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- Tecido
- Hematopoiético
- Doença
- Mieloma múltiplo
- Sinónimos
- P3-x63-Ag8.653, P3-x63-Ag8-653, P3-x63-Ag8 653, P3-x63-Ag 8.653, P3-x63Ag8.653, P3-x63.Ag8.653, P3/x63/Ag8.653, P3x63 Ag8.653, P3x63 AG8-653, P3x63-Ag8.653, P3x63-Ag8.653, P3x63 AG 8.653, P3x63Ag8653, P3-x63-Ag8-6-5-3, P3x63Ag8-6-5-3, P3.times.63 Ag8.653, P3.653, x63-Ag 8.6.5.3, x63-AG 8.653, x63-Ag8-653, x63-Ag8.653, x63.Ag8.653, x63Ag8-653, x63Ag8.653, x63AG8.653, P3-653, GM03570, GM3570, GM03570E, NS653
Documentos
P3x63Ag8.653
Cell line · Número do produto 400118
The cells are resistant to 8-azaguanine and are HAT sensitive. They can be used as fusion partners for producing hybridomas. The cells do not secrete immunog...
Personalização / Recomendações
- P3x63Ag8.653Cell line€430.00
Recomendado (lote mais recente)
01Informações gerais
- Descrição
- As células são resistentes à 8-azaguanina e são sensíveis ao HAT. Podem ser utilizadas como parceiros de fusão para a produção de hibridomas. As células não segregam imunoglobulina. Foi referido que as células são auxotróficas de colesterol devido a uma deficiência na atividade da 3-cetosteróide redutase.
- Tecido
- Hematopoiético
- Doença
- Mieloma múltiplo
- Sinónimos
- P3-x63-Ag8.653
- P3-x63-Ag8-653
- P3-x63-Ag8 653
- P3-x63-Ag 8.653
- P3-x63Ag8.653
- P3-x63.Ag8.653
- P3/x63/Ag8.653
- P3x63 Ag8.653
- P3x63 AG8-653
- P3x63-Ag8.653
- P3x63-Ag8.653
- P3x63 AG 8.653
- P3x63Ag8653
- P3-x63-Ag8-6-5-3
- P3x63Ag8-6-5-3
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- x63.Ag8.653
- x63Ag8-653
- x63Ag8.653
- x63AG8.653
- P3-653
- GM03570
- GM3570
- GM03570E
- NS653
02Classificação
- Organismo
- Rato
- Sexo
- Feminino
- Propriedades de crescimento
- Adesão e suspensão
- Nível de biossegurança
- 1
03Características
- Morfologia
- Células redondas
04Identificadores
- Referência
- P3x63Ag8.653 (número de catálogo Cytion 400118)
- Número de identificação fiscal do NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_4032
05Expressão e suscetibilidade
- Vírus
- Testes negativos para o vírus da ectromelia (varíola do rato).
06Manuseamento e cultura
- Meio de cultura
- RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
- Atmosfera de incubação
37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.
- Suplementos
- Completar o meio com 10% de FBS
- Reagente de dissociação
- Accutase
- Subcultura
- Reunir as células em suspensão num tubo de 15 ml e lavar suavemente as células aderentes com PBS sem cálcio e magnésio (utilizar 3-5 ml para os frascos T25 e 5-10 ml para os frascos T75). Aplicar Accutase (1-2 ml para os frascos T25, 2,5 ml para os frascos T75), assegurando a cobertura total da camada celular. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 10 minutos. Após a incubação, combinar e centrifugar tanto a suspensão como as células aderentes. Após a centrifugação, ressuspender cuidadosamente o pellet de células e transferir a suspensão de células para novos frascos com meio fresco.
- Densidade de sementeira
- Inicie novas culturas com 4 x 105 células/ml. A densidade celular não deve exceder 2 x 106 células/ml.
- Renovação de fluidos
- De 3 em 3 ou de 4 em 4 dias. Recolher as células flutuantes, centrifugar e adicionar ao frasco juntamente com meio fresco.
- Recuperação após o descongelamento
- Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 5 x 104 células/cm² e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 48 horas.
- Descongelamento e cultura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controlo de qualidade e criopreservação
- Esterilidade
A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.
- Meio de congelação
- Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
- Condições de armazenamento
Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.
- Condições de envio
As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
08Doador
- Raça / subespécie
- BALB/c
09Aspectos legais e de segurança
- Precauções de segurança
- Quando se planeia armazenar um criovial em nitrogénio líquido para descongelação futura, é obrigatório aderir a medidas de segurança rigorosas. Luvas e vestuário de proteção adequados são essenciais, e a utilização de uma máscara facial ou óculos de segurança é necessária durante a transferência de amostras congeladas para ou do tanque de nitrogénio líquido. Isto destina-se a mitigar o risco de ferimentos provocados por potenciais explosões de crioviais após a remoção, que podem resultar na projeção de fragmentos afiados.
- Aviso legal
- As nossas células são fornecidas exclusivamente para fins de investigação laboratorial in vitro e não se destinam a utilização clínica ou de diagnóstico, nem devem ser administradas a seres humanos ou utilizadas para fins veterinários. Os utilizadores devem aderir a todas as diretrizes e regulamentos aplicáveis para o manuseamento e utilização destas células num ambiente de investigação.
- Garantia
Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto
Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia
- É necessário um Acordo de Transferência de Material
- Sim