
- Tissue
- Sang périphérique
- Disease
- Adénocarcinome
- Metastatic site
- Sans objet (LCL-B transformée par l’EBV provenant d’un patient atteint d’un cancer colorectal associé au syndrome de Lynch)
- Synonyms
- B-LCL CO285, Bc HROC285
Documents
B-LCL-HROC285
Cell line · Product number 300869
B-LCL-HROC285 is an Epstein-Barr virus (EBV) transformed B lymphocyte cell line derived from a patient, who had colon adenocarcinoma associated with Lynch...
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01General information
- Description
La lignée cellulaire B-LCL-HROC285 est une lignée de lymphocytes B transformés par le virus d’Epstein-Barr (VEB), dérivée d’un patient atteint d’un adénocarcinome du côlon associé au syndrome de Lynch. Ce type particulier de cancer du côlon est lié au cancer colorectal héréditaire sans polypose (HNPCC), généralement causé par des mutations dans les gènes de réparation des mésappariements de l’ADN. La lignée cellulaire B-LCL-HROC285 permet d’étudier les processus de transformation liés à l’EBV dans les cellules B, ainsi que de mieux comprendre les réponses immunitaires associées au cancer.
La lignée B-LCL-HROC285 constitue un outil précieux pour comprendre les interactions du système immunitaire avec les cellules cancéreuses, en particulier la manière dont les cellules B transformées pourraient interagir avec l’environnement immunitaire dans les cancers colorectaux découlant du syndrome de Lynch. Cette lignée cellulaire est utile pour les études immunologiques et oncologiques en raison de son profil génétique et du processus de transformation par l’EBV, connu pour influencer la prolifération des cellules B et la sélection clonale.
- Tissue
- Sang périphérique
- Disease
- Adénocarcinome
- Metastatic site
- Sans objet (LCL-B transformée par l’EBV provenant d’un patient atteint d’un cancer colorectal associé au syndrome de Lynch)
- Applications
- Analyses des cellules T et des cellules NK; typage HLA; immunologie du syndrome de Lynch; réponse immunitaire associée à un déficit en réparation des mésappariements (MMR); cellules cibles pour les analyses des lymphocytes T cytotoxiques (CTL); études de la biobanque HROC appariées aux patients
- Synonyms
- B-LCL CO285
- Bc HROC285
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Suspension
- GMO status
- GMO-S2
- GMO status details
- GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as risk group 2; BSL-2 containment required. This classification applies within Germany; regulations may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- Cellules rondes
- Cell type
- Lymphoblaste B
04Identifiers
- Citation
- B-LCL-HROC285 (numéro de catalogue Cytion 300869)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- Not assigned
05Expression and susceptibility
- Viruses
- Transformant : EBV
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, contenant 2,0 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO₃ (numéro d'article Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.
- Supplements
- Ajouter au milieu 10 % de sérum fœtal bovin (FBS) inactivé par la chaleur
- Subculturing
- Homogénéisez délicatement la suspension cellulaire dans le flacon en pipettant de haut en bas, puis prélevez un échantillon représentatif afin de déterminer la densité cellulaire par ml. Diluez la suspension avec du milieu de culture frais jusqu’à obtenir une concentration cellulaire de 1 × 10⁵ cellules/ml, puis répartissez la suspension ajustée en aliquotes dans de nouveaux flacons en vue de la poursuite de la culture.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.
Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.
- Freeze medium
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
- Storage conditions
Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.
- Shipping conditions
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
08Donor
- Donor age
- 30 ans
- Ethnicity
- caucasien
09Legal and safety
- Safety precautions
- Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.
- Warranty
Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.
Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.
- Third-party agreements apply
- Yes