
- Tissue
- Sangue periférico
- Disease
- Adenocarcinoma
- Metastatic site
- Não aplicável (LCL de células B transformadas pelo EBV de um paciente com CCR associado à síndrome de Lynch)
- Synonyms
- B-LCL CO285, Bc HROC285
Documents
B-LCL-HROC285
Cell line · Product number 300869
B-LCL-HROC285 is an Epstein-Barr virus (EBV) transformed B lymphocyte cell line derived from a patient, who had colon adenocarcinoma associated with Lynch...
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01General information
- Description
A B-LCL-HROC285 é uma linhagem celular de linfócitos B transformada pelo vírus de Epstein-Barr (EBV), derivada de um paciente que apresentava adenocarcinoma de cólon associado à síndrome de Lynch. Esse tipo específico de câncer de cólon está associado ao câncer colorretal hereditário sem polipose (HNPCC), comumente causado por mutações nos genes de reparo de incompatibilidade de DNA. A linhagem celular B-LCL-HROC285 permite o estudo dos processos de transformação relacionados ao EBV em células B, bem como o entendimento das respostas imunológicas relacionadas ao câncer.
A B-LCL-HROC285 constitui uma ferramenta valiosa para compreender as interações do sistema imunológico com as células cancerosas, particularmente como as células B transformadas podem interagir com o ambiente imunológico em cânceres colorretais decorrentes da síndrome de Lynch. Essa linhagem celular é útil para estudos imunológicos e oncológicos devido ao seu background genético e ao processo de transformação pelo EBV, que é conhecido por influenciar a proliferação de células B e a seleção clonal.
- Tissue
- Sangue periférico
- Disease
- Adenocarcinoma
- Metastatic site
- Não aplicável (LCL de células B transformadas pelo EBV de um paciente com CCR associado à síndrome de Lynch)
- Applications
- Ensaios com células T e células NK; tipagem de HLA; imunologia da síndrome de Lynch; resposta imunológica associada à deficiência do reparo de incompatibilidade (MMR); células-alvo para ensaios de CTL; estudos com correspondência de pacientes no biobanco HROC
- Synonyms
- B-LCL CO285
- Bc HROC285
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Suspension
- GMO status
- GMO-S2
- GMO status details
- GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as risk group 2; BSL-2 containment required. This classification applies within Germany; regulations may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- Células redondas
- Cell type
- Linfoblasto B
04Identifiers
- Citation
- B-LCL-HROC285 (número de catálogo da Cytion 300869)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- Not assigned
05Expression and susceptibility
- Viruses
- Transformante: EBV
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, com 2,0 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion: 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione ao meio 10% de FBS inativado por calor
- Subculturing
- Homogeneíze suavemente a suspensão celular no frasco por meio de pipetagem para cima e para baixo e, em seguida, colete uma amostra representativa para determinar a densidade celular por ml. Dilua a suspensão com meio de cultura fresco até atingir uma concentração celular de 1 x 10⁵ células/ml e distribua a suspensão ajustada em alíquotas em novos frascos para continuação do cultivo.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
08Donor
- Donor age
- 30 anos
- Ethnicity
- caucasiano
09Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Third-party agreements apply
- Yes