Células AGS: estudio de las células AGS de adenocarcinoma gástrico en investigaciones sobre el cáncer

Las células AGS constituyen una línea celular de adenocarcinoma gástrico humano que se utiliza ampliamente en la investigación biomédica. En particular, se emplea para estudiar la biología del cáncer gástrico, incluyendo el crecimiento, el desarrollo y la progresión del tumor, así como las intervenciones terapéuticas. Además, se utiliza para investigar las interacciones entre el huésped y el patógeno.

 

Características generales y origen de las células AGS

Es necesario conocer el origen y las características generales de una línea celular antes de comenzar a trabajar con ella. En esta sección se abordarán los siguientes temas: ¿Qué son las células AGS? ¿Cuál es el origen de la línea celular AGS? ¿Cuál es la morfología de la línea celular cancerosa AGS?

• La línea celular AGS se derivó del tejido gástrico de una mujer caucásica de 54 años con adenocarcinoma gástrico. Se aisló en 1979 [1].
• Las células AGS presentan una morfología de tipo epitelial.
• Las células epiteliales gástricas AGS son hiperdiploides. El número modal de cromosomas de las células AGS es 49, lo cual se observa en casi el 60 % de las células. La poliploidía también se presenta en aproximadamente el 3,6 % de las células.

Carcinoma de estómago en sección transversal al microscopio.

Información sobre el cultivo de la línea celular AGS

Para manejar y gestionar adecuadamente una línea celular, es necesario conocer los conceptos básicos de su cultivo. En particular, debe aprender: ¿Cuál es el tiempo de duplicación de las células AGS? ¿Cuál es el medio de cultivo de las células AGS? ¿Cómo se realiza el subcultivo de las células AGS? ¿Qué medios de congelación se utilizan para las células epiteliales gástricas AGS?

Puntos clave para el cultivo de células AGS

Tiempo de duplicación:

El tiempo de duplicación de las células AGS oscila entre 24 y 48 horas.

Adherentes o en suspensión:

Las células AGS son adherentes. Crecen formando monocapas.

Densidad de siembra:

Las células AGS se siembran a una densidad celular de 1 x 10^⁴ células/cm². A esta densidad, las células forman una monocapa confluente en un plazo de 3 a 5 días. Después de retirar el medio viejo, las células se enjuagan con PBS 1x y se incuban con la solución de disociación Accutase. Las células desprendidas se resuspendieron en medio de cultivo y se centrifugaron. El sedimento celular se resuspendió nuevamente y, tras contar las células AGS, se transfirieron a un nuevo frasco para su crecimiento.

Medio de crecimiento:

Para el cultivo de las células AGS se utiliza medio DMEM que contiene 10 % de FBS, 4 mM de L-glutamina, 4,5 g/L de glucosa, 1,5 g/L de NaHCO₃ y 1,0 mM de piruvato de sodio. El medio debe cambiarse de 2 a 3 veces por semana.

Condiciones de cultivo: 

Las células AGS se mantienen en una incubadora humidificada (a una temperatura de 37 °C) con un suministro de 5 % de CO₂.

Almacenamiento: 

Las células AGS congeladas se conservan en congeladores eléctricos a una temperatura inferior a -150 °C o en la fase de vapor de nitrógeno líquido durante un período más prolongado.

Proceso de congelación y medio:

Se utiliza el medio CM-1 o CM-ACF para congelar las células AGS. La congelación celular se lleva a cabo mediante un proceso de congelación lenta que permite solo una disminución de 1 °C en la temperatura por minuto y protege la viabilidad celular.

Proceso de descongelación:

Las células epiteliales gástricas congeladas se agitan rápidamente en un baño de agua a 37 °C durante 40 a 60 segundos. Las células descongeladas se resuspenden en medios de cultivo frescos y se vierten en nuevos frascos para su crecimiento. Después de 24 horas de incubación, se renueva el medio para eliminar los componentes del medio de congelación. Por el contrario, las células descongeladas se centrifugan y se eliminan los elementos del medio de congelación. Luego, las células recolectadas se resuspenden nuevamente y se dispensan en el frasco que contiene el medio de cultivo.

Nivel de bioseguridad:

Para el cultivo de células AGS es imprescindible contar con un laboratorio de nivel de bioseguridad 2.

 

Células AGS con un aumento de 20x.

Línea celular AGS: ventajas y limitaciones

En esta sección del artículo se explicarán algunas de las principales ventajas y limitaciones asociadas a las células AGS.

Ventajas

Las principales ventajas de las células epiteliales gástricas AGS son:

Fáciles de cultivar

La línea celular AGS de carcinoma gástrico es fácil de mantener en laboratorios de cultivo celular. No presenta requisitos de cultivo complicados ni exigentes. Además, muestra buenas características de crecimiento, lo que la convierte en una opción ideal para estudiar la biología del cáncer gástrico.

Relevancia para el cáncer gástrico

Las células AGS se derivaron de un adenocarcinoma gástrico humano, lo que hace que se utilicen ampliamente para estudiar la biología del carcinoma gástrico y las intervenciones terapéuticas.

 

Limitaciones

La limitación asociada a la línea celular AGS es:

Modelo celular in vitro

Las células AGS se cultivan en laboratorios de investigación biomédica bajo condiciones artificiales. Por lo tanto, es posible que no reproduzcan completamente el microambiente del cáncer gástrico in vivo ni otras interacciones celulares y moleculares.

 

Aplicaciones de las células AGS

Las células AGS se utilizan específicamente para estudiar la biología del cáncer gástrico. Cuentan con muchas otras aplicaciones prometedoras en el campo biomédico. Algunas de las aplicaciones de investigación más interesantes de las células AGS son:

• Estudio del cáncer gástrico: Las células AGS son una excelente herramienta de investigación para estudiar los mecanismos celulares y moleculares que subyacen al crecimiento, la metástasis y la invasión del cáncer gástrico. Los investigadores también emplean células epiteliales gástricas AGS para estudiar diferentes procesos celulares, mutaciones genéticas y vías de señalización en el desarrollo del cáncer gástrico. Un estudio publicado en *Oncology Reports* (2019) descubrió que el microARN-183-5p.1 fomenta la proliferación, migración e invasión de las células tumorales al inhibir la cascada de señalización Bcl-2/P53. Además, también regula a la baja el gen TPM1 para ejercer estos efectos. Por lo tanto, tanto el microARN como el TPM1 se sugieren como dianas moleculares efectivas para el desarrollo de terapias dirigidas contra el cáncer gástrico [2].
• Cribado de fármacos: Las células AGS se han utilizado comúnmente para cribar fármacos nuevos y eficaces contra el cáncer gástrico. Los investigadores evalúan la citotoxicidad y la eficacia de posibles fármacos utilizando la línea celular AGS. También se han realizado estudios para identificar nuevas dianas moleculares y desarrollar terapias dirigidas novedosas para combatir los carcinomas gástricos. Una investigación realizada en 2021 utilizó células de cáncer gástrico AGS y estudió el efecto terapéutico del fármaco paclitaxel. Los hallazgos revelaron que el paclitaxel induce una catástrofe mitótica, un mecanismo integral de la apoptosis o muerte celular en las células AGS. Además, también promovió la autofagia en las células de cáncer gástrico [3].
• Interacciones entre el huésped y el patógeno: La línea celular cancerosa AGS también se utiliza para estudiar las interacciones entre el huésped y el patógeno. Esto ayuda a los investigadores a comprender los mecanismos celulares y las respuestas involucradas en una infección. Por ejemplo, un estudio realizado en 2020 observó que los ARN no codificantes pequeños presentes en las vesículas de la membrana externa de Helicobacter pylori disminuyen la secreción de interleucina 8 en las células AGS humanas [4]. 

5. Publicaciones de investigación sobre la línea celular AGS

En esta sección del artículo se presentarán algunas publicaciones de investigación interesantes y entre las más citadas que tratan sobre las células AGS.

El salidrosido induce la apoptosis y la autofagia protectora en células AGS de cáncer gástrico humano a través de la vía PI3K/Akt/mTOR

Este estudio publicado en *Biomedicine & Pharmacotherapy* (2020) propuso que el salidrosido, un compuesto natural, induce la autofagia protectora y la muerte celular en las células epiteliales gástricas AGS mediante la modulación de la vía de señalización PI3K/AKT/mTOR.

El polisacárido de astrágalo potenció los efectos antitumorales del apatinib en células AGS de cáncer gástrico al inhibir la vía de señalización AKT

Este estudio se publicó en Biomedicine & Pharmacotherapy (2018). En él se exploraron los efectos anticancerígenos sinérgicos del polisacárido de astrágalo y el fármaco apatinib en células AGS. Los resultados del estudio revelaron que el astrágalo potencia los efectos antitumorales del apatinib al suprimir la señalización de AKT.

La curcuzedoalida contribuye a la citotoxicidad de los rizomas de Curcuma zedoaria contra las células AGS del cáncer gástrico humano mediante la inducción de la apoptosis

Esta investigación, publicada en la revista *Journal of Ethnopharmacology* (2018), propuso que la curcuzedoalida, un compuesto natural de la planta *Curcuma zedoaria Roscoe*, contribuye a su potencial citotóxico contra las células AGS.

La sobreexpresión de FOXA1 inhibe la proliferación celular y la transición epitelial-mesenquimal (EMT) de las células AGS del cáncer gástrico humano

Esta publicación en la revista *Gene* (2018) propuso que la regulación al alza de FOXA1 suprime la proliferación de las células de adenocarcinoma gástrico AGS, así como la transición epitelial a mesenquimal (EMT) y la invasión.

Los sncRNA empaquetados por las vesículas de la membrana externa de Helicobacter pylori atenúan la secreción de IL-8 en células humanas

Este artículo de investigación se publicó en la revista International Journal of Medical Microbiology en 2020. En este estudio, se utilizaron células AGS para analizar las interacciones entre el huésped y el patógeno. Los hallazgos revelaron que Helicobacter pylori contiene ARN no codificante en sus vesículas de membrana externa que afecta los niveles de IL-8 en las células AGS.

Recursos para la línea celular AGS: protocolos, videos y más

A continuación se presentan algunos recursos relacionados con las células AGS.

• Protocolo de transfección de células AGS: Este video es una guía paso a paso para aprender el protocolo de transfección de las células epiteliales gástricas AGS.

El siguiente enlace contiene el protocolo de cultivo de células AGS.

• Protocolo de cultivo de células AGS: Este sitio web contiene información útil sobre los medios de cultivo de las células AGS y los protocolos de cultivo celular. En resumen, ofrece un protocolo para el subcultivo de células epiteliales gástricas AGS y el manejo de cultivos de AGS en proliferación y criopreservados.
• Subcultivo de células AGS: Este sitio explica en detalle el procedimiento de subcultivo de las células AGS.

Referencias

1. Phuc, B.H., et al., Genómica comparativa de dos cepas vietnamitas de Helicobacter pylori: CHC155, procedente de un paciente con cáncer gástrico no cardíaco, y VN1291, procedente de un paciente con úlcera duodenal. Scientific Reports, 2023. 13(1): p. 8869.
2. Lin, J., et al., El miRNA-183-5p.1 promueve la migración y la invasión de las células AGS del cáncer gástrico al actuar sobre TPM1. Corrección en /10.3892/or.2020.7902. Oncology Reports, 2019. 42(6): p. 2371-2381.
3. Khing, T.M., et al., El efecto del paclitaxel sobre la apoptosis, la autofagia y la catástrofe mitótica en células AGS. Scientific Reports, 2021. 11(1): p. 23490.
4. Zhang, H., et al., Los sncARN empaquetados por las vesículas de la membrana externa de Helicobacter pylori atenúan la secreción de IL-8 en células humanas. International Journal of Medical Microbiology, 2020. 310(1): p. 151356.