เซลล์ AGS - การสำรวจเซลล์ AGS ของมะเร็งต่อมน้ำเหลืองในกระเพาะอาหารในงานวิจัยมะเร็ง

เซลล์ AGS เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งต่อมน้ำเหลืองของกระเพาะอาหารในมนุษย์ที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในงานวิจัยทางชีวการแพทย์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งใช้ในการศึกษาชีววิทยาของมะเร็งกระเพาะอาหาร รวมถึงการเจริญเติบโต การพัฒนา การลุกลาม และการแทรกแซงทางการรักษา นอกจากนี้ยังใช้ในการศึกษาปฏิสัมพันธ์ระหว่างโฮสต์กับเชื้อโรค

 

ลักษณะทั่วไปและแหล่งกำเนิดของเซลล์ AGS

การรู้เกี่ยวกับต้นกำเนิดและลักษณะทั่วไปของสายเซลล์เป็นสิ่งจำเป็นก่อนที่คุณจะเริ่มทำงานกับมัน ส่วนนี้จะครอบคลุมถึง: เซลล์ AGS คืออะไร? ต้นกำเนิดของเซลล์ AGS คืออะไร? ลักษณะทางสัณฐานวิทยาของสายเซลล์มะเร็ง AGS คืออะไร?

• เซลล์ไลน์ AGS ได้มาจากเนื้อเยื่อกระเพาะอาหารของหญิงชาวคอเคเชียนอายุ 54 ปีที่เป็นมะเร็งต่อมกระเพาะอาหาร โดยถูกแยกออกมาในปี 1979 [1]
• เซลล์ AGS มีลักษณะทางสัณฐานวิทยาคล้ายเยื่อบุผิว
• เซลล์เยื่อบุผิวกระเพาะอาหาร AGS มีลักษณะไฮเปอร์ไดพลอยด์ จำนวนโครโมโซมที่เป็นค่าโมดัลของเซลล์ AGS คือ 49 ซึ่งพบในเกือบ 60% ของเซลล์ นอกจากนี้ยังพบภาวะพอลิพลอยด์ในประมาณ 3.6% ของเซลล์

มะเร็งกระเพาะอาหารในลักษณะตัดขวางภายใต้กล้องจุลทรรศน์

การเพาะเลี้ยงข้อมูลเกี่ยวกับสายพันธุ์เซลล์ AGS

สำหรับการจัดการและการดูแลเซลล์ไลน์อย่างถูกต้อง คุณจำเป็นต้องรู้แนวคิดพื้นฐานเกี่ยวกับการเพาะเลี้ยงเซลล์ โดยเฉพาะอย่างยิ่ง คุณควรเรียนรู้: เวลาในการเพิ่มจำนวนเซลล์ AGS คืออะไร? สารอาหารที่ใช้เลี้ยงเซลล์ AGS คืออะไร? วิธีการแยกเซลล์ AGS ทำอย่างไร? สารอาหารสำหรับการแช่แข็งเซลล์เยื่อบุกระเพาะอาหาร AGS คืออะไร?

จุดสำคัญในการเพาะเลี้ยงเซลล์ AGS

เวลาสองเท่า:

เวลาการเพิ่มจำนวนของเซลล์ AGS อยู่ระหว่าง 24 ถึง 48 ชั่วโมง

ติดกันหรือแขวนลอย:

เซลล์ AGS เป็นเซลล์ที่เกาะติดกัน พวกมันเจริญเติบโตเป็นชั้นเดียว

ความหนาแน่นของการหว่านเมล็ด:

เซลล์ AGS ถูกเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่นของเซลล์ 1 x 10⁴ เซลล์/ซม.² เซลล์จะสร้างชั้นเดียวที่หนาแน่นเต็มที่ใน 3 ถึง 5 วัน หลังจากนำสื่อเก่าออก เซลล์จะถูกล้างด้วย 1 x PBS และบ่มด้วยสารละลายการแยก Accutase เซลล์ที่แยกตัวแล้วถูกนำไปแขวนลอยในอาหารเลี้ยงเซลล์และปั่นเหวี่ยง เซลล์ที่ตกตะกอนถูกแขวนลอยอีกครั้ง และหลังจากนับจำนวนเซลล์ AGS แล้ว จึงนำไปแบ่งใส่ในขวดเลี้ยงเซลล์ใหม่เพื่อเพาะเลี้ยงต่อไป

อาหารเลี้ยงเชื้อ:

ใช้สื่ออาหารเลี้ยงเซลล์ DMEM ที่มี FBS 10%, L-Glutamine 4 mM, กลูโคส 4.5 กรัม/ลิตร, NaHCO3 1.5 กรัม/ลิตร และ Sodium pyruvate 1.0 mM สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ AGS สื่ออาหารควรเปลี่ยนทุก 2 ถึง 3 วัน

เงื่อนไขการเจริญเติบโต: 

เซลล์ AGS ถูกเก็บไว้ในตู้เพาะเลี้ยงแบบควบคุมความชื้น (ที่อุณหภูมิ 37°C) พร้อมกับการจ่ายก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ 5%

การเก็บรักษา: 

เซลล์ AGS ที่ถูกแช่แข็งจะถูกเก็บไว้ในตู้แช่เย็นไฟฟ้าที่อุณหภูมิต่ำกว่า -150°C หรือในสถานะไอของไนโตรเจนเหลวเป็นระยะเวลานาน

กระบวนการแช่แข็งและตัวกลาง:

CM-1 หรือ CM-ACF medium ใช้สำหรับการแช่แข็งเซลล์ AGS การแช่แข็งเซลล์ดำเนินการผ่านกระบวนการแช่แข็งช้าที่อนุญาตให้อุณหภูมิลดลงเพียง 1°C ต่อนาที และช่วยปกป้องความมีชีวิตของเซลล์

กระบวนการละลาย

เซลล์เยื่อบุผิวของกระเพาะอาหารที่ถูกแช่แข็งจะถูกเขย่าอย่างรวดเร็วในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 37°C เป็นเวลา 40 ถึง 60 วินาที เซลล์ที่ละลายแล้วจะถูกแขวนลอยในอาหารเลี้ยงเชื้อใหม่และเทลงในขวดเพาะเลี้ยงใหม่เพื่อการเจริญเติบโต หลังจากบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมง สารอาหารจะถูกเปลี่ยนใหม่เพื่อกำจัดส่วนประกอบของสารอาหารที่ใช้ในการแช่แข็ง ตรงกันข้ามกับนี้ เซลล์ที่ละลายแล้วจะถูกปั่นเหวี่ยง และส่วนประกอบของสารอาหารที่ใช้ในการแช่แข็งจะถูกกำจัดออกไป จากนั้นเซลล์ที่เก็บเกี่ยวได้จะถูกแขวนลอยอีกครั้งและถูกแจกจ่ายลงในขวดเพาะเลี้ยงที่มีสารอาหารเพาะเลี้ยงอยู่

ระดับความปลอดภัยทางชีวภาพ:

ห้องปฏิบัติการระดับความปลอดภัยทางชีวภาพระดับ 2 มีความจำเป็นสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ AGS

 

เซลล์ AGS ที่กำลังขยาย 20 เท่า

สายเซลล์ AGS: ข้อดีและข้อจำกัด

บทความส่วนนี้จะอธิบายถึงข้อได้เปรียบและข้อจำกัดที่สำคัญบางประการที่เกี่ยวข้องกับเซลล์ AGS

ข้อดี

ข้อดีหลักของเซลล์เยื่อบุผิวกระเพาะอาหาร AGS คือ:

เพาะเลี้ยงง่าย

สายพันธุ์เซลล์มะเร็งกระเพาะอาหาร AGS สามารถรักษาสภาพได้ง่ายในห้องปฏิบัติการเพาะเลี้ยงเซลล์ ไม่มีความต้องการในการเพาะเลี้ยงที่ซับซ้อนหรือยุ่งยาก นอกจากนี้ยังมีลักษณะการเจริญเติบโตที่ดี ทำให้เป็นตัวเลือกที่เหมาะสมสำหรับการศึกษาชีววิทยาของมะเร็งกระเพาะอาหาร

ความเกี่ยวข้องกับมะเร็งกระเพาะอาหาร

เซลล์ AGS ได้มาจากมะเร็งต่อมน้ำเหลืองของกระเพาะอาหารในมนุษย์ ทำให้เซลล์เหล่านี้ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในการศึกษาชีววิทยาของมะเร็งกระเพาะอาหารและการรักษา

 

ข้อจำกัด

ข้อจำกัดที่เกี่ยวข้องกับสายเซลล์ AGS คือ:

แบบจำลองเซลล์ในหลอดทดลอง

เซลล์ AGS ถูกเพาะเลี้ยงในห้องปฏิบัติการวิจัยทางชีวการแพทย์ภายใต้สภาวะเทียม ดังนั้นเซลล์เหล่านี้อาจไม่สามารถจำลองสภาพแวดล้อมของมะเร็งกระเพาะอาหารในร่างกายจริงได้อย่างสมบูรณ์ รวมถึงการปฏิสัมพันธ์ระหว่างเซลล์และระดับโมเลกุลอื่นๆ

 

การประยุกต์ใช้เซลล์ AGS

เซลล์ AGS ถูกนำมาใช้โดยเฉพาะในการศึกษาชีววิทยาของมะเร็งกระเพาะอาหาร นอกจากนี้ยังมีศักยภาพในการประยุกต์ใช้ในด้านชีวการแพทย์อื่น ๆ อีกมากมาย งานวิจัยที่น่าสนใจบางประการที่ใช้เซลล์ AGS ได้แก่:

• การศึกษาโรคมะเร็งกระเพาะอาหาร: เซลล์ AGS เป็นเครื่องมือวิจัยที่ยอดเยี่ยมในการศึกษาโครงสร้างและกลไกระดับโมเลกุลที่อยู่เบื้องหลังการเจริญเติบโต การแพร่กระจาย และการบุกรุกของโรคมะเร็งกระเพาะอาหาร นักวิจัยยังใช้เซลล์เยื่อบุผิวกระเพาะอาหาร AGS ในการศึกษาการกระบวนการเซลล์ต่าง ๆ การกลายพันธุ์ทางพันธุกรรม และเส้นทางการส่งสัญญาณในกระบวนการพัฒนาของโรคมะเร็งกระเพาะอาหาร การศึกษาของ Oncology Reports (2019) พบว่า microRNA-183-5p.1 ส่งเสริมการเพิ่มจำนวน การเคลื่อนที่ และการรุกรานของเซลล์มะเร็งโดยการยับยั้งกระบวนการส่งสัญญาณ Bcl 2/P53 นอกจากนี้ ยังลดการแสดงออกของยีน TPM1 เพื่อทำให้เกิดผลเหล่านี้ ดังนั้น ทั้ง microRNA และ TPM1 จึงถูกเสนอให้เป็นเป้าหมายโมเลกุลที่มีประสิทธิภาพสำหรับการพัฒนาการรักษาโรคมะเร็งกระเพาะอาหารแบบเฉพาะเจาะจง [2]
• การคัดกรองยา: เซลล์ AGS ได้ถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในการคัดกรองยาต้านมะเร็งกระเพาะอาหารชนิดใหม่และมีประสิทธิภาพ นักวิจัยประเมินความเป็นพิษต่อเซลล์และประสิทธิภาพของยาที่มีศักยภาพโดยใช้สายพันธุ์เซลล์ AGS นอกจากนี้ยังมีการศึกษาเพื่อระบุเป้าหมายโมเลกุลใหม่และพัฒนาวิธีการรักษาแบบมุ่งเป้าเพื่อต่อสู้กับมะเร็งกระเพาะอาหาร การวิจัยที่ดำเนินการในปี 2021 ได้ใช้เซลล์มะเร็งกระเพาะอาหาร AGS และศึกษาผลทางบำบัดของยา paclitaxel ผลการวิจัยพบว่า paclitaxel กระตุ้นให้เกิดภาวะวิกฤตไมโทซิส ซึ่งเป็นกลไกสำคัญของการเกิดอะพอพโทซิสหรือการตายของเซลล์ในเซลล์ AGS นอกจากนี้ ยังส่งเสริมการเกิดออโตฟาจีในเซลล์มะเร็งกระเพาะอาหารอีกด้วย [3]
• ปฏิสัมพันธ์ระหว่างโฮสต์กับเชื้อก่อโรค: สายพันธุ์เซลล์มะเร็ง AGS ยังศึกษาปฏิสัมพันธ์ระหว่างโฮสต์กับเชื้อก่อโรคด้วย สิ่งนี้ช่วยให้นักวิจัยเข้าใจกลไกและการตอบสนองของเซลล์ที่เกี่ยวข้องกับการติดเชื้อได้ เช่น การศึกษาที่ดำเนินการในปี 2020 พบว่า RNA ที่ไม่เข้ารหัสขนาดเล็กซึ่งอยู่ในถุงหุ้มเยื่อหุ้มเซลล์ภายนอกของ Helicobacter pylori ลดการหลั่งอินเตอร์ลิวคิน 8 ในเซลล์ AGS ของมนุษย์ [4] 

5. งานวิจัยที่ตีพิมพ์เกี่ยวกับสายเซลล์ AGS

ส่วนนี้จะครอบคลุมบทความวิจัยที่น่าสนใจและได้รับการอ้างอิงมากที่สุดซึ่งนำเสนอเซลล์ AGS

ซาลิดโรไซด์เหนี่ยวนำให้เกิดการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิสและการเกิดออโตฟาจีแบบป้องกันในเซลล์มะเร็งกระเพาะอาหารมนุษย์ AGS ผ่านเส้นทาง PI3K/Akt/mTOR

การศึกษานี้ในวารสาร Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) เสนอว่าซาลิโดไรด์ ซึ่งเป็นสารประกอบธรรมชาติ สามารถกระตุ้นการเกิดออโตฟาจีแบบป้องกันและการตายของเซลล์ในเซลล์เยื่อบุกระเพาะอาหาร AGS ผ่านการปรับเปลี่ยนเส้นทางสัญญาณ PI3K/AKT/mTOR

สารโพลีแซ็กคาไรด์จาก Astragalus ช่วยเสริมฤทธิ์ต้านมะเร็งของ Apatinib ในเซลล์มะเร็งกระเพาะอาหาร AGS โดยยับยั้งเส้นทางสัญญาณ AKT

การศึกษานี้ได้รับการตีพิมพ์ในวารสาร Biomedicine & Pharmacotherapy (2018) โดยมุ่งศึกษาผลเสริมฤทธิ์กันในการต้านมะเร็งของสารโพลีแซ็กคาไรด์จากต้นแอสทรากาลัสร่วมกับยาอะพาทินิบในเซลล์ AGS ผลการศึกษาพบว่าสมุนไพรแอสทราแกตัลช่วยเพิ่มฤทธิ์ต้านมะเร็งของยาอะพาทินิบผ่านการยับยั้งการส่งสัญญาณของโปรตีน AKT

เคอร์คูซีโดอิดี มีส่วนช่วยในการทำลายเซลล์มะเร็งกระเพาะอาหาร AGS ของมนุษย์ ผ่านการเหนี่ยวนำให้เกิดการตายแบบอะพอพโทซิส

งานวิจัยในวารสาร Journal of Ethnopharmacology (2018) ได้เสนอว่า curcuzedoalide ซึ่งเป็นสารประกอบธรรมชาติจากพืช Curcuma zedoaria Roscoe มีส่วนช่วยในศักยภาพความเป็นพิษต่อเซลล์ของเซลล์ AGS

การแสดงออกของ FOXA1 มากเกินไปยับยั้งการเพิ่มจำนวนเซลล์และการเปลี่ยนแปลงของเซลล์มะเร็งกระเพาะอาหารมนุษย์ AGS

การตีพิมพ์ในวารสาร Gene (2018) เสนอว่า การเพิ่มขึ้นของ FOXA1 ช่วยยับยั้งการเพิ่มจำนวนของเซลล์มะเร็งต่อมน้ำเหลืองในกระเพาะอาหาร AGS และการเปลี่ยนแปลงของเซลล์จากเยื่อบุผิวไปเป็นเนื้อเยื่อเกี่ยวพัน (EMT) และการรุกราน

sncRNAs ที่บรรจุอยู่ในถุงหุ้มเยื่อหุ้มเซลล์ชั้นนอกของ Helicobacter pylori ลดการหลั่ง IL-8 ในเซลล์มนุษย์

บทความวิจัยนี้ได้รับการตีพิมพ์ในวารสารนานาชาติด้านจุลชีววิทยาการแพทย์ในปี 2020 ในการศึกษานี้ ได้ใช้เซลล์ AGS เพื่อศึกษาปฏิสัมพันธ์ระหว่างโฮสต์กับเชื้อก่อโรค ผลการศึกษาพบว่า Helicobacter pylori มี RNA ที่ไม่เข้ารหัสบางส่วนในถุงหุ้มเยื่อหุ้มเซลล์ชั้นนอกซึ่งส่งผลต่อระดับ IL-8 ในเซลล์ AGS

ทรัพยากรสำหรับสายเซลล์ AGS: โปรโตคอล, วิดีโอ, และอื่น ๆ

ต่อไปนี้คือแหล่งข้อมูลบางส่วนที่มีเซลล์ AGS

• โปรโตคอลการถ่ายโอนเซลล์ AGS: วิดีโอนี้เป็นคู่มือแบบทีละขั้นตอนสำหรับการเรียนรู้โปรโตคอลการถ่ายโอนสำหรับเซลล์เยื่อบุผิวกระเพาะอาหาร AGS

ลิงก์ต่อไปนี้ประกอบด้วยโปรโตคอลการเพาะเลี้ยงเซลล์ AGS

• โปรโตคอลการเพาะเลี้ยงเซลล์ AGS: เว็บไซต์นี้มีข้อมูลที่เป็นประโยชน์เกี่ยวกับอาหารเลี้ยงเซลล์ AGS และโปรโตคอลการเพาะเลี้ยงเซลล์ โดยสรุปแล้ว เว็บไซต์นี้มีโปรโตคอลสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์เยื่อบุกระเพาะอาหาร AGS การจัดการเซลล์ AGS ที่กำลังเพิ่มจำนวนและเซลล์ AGS ที่ถูกแช่แข็ง
• การเพาะเลี้ยงเซลล์ AGS ในอาหารเลี้ยงเชื้อ: เว็บไซต์นี้จะอธิบายขั้นตอนการเพาะเลี้ยงเซลล์ AGS ในอาหารเลี้ยงเชื้ออย่างละเอียด

เอกสารอ้างอิง

1. Phuc, B.H., et al., การเปรียบเทียบจีโนมของเชื้อ Helicobacter pylori สองสายพันธุ์จากเวียดนาม คือ CHC155 จากผู้ป่วยมะเร็งกระเพาะอาหารที่ไม่ใช่บริเวณคอทวาร และ VN1291 จากผู้ป่วยแผลในลำไส้เล็กส่วนต้น. Scientific Reports, 2023. 13(1): หน้า 8869.
2. Lin, J., และคณะ, miRNA‑183‑5p. 1 ส่งเสริมการเคลื่อนที่และการรุกรานของเซลล์มะเร็งกระเพาะอาหาร AGS โดยมุ่งเป้าไปที่ TPM1 การแก้ไขใน/10.3892/or. 2020.7902. Oncology reports, 2019. 42(6): หน้า 2371-2381.
3. Khing, T.M., et al., ผลของแพคลิแทกเซลต่อการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิส, อัตโนมัติ และการล่มสลายของไมโทซิสในเซลล์ AGS. รายงานทางวิทยาศาสตร์, 2021. 11(1): หน้า 23490.
4. จาง, เอช., และคณะ, sncRNAs ที่บรรจุอยู่ในถุงหุ้มเยื่อหุ้มเซลล์ชั้นนอกของ Helicobacter pylori ลดการหลั่ง IL-8 ในเซลล์มนุษย์. วารสารนานาชาติด้านจุลชีววิทยาทางการแพทย์, 2020. 310(1): หน้า 151356.