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B-LCL-HROC285
Tessuto
Sangue periferico
Malattia
Adenocarcinoma
Sito metastatico
Non applicabile (LCL di tipo B trasformata dall’EBV proveniente da un paziente affetto da carcinoma del colon-retto associato alla sindrome di Lynch)
Sinonimi
B-LCL CO285, Bc HROC285

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B-LCL-HROC285

Cell line · Codice prodotto 300869

B-LCL-HROC285 is an Epstein-Barr virus (EBV) transformed B lymphocyte cell line derived from a patient, who had colon adenocarcinoma associated with Lynch...

€800.00IVA e spese di spedizione escluse

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01Informazioni generali

Descrizione

B-LCL-HROC285 è una linea cellulare di linfociti B trasformati dal virus di Epstein-Barr (EBV), derivata da un paziente affetto da adenocarcinoma del colon associato alla sindrome di Lynch. Questo tipo specifico di cancro al colon è legato al cancro colorettale ereditario non poliposico (HNPCC), comunemente causato da mutazioni nei geni di riparazione del mismatch del DNA. La linea cellulare B-LCL-HROC285 consente di studiare i processi di trasformazione legati all'EBV nelle cellule B e di comprendere le risposte immunitarie legate al cancro.

La linea B-LCL-HROC285 fornisce uno strumento prezioso per comprendere le interazioni del sistema immunitario con le cellule tumorali, in particolare il modo in cui le cellule B trasformate potrebbero interagire con l'ambiente immunitario nei tumori colorettali derivanti dalla sindrome di Lynch. Questa linea cellulare è utile per studi immunologici e oncologici grazie al suo background genetico e al processo di trasformazione EBV, che notoriamente influenza la proliferazione delle cellule B e la selezione clonale.

Tessuto
Sangue periferico
Malattia
Adenocarcinoma
Sito metastatico
Non applicabile (LCL di tipo B trasformata dall’EBV proveniente da un paziente affetto da carcinoma del colon-retto associato alla sindrome di Lynch)
Applicazioni
Analisi delle cellule T e delle cellule NK; tipizzazione HLA; immunologia della sindrome di Lynch; risposta immunitaria associata alla deficienza del sistema di riparazione dei mismatch (MMR); cellule bersaglio per l’analisi dei linfociti T citotossici (CTL); studi basati su biobanca HROC con pazienti abbinati
Sinonimi
  • B-LCL CO285
  • Bc HROC285

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Sospensione
Presenza di OGM
GMO-S2
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as risk group 2; BSL-2 containment required. This classification applies within Germany; regulations may differ elsewhere.
Livello di biosicurezza
2

03Caratteristiche

Morfologia
Celle rotonde
Tipo di cellula
Linfoblasto B

04Identificatori

Riferimento bibliografico
B-LCL-HROC285 (numero di catalogo Cytion 300869)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
Not assigned

05Espressione e suscettibilità

Virus
Trasformante: EBV

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS inattivato termicamente
Subcoltura
Omogeneizzare delicatamente la sospensione cellulare nel pallone pipettando verso l'alto e verso il basso, quindi prelevare un campione rappresentativo per determinare la densità cellulare per ml. Diluire la sospensione per ottenere una concentrazione cellulare di 1 x 105 cellule/ml con terreno di coltura fresco e aliquotare la sospensione regolata in nuovi palloni per l'ulteriore coltivazione.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
30 anni
Etnia
Caucasico