Přejít na obsah
P3x63Ag8.653
Tkáň
Hematopoetické
Nemoc
Myelom
Synonyma
P3-x63-Ag8.653, P3-x63-Ag8-653, P3-x63-Ag8 653, P3-x63-Ag 8.653, P3-x63Ag8.653, P3-x63.Ag8.653, P3/x63/Ag8.653, P3x63 Ag8.653, P3x63 AG8-653, P3x63-Ag8.653, P3x63-Ag8.653, P3x63 AG 8.653, P3x63Ag8653, P3-x63-Ag8-6-5-3, P3x63Ag8-6-5-3, P3.times.63 Ag8.653, P3.653, x63-Ag 8.6.5.3, x63-AG 8.653, x63-Ag8-653, x63-Ag8.653, x63.Ag8.653, x63Ag8-653, x63Ag8.653, x63AG8.653, P3-653, GM03570, GM3570, GM03570E, NS653

Dokumenty

P3x63Ag8.653

Cell line · Číslo výrobku 400118

The cells are resistant to 8-azaguanine and are HAT sensitive. They can be used as fusion partners for producing hybridomas. The cells do not secrete immunog...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis
Buňky jsou rezistentní vůči 8-azaguaninu a jsou citlivé na HAT. Mohou být použity jako fúzní partneři pro výrobu hybridomů. Buňky nevylučují imunoglobulin. Bylo zjištěno, že buňky jsou cholesterol auxotrofní v důsledku nedostatku aktivity 3-ketosteroid reduktázy.
Tkáň
Hematopoetické
Nemoc
Myelom
Synonyma
  • P3-x63-Ag8.653
  • P3-x63-Ag8-653
  • P3-x63-Ag8 653
  • P3-x63-Ag 8.653
  • P3-x63Ag8.653
  • P3-x63.Ag8.653
  • P3/x63/Ag8.653
  • P3x63 Ag8.653
  • P3x63 AG8-653
  • P3x63-Ag8.653
  • P3x63-Ag8.653
  • P3x63 AG 8.653
  • P3x63Ag8653
  • P3-x63-Ag8-6-5-3
  • P3x63Ag8-6-5-3
  • P3.times.63 Ag8.653
  • P3.653
  • x63-Ag 8.6.5.3
  • x63-AG 8.653
  • x63-Ag8-653
  • x63-Ag8.653
  • x63.Ag8.653
  • x63Ag8-653
  • x63Ag8.653
  • x63AG8.653
  • P3-653
  • GM03570
  • GM3570
  • GM03570E
  • NS653

02Klasifikace

Organismus
Myš
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Adhezivní a suspenzní
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Kulaté buňky

04Identifikátory

Citace
P3x63Ag8.653 (katalogové číslo Cytion 400118)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_4032

05Exprese a náchylnost

Viry
Test na virus ektromelie (myší neštovice) byl negativní.

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Shromážděte suspenzi buněk do 15 ml zkumavky a jemně promyjte adherentní buňky PBS bez vápníku a hořčíku (použijte 3-5 ml pro baňky T25 a 5-10 ml pro baňky T75). Aplikujte Accutase (1-2 ml pro baňky T25, 2,5 ml pro baňky T75), abyste zajistili úplné pokrytí buněčné vrstvy. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 10 minut. Po inkubaci spojte a odstřeďte suspenzi i adherované buňky. Po odstředění opatrně resuspendujte buněčnou peletu a přeneste buněčnou suspenzi do nových baněk obsahujících čerstvé médium.
Hustota výsevu
Nové kultury zahajte při hustotě 4 x 105 buněk/ml. Hustota buněk by neměla překročit 2 x 106 buněk/ml.
Obnova tekutin
Každé 3 až 4 dny. Sebrat plovoucí buňky, odstředit a přidat do baňky spolu s čerstvým médiem.
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 48 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Plemeno / poddruh
BALB/c