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B-LCL-HROC285
ティッシュ
末梢血
病気
腺癌
転移部位
該当なし(リンチ症候群の大腸がん患者由来のEBV変異型B細胞線維芽細胞様細胞株)
同義語
B-LCL CO285, Bc HROC285

B-LCL-HROC285

Cell line · 製品番号 300869

B-LCL-HROC285 is an Epstein-Barr virus (EBV) transformed B lymphocyte cell line derived from a patient, who had colon adenocarcinoma associated with Lynch...

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01概要

説明

B-LCL-HROC285は、エプスタイン・バー・ウイルス(EBV)により形質転換されたBリンパ球細胞株であり、リンチ症候群に伴う大腸腺癌を発症した患者由来である。この特定のタイプの結腸癌は遺伝性非ポリポーシス結腸直腸癌(HNPCC)に関連しており、一般的にDNAミスマッチ修復遺伝子の突然変異によって引き起こされる。B-LCL-HROC285細胞株は、B細胞におけるEBVに関連した形質転換過程の研究を可能にし、またがんに関連した免疫応答についての洞察も可能にする。

B-LCL-HROC285は、免疫系と癌細胞との相互作用、特にリンチ症候群に起因する大腸癌において形質転換したB細胞が免疫環境とどのように相互作用するかを理解するための貴重なツールとなる。この細胞株は、その遺伝的背景と、B細胞の増殖とクローン選択に影響を及ぼすことが知られているEBVの形質転換プロセスにより、免疫学的および腫瘍学的研究に有用である。

ティッシュ
末梢血
病気
腺癌
転移部位
該当なし(リンチ症候群の大腸がん患者由来のEBV変異型B細胞線維芽細胞様細胞株)
用途
T細胞およびNK細胞アッセイ;HLAタイピング;リンチ症候群の免疫学;ミスマッチ修復(MMR)欠損に関連する免疫応答;CTLアッセイの標的細胞;HROCバイオバンクを用いた患者マッチング研究
同義語
  • B-LCL CO285
  • Bc HROC285

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
サスペンション
GMOの有無
GMO-S2
GMOのステータスに関する詳細
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as risk group 2; BSL-2 containment required. This classification applies within Germany; regulations may differ elsewhere.
バイオセーフティレベル
2

03特徴

形態学
丸い細胞
細胞の種類
Bリンパ芽球

04識別子

引用
B-LCL-HROC285 (Cytion カタログ番号 300869)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
Not assigned

05発現と感受性

ウイルス
形質転換体EBV

06取り扱いと飼育

培地
RPMI1640、w:2.0mM安定グルタミン、w:2.0g/L NaHCO3(Cytion article number 820700a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10%熱不活性化FBSを添加する。
継代培養
フラスコ内の細胞懸濁液をピペッティングにより上下に優しく均質化し、代表的なサンプルを採取して1mlあたりの細胞密度を測定する。新鮮な培養液で懸濁液を希釈し、細胞濃度を1×10⁵細胞/mlに調整した後、調整した懸濁液を新たなフラスコに分注し、さらなる培養を行う。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
30年
民族
白人