.jpg)
- Audums
- Hematopoētiskais
- Slimība
- Mieloma
- Sinonīmi
- P3-x63-Ag8.653, P3-x63-Ag8-653, P3-x63-Ag8 653, P3-x63-Ag 8.653, P3-x63Ag8.653, P3-x63.Ag8.653, P3/x63/Ag8.653, P3x63 Ag8.653, P3x63 AG8-653, P3x63-Ag8.653, P3x63-Ag8.653, P3x63 AG 8.653, P3x63Ag8653, P3-x63-Ag8-6-5-3, P3x63Ag8-6-5-3, P3.times.63 Ag8.653, P3.653, x63-Ag 8.6.5.3, x63-AG 8.653, x63-Ag8-653, x63-Ag8.653, x63.Ag8.653, x63Ag8-653, x63Ag8.653, x63AG8.653, P3-653, GM03570, GM3570, GM03570E, NS653
Dokumenti
P3x63Ag8.653
Cell line · Preces numurs 400118
The cells are resistant to 8-azaguanine and are HAT sensitive. They can be used as fusion partners for producing hybridomas. The cells do not secrete immunog...
Pielāgošana / Ieteikumi
- P3x63Ag8.653Cell line€430.00
Ieteicams (jaunākā partija)
01Vispārīga informācija
- Apraksts
- Šūnas ir rezistentas pret 8-azaguanīnu un jutīgas pret HAT. Tās var izmantot kā saplūšanas partnerus hibridomu ražošanai. Šūnas neizdala imūnglobulīnu. Ir ziņots, ka šūnas ir holesterīna autotrofas, jo tām trūkst 3-ketosteroīdu reduktāzes aktivitātes.
- Audums
- Hematopoētiskais
- Slimība
- Mieloma
- Sinonīmi
- P3-x63-Ag8.653
- P3-x63-Ag8-653
- P3-x63-Ag8 653
- P3-x63-Ag 8.653
- P3-x63Ag8.653
- P3-x63.Ag8.653
- P3/x63/Ag8.653
- P3x63 Ag8.653
- P3x63 AG8-653
- P3x63-Ag8.653
- P3x63-Ag8.653
- P3x63 AG 8.653
- P3x63Ag8653
- P3-x63-Ag8-6-5-3
- P3x63Ag8-6-5-3
- P3.times.63 Ag8.653
- P3.653
- x63-Ag 8.6.5.3
- x63-AG 8.653
- x63-Ag8-653
- x63-Ag8.653
- x63.Ag8.653
- x63Ag8-653
- x63Ag8.653
- x63AG8.653
- P3-653
- GM03570
- GM3570
- GM03570E
- NS653
02Klasifikācija
- Organisms
- Pele
- Sekss
- Sieviete
- Augšanas īpašības
- Adhēzija un suspensija
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 1
03Raksturlielumi
- Morfoloģija
- Apaļas šūnas
04Identifikatori
- Atsauce
- P3x63Ag8.653 (Cytion kataloga numurs 400118)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_4032
05Pazīmes un uzņēmība
- Vīrusi
- Negatīvs tests uz ektromēlijas vīrusu (peļu bakām).
06Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Papildināt barotni ar 10% FBS
- Disociācijas reaģents
- Accutase
- Pārstādīšana
- Savāc suspensijas šūnas 15 ml mēģenē un saudzīgi izmazgā pielipušās šūnas ar PBS bez kalcija un magnija (T25 kolbām izmanto 3-5 ml, bet T75 kolbām - 5-10 ml). Uzklājiet Accutase (1-2 ml T25 kolbām, 2,5 ml T75 kolbām), nodrošinot pilnīgu šūnu slāņa pārklājumu. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 10 minūtes. Pēc inkubācijas apvienot un centrifugēt gan suspensiju, gan pielipušās šūnas. Pēc centrifugēšanas uzmanīgi resuspendēt šūnu granulas un pārvietot šūnu suspensiju jaunās kolbās ar svaigu barotni.
- Sēšanas blīvums
- Sāciet jaunas kultūras ar 4 x 105 šūnām/ml. Šūnu blīvums nedrīkst pārsniegt 2 x 106 šūnas/ml.
- Šķidruma atjaunošana
- Ik pēc 3 līdz 4 dienām. Savāc peldošās šūnas, centrifugē un pievieno kolbā kopā ar svaigu barotni.
- Atgūšanās pēc atkusņa
- Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 48 stundas.
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Sterilitāte
Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.
Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
08Ziedotājs
- Šķirne / pasuga
- BALB/c
09Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Atbrīvojums no atbildības
- Mūsu šūnas ir paredzētas tikai in vitro laboratorijas pētījumiem, un tās nav paredzētas klīniskai vai diagnostiskai lietošanai, tās nav ievadāmas cilvēkiem vai izmantojamas veterinārijā. Lietotājiem jāievēro visas piemērojamās vadlīnijas un noteikumi par šo šūnu apstrādi un izmantošanu pētniecībā.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Nepieciešams materiālu nodošanas līgums
- Jā