلوصور
CVCL_4032

05التعبير والقابلية للإصابة

الفيروسات
كانت نتيجة الاختبار سلبية لفيروس إكتروميليا (جدري الفئران).

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
اجمع الخلايا المعلقة في أنبوب سعة 15 مل واغسل الخلايا الملتصقة برفق باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم (استخدم 3-5 مل لقوارير T25 و5-10 مل لقوارير T75). ضع أكوتاز (1-2 مل لقوارير T25، و2.5 مل لقوارير T75) لضمان تغطية كاملة لطبقة الخلايا. اسمح للخلايا بالاحتضان في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق. بعد الحضانة، اخلط كل من الخلايا المعلقة والخلايا الملتصقة واطردها مركزيًا. بعد الطرد المركزي، يُعاد بعناية إعادة ترسيب كريات الخلايا بعناية ونقل المعلق الخلوي إلى قوارير جديدة تحتوي على وسط جديد.
كثافة البذر
ابدأ ثقافات جديدة عند 4 × 105 خلية/مل. يجب ألا تتجاوز كثافة الخلايا 2 × 106 خلية/مل.
تجديد السوائل
كل 3 إلى 4 أيام. جمع الخلايا العائمة وطردها مركزيًا وإضافتها إلى القارورة مع وسط جديد.
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 48 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

السلالة / النوع الفرعي
بالب/ج