Preskoči na vsebino
P3x63Ag8.653
Tkivo
Hematopoetski
Bolezen
Mielom
Sinonimi
P3-x63-Ag8.653, P3-x63-Ag8-653, P3-x63-Ag8 653, P3-x63-Ag 8.653, P3-x63Ag8.653, P3-x63.Ag8.653, P3/x63/Ag8.653, P3x63 Ag8.653, P3x63 AG8-653, P3x63-Ag8.653, P3x63-Ag8.653, P3x63 AG 8.653, P3x63Ag8653, P3-x63-Ag8-6-5-3, P3x63Ag8-6-5-3, P3.times.63 Ag8.653, P3.653, x63-Ag 8.6.5.3, x63-AG 8.653, x63-Ag8-653, x63-Ag8.653, x63.Ag8.653, x63Ag8-653, x63Ag8.653, x63AG8.653, P3-653, GM03570, GM3570, GM03570E, NS653

Dokumenti

P3x63Ag8.653

Cell line · Številka izdelka 400118

The cells are resistant to 8-azaguanine and are HAT sensitive. They can be used as fusion partners for producing hybridomas. The cells do not secrete immunog...

€430.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
1

01Splošne informacije

Opis
Celice so odporne na 8-azaguanin in občutljive na HAT. Uporabljajo se lahko kot fuzijski partnerji za proizvodnjo hibridomov. Celice ne izločajo imunoglobulina. Celice naj bi bile holesterolno avskutne zaradi pomanjkanja aktivnosti 3-ketosteroidne reduktaze.
Tkivo
Hematopoetski
Bolezen
Mielom
Sinonimi
  • P3-x63-Ag8.653
  • P3-x63-Ag8-653
  • P3-x63-Ag8 653
  • P3-x63-Ag 8.653
  • P3-x63Ag8.653
  • P3-x63.Ag8.653
  • P3/x63/Ag8.653
  • P3x63 Ag8.653
  • P3x63 AG8-653
  • P3x63-Ag8.653
  • P3x63-Ag8.653
  • P3x63 AG 8.653
  • P3x63Ag8653
  • P3-x63-Ag8-6-5-3
  • P3x63Ag8-6-5-3
  • P3.times.63 Ag8.653
  • P3.653
  • x63-Ag 8.6.5.3
  • x63-AG 8.653
  • x63-Ag8-653
  • x63-Ag8.653
  • x63.Ag8.653
  • x63Ag8-653
  • x63Ag8.653
  • x63AG8.653
  • P3-653
  • GM03570
  • GM3570
  • GM03570E
  • NS653

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Adhezivni in suspenzijski
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Okrogle celice

04Identifikatorji

Navajanje vira
P3x63Ag8.653 (kataloška številka Cytion 400118)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_4032

05Izražanje in dovzetnost

Virusi
Testiranje na virus ektromelije (mišje ošpice) je bilo negativno.

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
V 15 ml epruveti zberite suspenzijske celice in jih nežno sperite s PBS brez kalcija in magnezija (uporabite 3-5 ml za bučke T25 in 5-10 ml za bučke T75). Uporabite Accutase (1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75), tako da popolnoma prekrijete plast celic. Počakajte, da se celice inkubirajo pri sobni temperaturi 10 minut. Po inkubaciji združite in centrifugirajte suspenzijo in adherentne celice. Po centrifugiranju previdno ponovno suspendirajte celično peleto in celično suspenzijo prenesite v nove bučke s svežim gojiščem.
Gostota setve
Začnite nove kulture pri 4 x 105 celicah/ml. Gostota celic ne sme presegati 2 x 106 celic/ml.
Obnova tekočine
Vsakih 3 do 4 dni. Zberite plavajoče celice, jih centrifugirajte in dodajte v erlenmajerico skupaj s svežim gojiščem.
Obnova po odtaljevanju
Po odmrznitvi celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo za najmanj 48 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Pasma / podvrsta
BALB/c